Analisis PCR untuk diagnosis tuberkulosis

Perubatan tidak pernah berhenti, dan sehingga kini, kemajuan dalam sektor kesihatan memungkinkan untuk mendiagnosis dan menyembuhkan banyak penyakit sebelum ini yang tidak terjejas. Terdapat juga penyakit yang tidak dapat dikesan dengan pemeriksaan visual. Tuberkulosis sentiasa ada di kalangan mereka. Ia adalah penyakit berjangkit berbahaya yang memberi kesan kepada paru-paru, sendi dan tulang, dan sering menyebabkan kematian walaupun pada zaman kita. Kaedah diagnostik untuk penyakit ini telah diperbaiki, yang memungkinkan untuk mengesan penyakit pada peringkat awal apabila ia boleh dirawat. Antaranya bukan sahaja ujian X-ray dan Mantoux, tetapi juga PCR untuk batuk kering.

Tuberkulosis - apa itu

Sebelum ini, tuberkulosis dipanggil penyakit kering atau phthisis. Ini adalah jangkitan bakteria yang paling kerap memberi kesan kepada paru-paru. Bentuk ekstrapulmonary - tuberkulosis tulang dan sendi, meningitis tuberkular - tahap kurang biasa dan lebih maju. Agen penyebab penyakit berjangkit ini adalah mycobacteria. Bacillus tuberculosis juga dikenali sebagai tongkat Koch.

Infeksi TB sangat menular, ia ditularkan melalui titisan udara apabila batuk dan bersin dengan pesakit. Satu-satunya perlindungan terhadap penyakit ini adalah vaksin yang diberikan tepat pada masanya. Ia tidak melindungi jangkitan, tetapi tidak membenarkan bacilli masuk ke dalam badan untuk menyebabkan tuberkulosis.

Bentuk tuberkulosis

Penyakit ini boleh berlaku dalam bentuk terbuka dan tertutup. Perbezaannya adalah seperti berikut:

• tuberkulosis yang tertutup adalah asimtomatik. Dalam keadaan sedemikian, tongkat Koch di dalam dahak adalah mustahil untuk mengesan, oleh itu, yang dijangkiti tidak berbahaya bagi alam sekitar. Cara semacam penyakit ini biasanya tidak mengancam yang paling terinfeksi, tetapi ada pengecualian - dalam satu kes sepuluh, tuberkulosis tertutup dapat masuk ke bentuk terbuka;
• dengan bentuk terbuka, mikobakteria yang menyebabkan tuberkulosis ditemui dalam air liur dan pesakit pesakit. Organisma yang dijangkiti memberikan bahaya besar kepada masyarakat, walaupun secara berasingan. Sebagai peraturan, penyakit ini mula-mula mempengaruhi paru-paru. Jika tidak didiagnosis lebih awal, ia mungkin mengambil bentuk lain, seperti tuberkulosis tulang atau sendi.

Bentuk tuberkulosis yang terbuka didiagnosis dalam pelbagai cara. Pesakit menjalani X-ray dada atau X-ray dada, menganalisis bahan biologi atau ujian kulit Mantoux. Baru-baru ini, kaedah lain telah muncul yang dianggap sama berkesan - analisis tindak balas rantai polimerase (PCR).

Apakah maksud PCR?

Dalam amalan perubatan, kaedah mendiagnosis ini atau penyakit dengan mengesan DNA atau RNA dalam tubuh manusia telah lama digunakan. Ini adalah PCR untuk tuberkulosis. Ini adalah analisis ketepatan tinggi darah atau cecair biologi yang lain, yang membolehkan anda mengenal pasti bakteria dengan sekurang-kurangnya kepekatan mereka dalam bahan terpilih, sel tunggal cukup. Kajian ini dijalankan menggunakan enzim polimerase khas.

Kelebihan kaedah

PCR adalah kaedah diagnostik yang telah menunjukkan dirinya dari sisi terbaik, oleh itu ia digunakan dengan kerap, kedua-duanya digabungkan dengan kaedah lain dan secara bebas. Kelebihannya:

• syarat pengeluaran yang paling singkat. Kajian ini dijalankan dengan cepat, dalam masa 5 jam menggunakan PCR dapat mengesan kehadiran bacillus tuberkulosis dalam cairan biologis pesakit. Ini benar terutamanya jika anda perlu melakukan campur tangan pembedahan segera, dan sebelum itu mendapat diagnosis yang tepat;
• Ia berlaku bahawa kaedah diagnostik lain adalah kontraindikasi kepada pesakit. Sebagai contoh, X-ray boleh dilakukan dengan tidak bermakna semua orang. Di samping itu, gambar tidak selalu mungkin untuk membuat diagnosis, terutama jika penyakit itu berada di peringkat awal. Dengan bantuan kaedah PCR, patogen dikesan dengan serta-merta;
• Mana-mana bendalir biologi pesakit sesuai untuk analisis. PCR air kencing dan air liur untuk tuberkulosis dilakukan untuk mengenal pasti bentuk paru-paru dan ekstrapulmonari. Kajian ini juga dijalankan menggunakan cairan tulang belakang pesakit untuk mengesan meningitis tuberkulosis.
• Kaedah ini sememangnya selamat. Untuk menjalankannya, ia cukup untuk mendapatkan cecair biologi dari pesakit. Diagnosis PCR tuberkulosis pada kanak-kanak adalah mudah dan tidak berbahaya, kerana pemeriksaan sinar-X dibenarkan hanya dari usia 18 tahun, dan ujian Mantoux kadang-kadang menyebabkan reaksi buruk;
• PCR adalah analisis yang sangat sensitif. Ia membolehkan anda mengenal pasti batang Koch dengan kepekatan minimum mycobacteria;
• Dengan bantuan enzim polimerase khas, penyakit disahkan di mana-mana peringkat, dari awal hingga maju;
• kaedah ini berkesan dalam mendiagnosis kekambuhan penyakit;
• Kaedah ini merupakan satu kejayaan dalam membuat diagnosis tepat pada peringkat awal penyakit. Ini membolehkan anda memulakan rawatan dalam masa yang sesingkat mungkin dan memusnahkan patogen, ketika mereka belum mempunyai kesan negatif yang tidak dapat diubah pada organ dan sistem tubuh manusia.

Di mana untuk melakukan analisis PCR untuk batuk kering

Walaupun analisis PCR untuk tuberkulosis adalah kaedah yang sangat berkesan untuk mendiagnosis penyakit ini, ia jarang digunakan sendiri. Sebagai peraturan, ini adalah satu kaedah tambahan untuk mengesan tuberkulosis dan ia jarang digunakan. Hakikatnya ialah kaedah ini agak mahal.

Klinik awam tidak mempunyai peluang untuk membeli peralatan khas untuk menjalankan analisis PCR, dan kerajaan tidak melihat titik pembiayaan artikel ini, kerana tuberkulosis boleh didiagnosis dengan cara lain. Kajian semacam ini sering dijalankan di klinik swasta yang mampu membeli peralatan yang diperlukan.

Kelemahan kaedah ini

Harga yang tinggi bukanlah satu-satunya kelemahan PCR. Sebagai tambahan kepada kos yang tinggi, kaedah ini mempunyai kelemahan dan kekurangan lain, sebagai contoh:

• PCR untuk tuberkulosis memberikan hasil positif walaupun selepas rawatan, kerana ia mengambil sel-sel mati sebagai bakteria hidup, maka kaedah ini tidak sesuai sebagai pemeriksaan kawalan pesakit untuk mengesahkan pemulihannya;
• mutasi bacilli tuberkulosis, dan DNA mereka diubah suai, yang boleh menjejaskan kebolehpercayaan hasilnya;
• Ujian darah PCR untuk tuberkulosis jarang dilakukan, kerana kehadiran Koch dalam cecair biologi ini amat sukar untuk diuji. Ini hanya boleh dilakukan pada peringkat akhir atau sepsis. Biasanya, pesakit pesakit diambil untuk diagnosis;

Perlu diingat bahawa hasil yang paling tepat adalah dengan tepat pengumpulan kandungan perut pesakit. Jika tuberkulosis pulmonari disyaki, budaya dahak akan menjadi cara yang paling berkesan untuk mendiagnosis penyakit ini. Sekiranya pesakit mempunyai bentuk ekstrapulmonari, maka tidak ada bakteria dalam bioenvironment ini. Untuk menentukan tuberkulosis tulang, sendi, dan lain-lain menggunakan PCR, satu lagi cecair biologi diperlukan, contohnya, cecair spinal.

Bagaimana PCR untuk tuberkulosis?

Seperti yang dijelaskan sebelumnya, intipati analisis PCR adalah untuk mengenal pasti DNA patogen dalam cecair biologi pesakit oleh tindak balas polimerase. Tahap utama kaedah:

1. Pensampelan bahan biologi. PCR bukan sahaja hemotest - biomas yang dikaji boleh menjadi air liur, air kencing, cecair cerebrospinal, cecair cuci bronkial, kandungan perut, dahak.
2. Selepas itu, biomas terdedah kepada suhu tinggi untuk menghancurkan struktur DNA patogen.
3. Kemudian suhu secara beransur-ansur berkurangan dan primer dipasangkan ke elemen DNA yang telah dimusnahkan.
4. Menurut hasil sintesis molekul, yang mengambil masa kira-kira 30 kitaran, ketegangan bakteria patogen tertentu dikesan atau ketiadaannya.

Analisis ini memerlukan pembiayaan yang baik, jadi PCR tidak dilakukan dengan kerap. Walau bagaimanapun, kaedah ini tidak sama, apabila pilihan diagnostik lain dilarang, atau dalam keadaan kecemasan, apabila tidak ada masa untuk menunggu hasilnya.

Menyimpulkan

Sebagai kesimpulan, kita boleh membuat kesimpulan berikut:

• PCR adalah analisis yang sangat tepat yang dapat mengesan tuberkulosis beberapa hari selepas jangkitan;
• analisis ini dilakukan dalam masa 3.5 - 5 jam, jadi dalam kes apabila bil berjalan ke jam, ia tidak boleh ditukar;
• ia adalah kaedah yang selamat yang tidak mempunyai kesan sampingan;
• Ia digunakan apabila kaedah diagnostik lain menunjukkan hasil yang tidak konsisten atau penggunaannya adalah kontraindikasi.

Walau bagaimanapun, PCR jarang dilakukan, kerana ia adalah analisis mahal yang memerlukan pemasangan peralatan khas. Di samping itu, ia tidak selalu bermaklumat, jadi pakar menggunakan kaedah mengesan tuberkulosis sebagai tambahan.

Kelebihan dan kekurangan PCR (a) untuk diagnosis batuk kering

Jangkitan tuberkulosis tertentu telah wujud dalam tisu manusia dan struktur selama bertahun-tahun, dan dalam keadaan tertentu ia menyebar dengan cepat ke seluruh badan dalam 2-3 bulan. Kadang-kadang kursus terbaik rawatan sangat sukar untuk dipilih kerana diagnosis lewat dan penyesuaian patogen kepada banyak ubat-ubatan.

Diagnosis PCR terkini tuberkulosis membantu untuk mengesan bukan sahaja penyakit yang maju, tetapi juga patogen itu sendiri, apabila tanda-tanda awal penyakit itu belum muncul.

Apakah PCR?

Diagnosis tuberkulosis oleh PCR telah muncul baru-baru ini. Pada tahun 1983, ahli mikrobiologi dari Amerika, Cary Mullis, mencipta satu prosedur yang mana mikroorganisma boleh dibina semula daripada bahan biologi dalam segmen pendek. Kerja ini telah menerima Hadiah Nobel.

PCR untuk tuberkulosis adalah proses rantai polimer di mana diagnosis dan pengesanan patogen virus oleh kejuruteraan genetik. Teknik ini digunakan dalam makmal imunologi, mikrobiologi, virologi dan biokimia.

Kaedah sejagat membantu doktor untuk mendiagnosis dan mengenalpasti proses berjangkit walaupun selepas jam pertama jangkitan, jauh sebelum timbul gejala. Penyelidikan adalah mungkin walaupun dengan sedikit biomaterial.

Apa yang diperlukan untuk analisis?

• Beberapa segmen DNA (primer), yang mana sintesis biologi bermula;
• Sebatian nukleotida, asas molekul DNA atau RNA;
• Enzim polimerase yang mempercepat analisis PCR.

Apakah asas kaedah itu?

Pertama, satu segmen DNA diekstrak daripada biomaterial dari orang yang dijangkiti, menggunakan kaedah biosintesis gen-molekul, jenis mikroorganisma yang mana kepunyaan biofragment ditentukan selanjutnya.

Reaksi kompleks ini mengambil sedikit masa daripada beberapa biomethods. PCR menentukan patogen dalam beberapa jam, sementara tidak ada keperluan untuk mengasingkannya dari cecair biologi (sputum, serebrospinal atau media darah), tidak perlu membesarkannya untuk jangka masa yang panjang pada medium nutrien. Adalah cukup bahawa bahan yang dikaji mengandungi sehelai DNA patogen berjangkit.

Apabila melakukan ujian darah PCR untuk tuberkulosis dalam vitro, sintesis asid ribonukleik tuberkulosis mycobacterium dicipta secara buatan.

Tahap diagnosis

Reaksi molekul oleh PCR adalah prosedur mudah yang memerlukan sedikit masa. Biomaterial yang diperlukan diambil: darah, dada, cecair penyemburan bronkial digunakan untuk menentukan tbc.

1. Pertama, bentuk utama DNA dimusnahkan, 2 rantai dipisahkan pada suhu tinggi (maksimum 98 ° C tidak lebih daripada 2 minit);
2. Kemudian annealing dilakukan, suhu utama dikurangkan oleh beberapa bahagian, helai DNA dikaitkan dengan primer;
3. Peringkat seterusnya dipanggil pemanjangan, dengan biosintesis struktur molekul yang diperlukan.

Untuk mendapatkan bilangan salinan DNA yang diperlukan, dari 25 hingga 30 kitaran mesti lulus, dan jumlah mikobakteria yang dihasilkan mudah dikenali.

Adakah perlu melakukan PCR untuk tuberkulosis?

Secara langsung kepada semua pesakit yang disyaki TVC, diagnostik rantaian tidak dilakukan, kerana prosedur memerlukan penggunaan peralatan mahal. Tidak semua institusi negeri perubatan membiarkannya dibeli, terutama kerana kaedah biasa mendiagnosis mycobacterium tuberculosis juga bermaklumat.

• Berhati-hati mengambil riwayat, mempersoalkan pesakit;
• Pemeriksaan luaran;
• Ujian tuberkulin Mantoux;
• Pemeriksaan radiografi atau radiografi;
• Jika perlu, diagnostik komputer;
• Pemeriksaan mikroskopik atau bacteriological topeng dengan sputum.

PCR untuk tuberkulosis hanya dilakukan apabila tidak mungkin untuk melakukan analisis instrumental yang lain atau dalam keadaan yang sukar didiagnosis.

Walaupun banyak kaedah diagnostik telah dicipta, bilangan pesakit dengan tuberkulosis terus berkembang. Di samping itu, insiden telah memperoleh beberapa ciri: bentuk penyakit yang teruk sering diperhatikan, bilangan kematian meningkat, patogen menjadi tahan terhadap ubat kemoterapi yang sedia ada.

Ramai orang tidak mahu menjalani pemeriksaan rutin setiap tahun, menolak vaksinasi, yang membawa kepada peningkatan kejadian. Keadaan sedemikian memerlukan kaedah penyelidikan yang berkesan dan bermaklumat yang disediakan untuk orang dewasa dan kanak-kanak yang didiagnosis dengan tbc. PCR mempunyai kelebihan berbanding kaedah diagnostik lain.

Apakah nilai kaedah?

Penyelidikan terbaru ini telah terbukti dengan baik. Sekiranya beberapa sebab sukar untuk membuat diagnosis atau, dalam beberapa kes kontroversi, PCR mengesan bacillus tuber lebih mudah dalam bahan biologi daripada kaedah lain.

• Kajian pesat ini, satu segmen kecil molekul yang memungkinkan untuk membuat diagnosis yang tepat dalam masa yang singkat dalam kira-kira 5 jam, ini digunakan dalam kes-kes kecemasan, sebagai contoh, sebelum campur tangan pembedahan segera;
• Ujian darah untuk tuberkulosis adalah mungkin apabila kaedah lain tidak tersedia atau dikontraindikasikan - kadang kala untuk mengesan patogen tbc, banyak Rg-shot harus diambil, dos radiasi yang terlalu besar;
• Menggunakan tindak balas polimerase, sebarang cecair biologi boleh diperiksa untuk kehadiran mikobakteri. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair cerebrospinal dengan meningitis atau air kencing yang berbahaya dengan tuberkulosis urogenital;
• Kaedah ini selamat, diagnosis tuberkulosis pada kanak-kanak yang menggunakan PCR tidak menyebabkan kesukaran;
• Kaedah tindak balas polimer mendedahkan bacillus tubercle dalam sebarang bentuk dan peringkat penyakit;
• Kehadiran hanya beberapa bakteria dalam biomaterial membolehkan anda melihat kehadiran mikroorganisma, kerana ini adalah tindak balas sensitif;
• PCR dengan mudah meng diagnosis kambuhan penyakit ini.

Walaupun terdapat banyak kelebihan, semua pesakit yang disyaki kajian tbc tidak dilakukan, kerana terdapat juga kekurangan, mereka juga diambil kira.

Video

Video - diagnosis awal

Apakah kelemahan?

Kaedah diagnosis ini agak luar biasa daripada alam semula jadi, kerana ini ada sebab. Pertama sekali, kos tinggi kaedah itu diambil kira. Peralatan itu mahal, klinik awam tidak mempunyai peluang untuk membeli kerana harga yang tinggi, tetapi kebanyakan makmal yang dibayar mempunyai peralatan, mereka dianalisis.

• Kaedah mengesan bakteria mati yang telah mati selepas rawatan, sementara PCR menunjukkan hasil yang positif. Sejurus selepas kemoterapi, ia tidak masuk akal untuk menjalankan kajian, kerana hasilnya tidak boleh dipercayai;
• Mutasi Mycobacterium tuberculosis adalah mudah terdedah, yang menyebabkan ketidakcekapan kaedah dan strand DNA tidak dapat disintesis secara konsisten.

Persekitaran untuk kajian itu perlu dipilih dengan teliti, darah atau air kencing hanya boleh dikumpulkan jika terdapat kecurigaan jangkitan. Sputum tidak boleh diambil untuk pemeriksaan jika tuberkulosis tulang disyaki. Dalam keadaan ini, diagnosis akan menjadi tidak betul.

Darah dan air kencing pesakit dengan tuberkulosis yang dikaji pada PCR jarang diambil, pengenalan penyakit dengan cara ini adalah dipersoalkan. Dalam media biologi, patogen ini hanya ditentukan dalam sepsis, atau dalam kes tuberkulosis yang disebarkan. Bentuk tempatan adalah yang paling biasa, dengan darah dan air kencing mereka tetap tidak berubah. Selalunya, kahak diambil untuk pemeriksaan.

Siapa yang menunjukkan analisis?

Kebanyakan pesakit dihantar untuk diagnosis PCR dalam kes kontroversi dan kesukaran tuberkulosis. Bilakah profesional perubatan mengemukakan rujukan untuk penyelidikan?

1. Sekiranya ada hubungan dengan seseorang yang telah dihidapi secara diagnosis dengan tuberkulosis, tetapi sukar untuk mendiagnosis menggunakan kaedah konvensional;
2. Dalam keadaan tersebut, jika pesakit untuk menyediakan klinik adalah mustahil untuk radiografi atau penyelidikan lain. Dalam keadaan sedemikian, lebih mudah untuk memeriksa menggunakan kaedah polimer. Analisis sputum hanya dihantar ke makmal di dalam bekas khas, dan hasilnya diketahui selepas beberapa jam;
3. Sebelum pembedahan, sangat diperlukan untuk menentukan sama ada pesakit sakit tuberkulosis, di mana PCR ditunjukkan;
4. Kerana keselamatan kaedah itu, mungkin melakukan kaji selidik seorang wanita hamil atau kanak-kanak, tanpa membuat beban x-ray tambahan;
5. Keputusan ujian Mantoux yang ragu-ragu.

Sesiapa yang ingin menjalani pemeriksaan dengan bayaran jika tuberkulosis tidak disahkan menggunakan bakteria dan fluoroskopi. Ini berlaku jika luka dalam tisu paru-paru tidak kelihatan dalam imej Rg dalam unjuran langsung, dan pesakit tidak dapat mengumpul sputum dengan betul, tetapi tanda-tanda tuberkulosis manusia terganggu.

Tindak balas PCR moden untuk diagnosis adalah kunci kepada rawatan yang berjaya, akibatnya kelaziman penyakit berkurangan. Kaedah tradisional mengenal pasti penyakit tidak selalu menghasilkan kesan yang diingini.

Jadi analisis PCR setakat ini telah menjadi salah satu kaedah diagnostik yang boleh dipercayai dan selamat di peringkat awal penyakit.

Terdapat kontraindikasi kepada ujian Mantoux? Analisis PCR untuk tuberkulosis akan dilakukan.

Tuberculosis adalah penyakit berbahaya yang dapat dirawat dengan baik dengan diagnosis tepat pada masanya.

Salah satu kajian yang paling bermaklumat untuk mengenal pasti penyakit pada peringkat awal dipanggil kaedah tindak balas PCR (polimerase rantai).

Analisis PCR bukan sahaja merupakan yang paling bermaklumat, tetapi juga satu kajian yang paling mudah diakses yang dapat mengesan tuberkulosis pada peringkat awal.

Apakah analisis PCR?

Semua mikroorganisma yang hidup, termasuk virus dan bakteria, mengandungi RNA dan molekul DNA dalam struktur mereka. Dengan menonjolkan asid ini, adalah mungkin untuk mengatakan dengan pasti kepastian agen-agen asing berada dalam darah manusia dan membuat diagnosis yang tepat.

Inti dari kaedah PCR adalah pemprosesan khusus sampel cecair biologi, sebagai hasilnya adalah mungkin untuk menentukan spesies mana yang terdapat dalam mikroorganisma di dalamnya.

Analisis PCR untuk tuberkulosis: petunjuk, kebaikan dan keburukan

Teknik PCR digunakan pada orang dengan luka paru-paru yang teruk dalam kes-kes dan pernafasan pernafasan (batuk yang teruk, hemoptysis), ketika tidak mungkin untuk mendiagnosis dengan tepat oleh gejala klinik.

Ia disyorkan untuk menjalani kajian dan selepas hubungan langsung dengan pembawa penyakit itu. Kelebihannya termasuk:

• kelajuan pelaksanaan - untuk mendapatkan hasil, anda tidak perlu mengembangkan budaya patogen atau menjalankan prosedur kompleks yang lain;
• sangat bermaklumat - ketika mendiagnosis tuberkulosis, ketepatan analisis mencapai 90% dan lebih tinggi;
• kepekaan dan kekhususan yang tinggi - untuk mengenal pasti patogen dalam bahan boleh mengandungi hanya satu sel virus;
• universal - hampir mana-mana cecair biologi sesuai untuk analisis: dahak, darah, lavas bronkial.

Sebagai perbandingan: ketepatan mikroskopi pil perut, yang digunakan untuk mengesan tuberkulosis, hanya 40-50%, dan dengan jumlah patogen yang rendah dikurangkan kepada 10% atau kurang. Budaya sputum lebih bermaklumat, tetapi diperlukan 2 hingga 8 minggu untuk mendapatkan hasil.

Anda boleh menggunakan PCR untuk tuberkulosis dan bukannya Mantoux, jika orang itu mempunyai kontraindikasi terhadap sampel.

Kelemahan teknik ini termasuk risiko mendapatkan hasil negatif palsu. Dalam erti kata lain, ketiadaan DNA spesifik dalam dada, darah atau air kencing tidak lagi menunjukkan ketiadaan tuberkulosis dalam pesakit.

Adalah penting. Dalam diagnosis tuberkulosis pada kanak-kanak, sensitiviti analisis PCR adalah lebih rendah daripada orang dewasa, dan kira-kira 25-83%.

Foto 1. Melakukan PCR bukan Mantoux kepada kanak-kanak adalah pilihan yang baik jika dia alergi atau sering sakit.

Prosedur untuk analisis PCR

Prosedur untuk menjalankan analisis PCR dilakukan dengan cara alat khas yang disebut amplificator, dan terdiri dari empat tahap. Kajian ini memerlukan sekumpulan DNA yang memulakan sintesis molekul, nukleotida (pangkalan molekul DNA), serta polimerase, atau enzim yang mempercepatkan prosedur.

1. Pengumpulan bahan biologi (dahak, darah, lavage bronkial).
2. Pemanasan sampel ke suhu kira-kira 98% untuk menghancurkan struktur utama rantaian DNA.
3. Annealing, atau menurunkan suhu beberapa darjah untuk mengikat primer ke helai DNA.
4. Sintesis molekul diperlukan untuk menghasilkan hasil.

Selepas menjalankan 25-30 kitaran sedemikian, sejumlah salinan DNA virus terbentuk, dengan mudahnya menentukan agen penyebab penyakit ini.

Perhatian: Analisis PCR tidak membezakan antara mikroorganisma "mati" dan "hidup", oleh itu hasilnya boleh positif untuk masa tertentu selepas rawatan.

Penyediaan untuk analisis

Sekiranya ujian darah PCR diambil untuk tuberkulosis, maka tidak perlu latihan khas, tetapi pesakit dinasihatkan supaya mengikut peraturan am: mengelakkan diri daripada makan selama sekurang-kurangnya 8 jam, elakkan alkohol dan mengambil ubat, jangan merokok selama sejam sebelum mengambil bahan.

Sputum dikumpulkan pada waktu pagi selepas menyikat dan membilas mulut dengan teliti.

Jika exudate kurang diekskresikan, anda perlu mengambil expectorant malam sebelum atau mengambil penyedutan. Sputum dengan lendir, nanas, tompok putih atau kekuningan mempunyai nilai diagnostik.

Sekiranya tidak mungkin mengambil analisis dahak, bronchio swabs digunakan untuk mengenal pasti patogen. Analisis sedemikian tidak memerlukan penyediaan, dan bahan tersebut diambil seperti berikut. Dengan bantuan picagari laring, pesakit dituangkan ke dalam trakea larutan natrium klorida, yang menyebabkan batuk yang kuat - batuk cair digunakan untuk penyelidikan.

Perhatian. Hasil analisis mengganggu antibiotik, heparin dan ubat lain yang digunakan untuk rawatan setempat, jadi kajian itu disarankan 10-14 hari selepas pentadbiran.

Analisis PCR (diagnosis) tuberkulosis

Tuberkulosis atau penggunaan - salah satu penyakit berjangkit yang paling popular pada abad ke-21. Patogennya adalah mikrobakteria khas - Koch melekat.

Penyakit ini tidak hanya menyebar ke paru-paru, tetapi juga ke otak, pencernaan, sendi atau tulang belakang, sistem kencing, dan kulit.

Menurut WHO, 10 juta orang menderita tuberkulosis setiap tahun, di mana 3 juta maut.

Keadaan ini amat menyedihkan di wilayah negara-negara CIS, di sini epidemik berair berlaku secara berkala. Rusia, Kazakhstan, Ukraine diketuai oleh penarafan sedih mengenai penyebaran jangkitan ini.

Jangkitan ini mudah disebarkan melalui titisan udara atau melalui sistem pencernaan, mempengaruhi organ-organ penting, dan juga dapat dengan cepat menyesuaikan diri dengan ubat-ubatan dan kemoterapi polimer.

Salah satu faktor utama untuk rawatan tuberkulosis yang berjaya ialah pengesanan jangkitan tepat pada masanya.

Kaedah diagnostik

Umat ​​manusia telah mencipta banyak kaedah untuk mengenali penyakit berbahaya. Diagnosis tuberkulosis dibahagikan kepada instrumental dan makmal.

Dalam kes pertama, ujian darah untuk tuberkulosis, serta sputum, air kencing.

Kumpulan kedua adalah kajian menggunakan X-ray dan endoskopi. Kaedah instrumen untuk mendiagnosis tuberkulosis, pada gilirannya, adalah radiasi dan pembedahan.

Jenis kaedah radiasi untuk mencari penyakit

• Fluorografi adalah satu kaedah untuk mendiagnosis penyakit yang biasa kepada setiap penduduk CIS. Menggunakan sinar-x, paru-paru dan nodus limfa hilar diperiksa.
• X-ray dada - serupa dengan fluorografi, tetapi kaedah yang lebih baik untuk mengesan jangkitan. Gambar itu diperoleh dengan lebih terperinci dan dalam dua taksiran, tetapi prosedur ini adalah sekitar enam kali lebih mahal. Biasanya ia digunakan selepas kecurigaan serius penyakit telah timbul.
• Komputasi tomografi dilakukan sebagai diagnosis tambahan, juga digunakan selepas alasan yang baik untuk kehadiran jangkitan.

Kaedah diagnosis pembedahan termasuk endoskopi bronkial, serta mediastinoscopy dan thoracocoscopy.

Kaedah pertama ialah mengkaji pokok bronkus paru-paru dengan bantuan "siasatan" dalam organ ini. Dua cara yang selebihnya memungkinkan untuk mengkaji bahagian pleura dari paru-paru dengan menusuk dada.

Ketiga kaedah ini adalah campur tangan pembedahan yang serius dan paling sering digunakan dalam proses perkembangan penyakit.

Ujian makmal termasuk:

• Analisis sputum untuk bacillus tubercle.
• Pemeriksaan mikroskopik.
• Diagnosis tuberkulosis PCR

Apakah diagnosis PCR?

Salah satu kaedah diagnosis makmal yang paling maju pakar-pakar jangkitan memanggil tindak balas rantai polimerase.

Kaedah ini dibangunkan oleh ahli sains Amerika Syarikat yang terkenal Carrie Mullis pada tahun 1983, di mana beliau memenangi Hadiah Nobel.

Analisis PCR adalah pengasingan zarah DNA dari sputum, darah, cecair serebrospinal, najis, dan sebagainya. untuk biosintesis seterusnya.

Dengan bantuan kajian genetik molekul kompleks, sifat mikrob di dalam tubuh pesakit ditentukan.

Analisis jenis tuberkulosis ini dilakukan dalam beberapa peringkat:

• Pertama, sampel biologi diambil. Bahan diletakkan di dalam bekas khas dan dihantar ke makmal.
• Di pusat penyelidikan, analisis dipanaskan hingga 97 derajat. Ini memungkinkan untuk memusnahkan struktur genom DNA mikroorganisma, yang terdiri daripada beberapa rantai.
• Suhu itu secara khusus diturunkan supaya primer (peserta DNA dari mana proses biosintesis bermula) boleh menyambung kepada mana-mana rantai asid deoksiribonukleik.
• Selepas itu, biosintesis molekul yang diperlukan untuk pengesanan dilakukan.

Selepas 25-30 kitaran berulang dalam proses penyelidikan makmal, doktor mempunyai peluang untuk mengenal pasti sama ada mikroorganisme berjangkit hadir di dalam tubuh pesakit atau tidak.

Kelebihan dan kekurangan

PCR untuk tuberkulosis adalah teknik diagnostik yang paling moden. Kaedah ini memungkinkan untuk mengesan jangkitan di mana-mana peringkat dengan kebolehpercayaan yang tinggi. Faedah:

• Kelajuan - kajian mengambil masa tidak lebih daripada lima jam. Keputusan ujian untuk mikroba tuberkulosis dapat dijumpai dalam 24 jam.
• Keselamatan - Kaedah PCR tidak mempunyai kontraindikasi umur.
• Ketepatan masa - teknik ini membolehkan anda mengesan tuberkulosis pada peringkat tersebut apabila penyakit ini tidak mempunyai gejala.
• Takat ketepatan yang tinggi - jika terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam analisis, ia akan dijumpai menggunakan tindak balas rantai polimerase. Juga, teknik ini memudahkan untuk mengenal pasti agen penyebab tuberkulosis.
• Ketidaksuburan - diagnostik digunakan bukan sahaja untuk pengesanan penggunaan, tetapi juga untuk penyakit lain seperti klamidia, gonorrhea, dll.

Walaupun banyak kelebihan, penggunaan teknik ini dalam amalan perubatan domestik adalah pengecualian dan bukannya peraturan. Terdapat beberapa sebab untuk ini.

Kelemahan kaedah ini ialah:

• Kos kajian yang tinggi.
• Kaedah ini tidak sesuai untuk mereka yang telah menjalani terapi, kerana kehadiran bakteria Koch yang mati boleh membawa kepada hasil positif palsu.
• Dalam kes mutasi mikroorganisma berjangkit, genom mereka tidak boleh diiktiraf dengan membuat kesimpulan palsu.
• Adalah penting untuk memilih persekitaran pengesanan yang tepat. Sebagai contoh, hasil ujian darah untuk PCR untuk tuberkulosis (kemasukan pencairan) akan menjadi negatif sekiranya sistem saraf dijangkiti.
• Ia tidak selalu mungkin untuk menggunakan kaedah ini untuk pesakit yang didiagnosis dengan lesi paru-paru.

Di samping itu, analisis seperti itu untuk batuk kering memerlukan peralatan moden yang 90 peratus tidak mempunyai hospital. Dalam CIS, analisis sedemikian boleh dilakukan oleh rangkaian klinik Invitro.

Syarat analisis

Cadangan untuk pesakit yang menjalani ujian sedemikian untuk batuk kering bergantung kepada jenis analisis yang mereka lalui.

Apabila mengambil darah untuk PCR, adalah perlu untuk menahan diri dari merokok sejam sebelum prosedur, selama dua jam - untuk mengecualikan makanan alkohol dan lemak.

Ia juga disyorkan untuk menahan diri daripada melakukan senaman fizikal, tetapi juga mustahil untuk mengambil darah untuk tuberkulosis pada perut kosong.

Apabila mengambil tamparan dari mulut dan rongga hidung, anda tidak boleh makan 2-4 jam sebelum prosedur, jika tidak, ia tidak akan memberi maklumat. Juga, jangan minum alkohol.

Untuk analisis bacaan yang tepat adalah dilarang untuk merokok lebih awal daripada sejam sebelum prosedur. Pada malam itu, jangan gunakan sikat gigi dan gunakan semburan semburan dan mulut.

Jika anda mengesyaki tuberkulosis sistem urogenital, pesakit selama 2-3 hari sebelum penghantaran harus mengecualikan seks, selama 2-3 jam sebelum prosedur, jangan pergi ke tandas "dengan cara yang kecil". Organ-organ kemaluan perlu dibasuh dengan air kosong tanpa cara khas.

Wanita dinasihatkan untuk tidak menggunakan tablet faraj, lilin, bola, dan juga untuk mengelakkan daripada ujian pada hari kritikal.

5 hari sebelum penghantaran, hasilnya adalah perlu untuk meninggalkan prosedur kolposkopi, serta ultrasound transvaginal,

Kapan diagnostik PCR digunakan?

Tidak semua klinik mempunyai diagnosis yang kompleks, tetapi doktor semakin menggunakan kaedah penyelidikan sedemikian. Biasanya analisis seperti ini dijalankan dalam keadaan khas.

• Sekiranya keputusan ragu manta, ujian darah untuk tuberkulosis boleh digunakan.
• Dalam kes di mana pesakit telah bersentuhan dengan orang yang dijangkiti, tetapi doktor yang hadir tidak boleh menentukan diagnosis secara tepat.
• Sekiranya pembedahan kecemasan, apabila perlu untuk mengetahui dalam masa yang singkat sama ada pesakit mempunyai jangkitan ini.
• Apabila pesakit hamil, apabila kaedah penyelidikan lain tidak cukup selamat untuk bayi yang baru dilahirkan.

Perlu diingat bahawa diagnosis ini disyorkan untuk kanak-kanak kerana keselamatannya.

Sekiranya pelajar mempunyai kontraindikasi terhadap ujian tuberkulin, dia boleh mengambil ujian darah untuk tuberkulosis dan bukannya mantel oleh PCR.

Diagnosis tuberkulosis PCR

Tuberkulosis adalah jangkitan khusus, tumpuannya mungkin dalam tisu manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronik yang rejimen rawatan yang optimum sukar dipilih. Salah satu sebab untuk ini adalah diagnosis lewat, ketika mycobacteria, ketika di dalam tubuh manusia, telah disesuaikan dengan banyak ubat.

Apakah kaedah diagnosis moden yang ada? Diagnostik PCR - apa itu? Bagaimana kajian ini dilakukan? Dalam kes yang mana tuberkulosis didiagnosis dengan kaedah ini dan apakah intipatinya?

Apakah diagnostik PCR?

Ini adalah salah satu kaedah yang paling moden untuk mendiagnosis bukan sahaja penyakit, tetapi juga pengesanan bahan biologi. Diagnostik PCR dicipta baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mencadangkan skim pemulihan kompleks untuk bahan biologi mikroorganisma dalam satu segmen pendek. Terima kasih kepada penemuannya, saintis itu dianugerahkan anugerah tertinggi - Hadiah Nobel.

Apakah itu - diagnosis PCR jangkitan? Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah diagnosis pengesanan penyakit virus, berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Ia digunakan secara meluas dalam mikrobiologi perubatan, imunologi dan virologi. Kaedah ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sedikit bahan. Jangkitan dapat dikesan secara literal pada jam pertama jangkitan dengannya, jauh sebelum gejala penyakit pertama muncul.

Kaedah ini terdiri daripada mendapatkan dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi serpihan genom (zarah DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya untuk kelas mikroorganisma yang diperolehi daripada bahan genetik yang dimiliki melalui kaedah genetik molekul.

Walaupun ia adalah proses yang kompleks, ia mengambil masa yang lebih sedikit daripada banyak kaedah biologi mengesan agen berjangkit. Dalam masa beberapa jam, mikroorganisma boleh dikesan oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengasingkannya dari persekitaran (darah, cecair cerebrospinal, dahak) dan membesar untuk masa yang lama pada media nutrien tiruan. Adalah cukup bahawa serpihan kecil benang DNA agen berjangkit hadir dalam bahan yang sedang dipelajari.

Asas tindak balas adalah kemungkinan di bawah keadaan buatan (in vitro) untuk menghasilkan sintesis molekul asid nukleus agen berjangkit.

Apa yang diperlukan untuk PCR?

1. Primer adalah segmen DNA yang mana biosintesis atau penciptaan bermula.
2. Nukleotida atau sebatian kompleks yang merupakan asas molekul DNA atau RNA.
3. Tindak balas rantai polimerase tidak mungkin tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

Tahap diagnostik PCR

Bagaimanakah diagnosis molekul dilakukan oleh PCR? Prosedur ini mudah dan mengambil masa yang singkat, dengan mengambil kira pengumpulan bahan.

1. Sebelum memulakan kajian, mereka mengambil bahan biologi yang diperlukan - ini adalah air basuh bronkial, darah, kandungan lambung, dahak. Jenis bahan biologi bergantung kepada patogen yang disyaki.
2. Denaturasi atau pemusnahan struktur utama DNA, yang terdiri daripada dua rantai. Intipati tahap ini adalah untuk memisahkan dua rantai di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang tidak berlangsung lebih dari dua minit).
3. Pada tahap berikutnya PCR, dipanggil penyepuhlindapan, suhu dikurangkan dengan beberapa darjah supaya primer akan terikat pada helai DNA.
4. Pemanjangan, di mana sintesis molekul yang dikehendaki berlaku secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 kitaran sedemikian menerima bilangan salinan DNA mikroorganisma yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Adakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

Tidak mungkin benar-benar semua orang yang disyaki menggunakan tuberkulosis untuk melakukan PCR, kerana kaedah ini memerlukan peralatan mahal. Tidak semua klinik awam mampu membelinya. Di samping itu, ia berlaku bahawa kaedah biasa mendiagnosis jangkitan dalam kebanyakan kes juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

• tinjauan pesakit, pengambilan sejarah;
• pemeriksaan penuh orang itu;
• satu kajian menggunakan ujian tuberkulin Mantoux;
• radiografi atau fluorografi;
• diagnostik komputer jika perlu;
• Kaedah penyelidikan mikrobiologi: mikroskopi smear dan pemeriksaan bacteriological sputum.

PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kes-kes khas apabila sukar untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk menjalankan kaedah instrumental lain.

Walaupun terdapat banyak kaedah diagnostik, kejadian tuberkulosis terus berkembang. Pada masa ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga ciri-ciri lain:

• penyakit ini sering berlaku dalam bentuk yang teruk;
• bilangan kes maut meningkat;
• semakin tahan terhadap kemoterapi moden didiagnosis bentuk penyakit.

Kehadiran rakyat sendiri menjalani pemeriksaan kesihatan rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi menyebabkan penyebaran tuberkulosis. Dalam keadaan sedemikian, kita memerlukan kaedah penyelidikan yang cepat, bermaklumat dan berkesan yang boleh diakses oleh kanak-kanak dan orang dewasa. Semua kaedah diagnostik di atas adalah lebih rendah daripada PCR.

Faedah mendiagnosis batuk kering dengan PCR

Penyelidikan ini, walaupun baru, telah terbukti dengan baik, terutamanya dalam kes-kes kontroversi di mana mustahil untuk membuat diagnosis untuk beberapa sebab.

Terima kasih kepada PCR, lebih mudah untuk mengesan agen penyebab tuberkulosis dalam bahan ujian.

Kelebihan diagnostik PCR adalah seperti berikut.

1. Ini adalah analisis cepat. Serpihan kecil molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi kecemasan ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit tuberkulosis.
2. Analisis PCR dibenarkan dalam kes apabila kaedah lain tidak tersedia atau dilarang (untuk pengesanan tuberkulosis pulmonari, kadang-kadang anda perlu mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi dos radiasi yang besar).
3. Dengan bantuan PCR, sebarang persekitaran biologi diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair serebrospinal, jika terdapat kecurigaan terhadap meningitis tuberkulosis.
4. Mengizinkan diagnosis PCR penyakit berjangkit pada kanak-kanak, kerana kaedahnya selamat.
5. Membolehkan anda mengenal pasti patogen di mana-mana peringkat penyakit ini.
6. Kepekaan tinggi PCR memungkinkan untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis, walaupun terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam bahan biologi.
7. Adalah baik untuk menjalankan diagnosis penyakit berulang.

Selepas semua PCR yang dibaca seolah-olah menjadi kaedah diagnostik yang hampir sempurna, yang sepatutnya membuat setiap orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka mesti diambil kira.

Kelemahan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Di zaman kita, diagnostik sedemikian lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini terdapat sebab.

1. Ini adalah kaedah penyelidikan yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak hadir kerana kos yang tinggi, tetapi analisis masih boleh dilakukan di makmal berbayar.
2. Sejurus selepas rawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam kuantiti yang kecil mungkin masih terdapat di dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif semasa diagnosis PCR), jadi kaedah ini tidak boleh dipercayai pada masa ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
3. Mutasi mycobacteria mengakibatkan PCR tidak berkesan - urutan serai DNA biasa tidak dapat disintesis.
4. Ia adalah perlu untuk memilih persekitaran yang sesuai untuk kajian ini, darah diambil hanya jika ia disyaki dijangkiti (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada persoalan tuberkulosis organ-organ sistem saraf. Dalam kes ini, PCR tidak dapat mengesan patogen dan diagnosis akan menjadi tidak diketahui.

Petunjuk untuk mengesan batuk kering menggunakan analisis PCR

Diagnosis tuberkulosis PCR paling kerap dilakukan dalam kes kontroversi. Bilakah doktor merujuk kajian ini?

1. Sekiranya sukar untuk membuat diagnosis menggunakan kaedah yang sedia ada, tetapi ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
2. Dalam kes apabila seseorang tidak dapat dihantar ke klinik untuk menjalani ujian rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksa dia menggunakan PCR, memandangkan sputum untuk ujian boleh dihantar ke dalam balang dan diagnosis disahkan dalam masa beberapa jam.
3. Sekiranya seseorang akan menjalani operasi kecemasan dan ia perlu mengetahui sama ada dia sakit dengan tuberkulosis.
4. Sekiranya perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa tuberkulosis menggunakan PCR, kerana kaedahnya adalah selamat.
5. Secara berbayar, sesiapa yang belum didiagnosis dengan tuberkulosis telah disahkan menggunakan kaedah bacteriological dan fluoroscopy. Ini berlaku apabila luka di paru-paru tidak dapat dilihat dalam imej langsung, dan orang semasa penghantaran sputum untuk kajian itu tidak dapat mengikuti cadangan untuk pengumpulan bahan yang betul. Dalam kes ini, orang itu bimbang dengan semua ciri-ciri gejala batuk kering pulmonari.
6. Apabila terdapat keraguan tentang hasil ujian Mantoux.
7. Adalah lebih baik untuk melakukan diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak. Prosedur ini selamat, tidak membuat pendedahan radiasi tambahan, dan berkesan dalam mengesan sukar untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

Diagnosis tuberkulosis tepat pada masanya adalah kunci kepada rawatan yang ditetapkan dengan betul dan mengurangkan penyebaran penyakit. Selalunya, kaedah pengesanan penyakit biasa tidak selalu berkesan. Oleh itu, PCR hari ini adalah salah satu cara yang paling boleh dipercayai dan selamat untuk mengesan jangkitan pada peringkat awal perkembangannya.

Apakah analisis PCR untuk tuberkulosis

Kaedah inovatif untuk mengesan mikroorganisma, yang dicipta oleh saintis Cary Mullis pada akhir abad lalu - analisis PCR. Dia menerima untuk tulisannya Hadiah Nobel. Sepenuhnya proses ini dipanggil reaksi rantai polimerase. Ia terdiri daripada pemulihan jenis mikroorganisma dalam biomaterial yang disediakan menggunakan serpihan DNA pendek. Ini membolehkan anda mengesan jangkitan pada peringkat awal dan memulakan rawatan serta-merta, tanpa membawa kepada gejala dan komplikasi yang serius.

Apakah analisisnya

Diagnosa oleh PCR adalah untuk mendapatkan segmen DNA patogen dari bahan biologi dan menyelaraskannya dalam rantai yang betul. Ini membolehkan pengenalpastian mikroorganisma yang dimiliki oleh sel-sel.

Prosedur ini dijalankan dalam tiga peringkat:

1. Pengumpulan bahan biologi.
2. Pengenalpastian dan penyelarasan DNA.
3. Pengiktirafan jangkitan.

Kajian ini memerlukan peralatan perubatan khas - amplificatory. Ia dilengkapi dengan kamera, di mana bahan yang dikaji berinteraksi dengan suhu tinggi dan enzim kimia. Di pintu keluar, juruteknik makmal mempunyai rantai DNA panjang agen penyebabnya, jika ada satu di dalam tubuh manusia.

Bagaimana untuk mempersiapkan diagnosis

Analisis PCR adalah proses kejuruteraan genetik kompleks yang memerlukan ketepatan dan kesungguhan dari kedua-dua juruteknik dan pesakit makmal. Peranan yang besar dalam ketepatan keputusan analisis dimainkan oleh penyediaan prosedur, iaitu pengumpulan bahan yang benar.

Sumber utama maklumat tentang penyakit adalah:

Pilihan lain boleh digunakan, cecair, jika perlu, diambil untuk analisis dari organ yang berlainan.

Bagi pesakit, ada peraturan tertentu yang mesti diikuti sebelum prosedur. Jika terdapat ujian darah, dilarang selama 8 jam sebelum koleksi:

• makan makanan;
• untuk merokok;
• minum minuman beralkohol;
• mengambil ubat di dalamnya.

Pada waktu petang, sebelum mengumpul dahak, dadah mabuk untuk mengecilkannya dan memudahkan eksploitasi. Pada waktu pagi, kumpulkan bahan selepas kebersihan menyeluruh rongga mulut.

Urin dikumpulkan dalam balang steril pagi pada perut kosong, selepas mencuci, sebelum mengambil sebarang ubat.

Sekiranya seseorang mengambil antibiotik, maka analisis tindak balas rantai polimer perlu ditangguhkan, jika tidak, hasil PCR tidak boleh dipercayai. Sputum atau darah perlu disumbangkan dua minggu selepas berakhirnya rawatan.

Bagaimana proses mengenal pasti bakteria

Secara ringkasnya, proses itu adalah untuk mengasingkan sebahagian daripada DNA. Penggunaan kaedah moden kejuruteraan genetik membolehkan kita menentukan jenis mikroorganisma. Selain itu, bahan untuk analisis memerlukan sejumlah kecil.

Secara teknikal, ini adalah prosedur yang sangat rumit, tetapi ia memerlukan sedikit masa daripada kajian bakteriologi klasik. Patogen tidak perlu diasingkan dari biomaterial, tidak ada keperluan untuk membesar selama beberapa minggu. Pada hari penghantaran, pesakit sudah dapat mengetahui hasil analisisnya.

Seluruh proses PCR berjalan secara berperingkat:

1. Kerja sedang dijalankan dengan bentuk utama DNA, yang pada suhu tinggi, hampir 100 darjah, dibahagikan kepada dua rantai.
2. Suhu berkurangan, benang disambungkan kepada serpihan asid nukleik - primer.
3. Elongation terjadi - sintesis struktur molekul.

Seluruh sesi terdiri daripada kira-kira tiga puluh prosedur sedemikian, mengulangi kitaran sebagai reaksi berantai. Ini adalah perlu untuk mewujudkan bilangan sel di mana bakteria yang dihasilkan menjadi dikenali.

Kesimpulan kajian ini

Deskripsi hasil PCR (tindak balas rantai polimer) memberikan doktor TB, ia mudah atau digunakan. Dalam kes pertama, perihalan hanya akan mengandungi maklumat mengenai kehadiran atau ketiadaan tongkat Koch. Sekiranya penyahkodan terperinci, daripadanya anda dapat mengetahui tahap penyakit, fokusnya. Mengikut kriteria ini, adalah mungkin untuk menentukan rawatan yang paling sesuai untuk batuk kering dalam setiap kes.

Analisis polimerase tindak balas rantai tidak membezakan antara patogen hidup dan mati, dan hanya bercakap tentang kehadiran mereka. Oleh itu, masuk akal untuk lulus ujian kedua untuk tuberkulosis hanya 3-4 minggu selepas terapi terapi yang ditetapkan oleh doktor.

Jika hasilnya positif, tulisan "Mycobacterium tuberculosis" diletakkan pada kesimpulan. Sekiranya terdapat keputusan negatif, bersebelahan dengan nama baku bakteria terdapat tanda "tidak dikesan." Analisis mungkin positif palsu. Ini jarang berlaku - sekiranya berlaku pelanggaran teknik melakukan kajian PCR atau kehadiran mikroorganisma yang tidak berdaya maju. Kesimpulan terakhir mengenai penyakit ini hanya boleh dibuat oleh doktor TB.

Kelebihan kaedah

Diagnosis PCR tuberkulosis telah mendapat populariti kerana banyak sebab. Ia mempunyai banyak kelebihan, termasuk:

1. Ketepatan penyelidikan. Apabila menganalisis teknologi, adalah mungkin untuk mengenal pasti bakteria, walaupun terdapat dalam jumlah kecil.
2. Hasil Pantas. Seluruh proses dari mengumpul bahan ke kesimpulan selesai mengambil masa kira-kira 5 jam. Apabila dibandingkan dengan penaburan, ia perlu menunggu sehingga beberapa minggu.
3. Keselamatan penuh untuk orang itu, tidak seperti fluorografi dengan sinarannya.
4. Sebarang biomaterial cair digunakan. Untuk pelaksanaan PCR dalam tuberkulosis pulmonari, sputum memberikan maklumat yang paling tepat, dalam meningitis yang berbahaya, sampel diambil dari kord rahim. Ujian darah membantu mengenal pasti penyakit jangkitan tempatan.
5. Kepekaan bakteria terhadap antibiotik diuji. Ini membolehkan anda menetapkan rawatan yang betul.
6. Diagnosis awal. Anda boleh mengetahui tentang kehadiran penyakit sebelum permulaan simptomnya.

Di samping aspek positif, terdapat juga kekurangan. Yang utama adalah harga. Analisis PCR tidak murah, yang dikaitkan dengan penggunaan peralatan mahal. Satu lagi kelemahan adalah keperluan untuk menunggu masa untuk ujian semula selepas rawatan untuk tuberkulosis. Kadang-kadang hasil ujian adalah positif palsu. Ini berlaku kerana mutasi bakteria.

Apabila PCR diperlukan

PCR untuk batuk kering paru tidak mempunyai kontraindikasi dan sememangnya selamat. Oleh itu, terdapat situasi dan penyakit tertentu apabila ini adalah satu-satunya kemungkinan penyelidikan.

Ini termasuk:

• kehamilan;
• bersentuhan dengan pesakit tabung;
• kesukaran dalam menentukan diagnosis penyakit paru-paru;
• pemeriksaan sebelum pembedahan;
• reaksi alahan;
• Jangkitan HIV;
• umur muda.

Anda boleh menggunakan kaedah PCR ke arah yang dikeluarkan dalam phthisiology, serta pakar pediatrik, doktor atau ahli pulmonologi.

Apa yang boleh menggantikan diagnosis PCR tuberkulosis

Jenis tinjauan lain tidak menjadi usang tetapi terus digunakan. Ia digunakan dalam kes di mana ia tidak mungkin untuk melakukan PCR untuk tuberkulosis. Di samping itu, kaedah moden tidak ideal, kadang kala penunjuknya dipersoalkan dan memerlukan pemeriksaan semula.

Kaedah berikut membantu menentukan kehadiran tuberkulosis dalam seseorang:

• diagnosis tuberculin (Mantoux);
• fluorografi;
• pengujian bahan biologi untuk flora;
• x-ray paru-paru.

Kajian ini adalah percuma dan tersedia untuk semua orang. Tetapi mereka mempunyai kelemahan mereka:

• Ujian tuberkulosis menyebabkan alahan. Kontraindikasi dalam penyakit kulit.
• Kajian sinar-X diiringi oleh radiasi, yang tidak berkenaan dengan kanak-kanak, orang yang mengalami kekurangan dan wanita hamil.
• Analisis bakteriologi mengambil lebih banyak masa, hasilnya boleh menunggu sehingga sebulan.

Alternatif bukan jaminan seratus peratus kesimpulan yang betul. Mereka sering digunakan untuk tujuan pencegahan. Diagnosis tuberkulosis oleh PCR memberikan maklumat yang paling boleh dipercayai. Jika boleh, lebih baik menggunakannya.

Kepastian tuberkulosis pada kanak-kanak dan keperluan untuk PCR

Kanak-kanak perlu dilindungi terutamanya dari penyakit ini - jangkitan tuberkulosis boleh menyebabkan kemudaratan serius kepada badan dengan imuniti belum terbentuk sepenuhnya.

Selepas memasukkan tongkat Koch ke dalam organisma kanak-kanak, perkembangan penyakit itu akan melalui peringkat berikut:

• Laten. Ia berlangsung sehingga setahun, tanpa memberikan apa-apa gejala.
• Ketoksikan. Mempengaruhi kesihatan keseluruhan. Kelihatan lemah, tidak peduli, kurang selera makan, mengantuk dan menurun prestasi. Selalunya suhu yang agak tinggi.
• Bentuk utama penyakit ini. Tuberkulosis adalah setempat, membentuk tumpuan penyakit. Kanak-kanak mempunyai batuk, sesak nafas, sakit kepala, nodus limfa yang bengkak.
• Bronchoadenitis Tubercular. Gejala adalah kesakitan pada bilah bahu, batuk dengan pelbagai bunyi, mengi.

Biasanya, tuberkulin disuntik untuk mengenal pasti jangkitan di bawah kulit kanak-kanak. Sekiranya pemeriksaan jenis ini dikontraindikasikan, maka PCR untuk tuberkulosis adalah pilihan yang tidak diperlukan untuk diagnosis. Kanak-kanak biasanya mengambil ujian darah, tetapi jika ia diperlukan, sputum dikumpulkan. Sekiranya terdapat kecurigaan kehadiran tuberkulosis, kajian tambahan dijalankan untuk memastikan keputusan positif dan segera memulakan rawatan pada peringkat awal, mencegah perkembangan penyakit ini.

Kaedah penyelidikan moden sentiasa lebih cepat dan lebih dipercayai. Sayang sekali kerana alatan mahal untuk membuat ujian sedemikian ada kemungkinan tidak di semua institusi perubatan dan tempatan. Bagaimana cara untuk menjalankan peperiksaan biasanya dipilih oleh doktor, tetapi pesakit mempunyai hak untuk memilih. Jika anda perlu mengambil ujian PCR, beritahu kami tentangnya dalam ulasan. Jika artikel itu berguna untuk anda, kongsi di rangkaian sosial - mungkin ia akan membantu rakan anda.