Reaksi rantai polimerase (PCR) untuk tuberkulosis

Tuberkulosis adalah salah satu penyakit yang paling berbahaya yang mana manusia telah menderita selama beratus-ratus tahun. Walaupun para saintis dapat mengenal pasti agen penyebab dan mencipta antibiotik untuk menghapuskannya, rawatan itu tidak selalu berjaya. Alasan utama ialah tempoh laten atau laten penyakit yang panjang, yang boleh bertahan beberapa tahun. Diagnosis lewat jauh mengurangkan peluang pesakit untuk pemulihan dan kehidupan yang penuh.

Apakah PCR?

Untuk mengesan mycobacterium tuberculosis dalam badan selama lebih dari seratus tahun, ujian Mantoux telah berjaya digunakan. Kaedah lain telah membuktikan diri mereka dengan baik: budaya bacteriological dalam medium tiruan, mikroskopi smear, ELISA. Walau bagaimanapun, sejumlah besar komplikasi dan hasil positif palsu, serta tempoh beberapa kaedah, memerlukan pengenalan teknologi baru ke dalam metodologi diagnostik. Penemuan besar dalam bidang mikrobiologi ialah kemunculan analisis PCR untuk tuberkulosis. Selama beberapa dekad, ia telah menunjukkan keberkesanannya dan digunakan secara meluas untuk diagnosis pembezaan pelbagai bentuk tuberkulosis.

Analisis PCR untuk tindak balas rantai tuberkulosis atau polimerase adalah satu kaedah untuk mengesan DNA bakteria atau serpihan mereka, yang berdasarkan peningkatan molekul asid nukleik di bawah tindakan polimerase DNA enzim. Untuk keputusan yang positif, hanya satu molekul DNA patogen yang mencukupi, jadi kaedah ini dianggap sangat sensitif. Diagnosis OCP dalam tuberkulosis adalah lebih berkesan daripada pembiakan mycobacteria dalam persekitaran buatan, kerana, tidak seperti kaedah budaya, ia memungkinkan untuk membezakan antara strain liar dan vaksin yang divaksinasi dengan BCG. Ini mengelakkan positif palsu dan membuat diagnosis lebih tepat.

Faedah PCR

Diagnosis PCR untuk tuberkulosis memungkinkan untuk mengesan bakteria Koch dalam persekitaran biologi organisma dengan penentuan komposisi kuantitatif mereka walaupun pada peringkat awal penyakit, apabila mikobakteria tidak aktif. Diagnosis penyakit dalam fasa laten memungkinkan untuk memulakan rawatan prophylactic dalam masa, untuk mencegah perkembangan keradangan dalam paru-paru dan kemunculan komplikasi dalam organ dan sistem lain. Di samping itu, ujian PCR untuk tuberkulosis mempunyai beberapa kelebihan:

• kekhususan tinggi - 90-100%;
• kelajuan tinggi - dari 4 jam hingga 2 hari;
• sensitiviti yang tinggi, terutamanya dalam kekurangan immunodeficiency;
• diagnosis pembezaan.

Kelebihan utama kaedah ini ialah diagnosis CRC tuberculosis pada kanak-kanak memungkinkan untuk membezakan bentuk penyakit tersebar dari fokus terhad, walaupun dengan hasil negatif daripada ujian lain. Ujian Berbeza membolehkan anda memilih rejimen rawatan yang tepat dan meningkatkan keberkesanan terapi.

Khas ketekalan analisis dicapai dengan menghapuskan reaksi silang dengan molekul asid nukleus lain, dan kepekaan tinggi memungkinkan untuk mengesan mikobakteria walaupun dalam jumlah kecil bahan yang dikumpulkan. Kaedah pneumonia untuk tuberkulosis mempunyai kebolehpercayaan yang paling besar, spesifikasinya mencapai 100% berbanding dengan kajian bahan biologi lain.

Mekanisme khas PCR menyediakan peluang yang mencukupi untuk mengesan tongkat Koch dalam pesakit imunocompromi. Mengikut kaedah analisis, reaksi mengesan antigen, jadi tidak mengapa jika badan menghasilkan antibodi kepada patogen, atau tidak. Oleh itu, adalah mungkin untuk mendiagnosis bentuk ekstrapulmonary penyakit dan kes-kes lanjutan dalam pesakit yang mengalami kesilapan dalam sistem imun, yang tidak mungkin menggunakan kaedah lain.

Kelemahan kaedah ini

Walaupun banyak kelebihan dan sensitiviti tinggi ujian, PCR untuk tuberkulosis boleh memberikan hasil negatif palsu. Oleh kerana jumlah biomaterial yang sangat kecil diambil untuk diagnosis, hakikat bahawa patogen "menyembunyikan" dalam sel atau tumpahan keradangan tidak dikecualikan dan tidak dilepaskan di luar.

Kepekaan kaedah ini pada kanak-kanak adalah 25-80%. Sebagai contoh, dalam kajian rawak dalam sekumpulan pesakit dengan diagnosis klinikal yang terbukti, ujian darah PCR untuk tuberkulosis memberi hasil positif hanya pada 50% pesakit. Dalam hal ini, apabila menguji kanak-kanak untuk mikobakteria patogen, tidak mungkin menggantikan satu kaedah diagnostik dengan yang lain. Untuk memastikan sepenuhnya ketiadaan jangkitan, perlu melakukan kajian komprehensif dalam beberapa cara sekaligus.

Proses pengumpulan

Keadaan utama untuk kebolehpercayaan diagnostik PCR adalah mematuhi peraturan untuk mengumpul cecair biologi untuk analisis. Bahan yang terkumpul atau tidak betul boleh menyebabkan keputusan tidak betul. Yang paling biasa adalah analisis sputum, darah dan air kencing, tetapi untuk diagnosis pembezaan yang lebih mendalam, anda boleh mengambil sampel dari kandungan perut, cecair sinovial, cecair cerebrospinal, cecair bronchi flushing, sperma, rembesan prostat.

Urin PCR untuk tuberkulosis diambil pada waktu pagi selepas kebersihan kelamin luar oleh kencing ke dalam bekas steril. Semasa prosedur, adalah penting untuk tidak menyentuh dinding dalaman bekas untuk mengelakkan masuknya mikroorganisma pihak ketiga. Wanita yang menjalani kehidupan seks biasa pastinya akan meletakkan tampon di dalam vagina untuk mengelakkan pelepasan pihak ketiga.

Ujian darah diambil pada waktu pagi pada perut kosong, dan PCR dari dahak untuk tuberkulosis boleh dilakukan pada bila-bila masa hari dengan kebersihan mulut sebelum mandarin. Ini adalah perlu untuk mengeluarkan residu makanan yang boleh memasuki bekas. Apabila dahagakan expectorating, adalah penting untuk mengelakkan air liur dan lendir dari nasopharynx ke dalam bekas, ini boleh memesongkan data analisis.

Kajian kandungan perut itu dilakukan di hospital pada waktu pagi, sementara selesema yang ditelan semalaman berada di dalam perut. Untuk mengesan mycobacterium tuberculosis, kaedah ini menghasilkan tiga kali ganda pembenihan, yang kemungkinan besar dapat mengasingkan tongkat Koch.

Keputusan penyahkodan

Analisis kualitatif PCR memberikan 2 jenis hasil "dikesan" atau "tidak dikesan." Mereka menandakan satu keputusan positif dan negatif. Jawapannya "dikesan" bermakna DNA agen berjangkit ada dalam sampel ujian, dan dengan kebarangkalian 97% tubuh dijangkiti tuberkulosis. Hasil negatif menunjukkan ketiadaan Koch melekat DNA dalam sampel bahan biologi, dan memberikan peluang 97% bahawa tubuh tidak mempunyai sejumlah besar mikobakteria, dan 60% bahawa orang itu tidak dijangkiti.

Kekhususan terbesar untuk diagnosis tuberkulosis mempunyai ujian darah dan sputum. Dengan hasil yang positif, mereka menunjukkan jangkitan pada tubuh, yang memerlukan langkah-langkah terapi yang mendesak. Kajian biomaterial lain mungkin tidak menunjukkan perjalanan penyakit, tetapi hanya kehadiran bakteria asing. Ini berlaku apabila seseorang adalah pembawa penyakit ini, tetapi tidak menyebarkan jangkitan ke alam sekitar dan tidak menjangkiti orang yang sihat.

Analisis PCR kuantitatif dilakukan kurang kerap, dan doktor yang berurusan dengan penyahkodan keputusannya. Petunjuk penyelidikan digunakan untuk menentukan aktiviti penyakit dan tahap kerosakan kepada badan. Berdasarkan data yang diperoleh, pakar dapat menentukan keberkesanan rawatan, dan jika perlu, menyesuaikan skema terapeutik.

Tuberkulosis sentiasa dan kekal sebagai salah satu masalah yang paling serius untuk kesihatan semua manusia. Kaedah diagnostik moden boleh mengesan penyakit pada peringkat awal untuk memulakan rawatan mengikut masa. Ujian Tuberculin, mikroskopi smear, budaya bakteria pada media nutrien buatan telah membuktikan diri mereka dalam bidang diagnosis makmal tuberkulosis. Walau bagaimanapun, menunggu lama hasil dan peningkatan frekuensi pembacaan positif palsu membuat mereka usang dan dibawa ke hadapan lebih maju teknologi. Analisis PCR adalah kaedah yang sangat khusus dan sangat berkesan untuk mendiagnosis tuberkulosis. Hasilnya adalah yang paling boleh dipercayai di antara semua kaedah makmal yang dicadangkan untuk mengesan tongkat Koch. Ia bukan sahaja membolehkan membuat keputusan akhir, tetapi juga untuk menjalankan diagnosis pembezaan yang diperlukan.

Diagnosis PCR tuberkulosis pada kanak-kanak dan orang dewasa: tanda-tanda untuk

Pertubuhan Kesihatan Sedunia diiktiraf 20 tahun yang lalu bahawa kadar penyebaran tuberkulosis tidak terkawal dan mencapai skala wabak. Sejak itu, keadaan tidak bertambah baik. Lebih daripada satu juta kes penyakit itu didiagnosis setiap tahun, di mana hampir satu perempat adalah maut. Dalam dekad yang lalu, kadar kejadian di kalangan kanak-kanak telah meningkat, kebanyakan bentuk penyakit tidak meminjamkan diri kepada terapi antibiotik yang standard.

Hari ini, salah satu tugas global untuk ubat adalah pembangunan kaedah diagnostik sedemikian yang akan membolehkan untuk mengenal pasti patologi sebelum permulaan gejala klinikal yang dinyatakan. Salah satunya adalah tindak balas rantai polimerase (PCR) untuk tuberkulosis, yang membantu mengesan penyakit Koch yang menyebabkan darah, dentuman dan cecair biologi yang lain.

Diagnosis tuberkulosis

Ujian pemeriksaan bertujuan untuk mengesan pesakit, pembawa tuberkulosis dan mencegah penyebaran jangkitan dalam masyarakat. Bagi kanak-kanak di bawah umur 14 tahun, ujian Mantoux digunakan secara besar-besaran. Ini adalah ujian imunologi di mana dos tuberculin disuntik subcutaneously - gabungan kompleks bahan genetik beberapa jenis mycobacteria. Penampilan reaksi yang jelas menunjukkan proses menular yang aktif.

Untuk pemeriksaan pencegahan pada orang dewasa menggunakan fluorografi atau x-ray. Kaedah ini membantu menggambarkan lesi patologi dalam tisu paru-paru. Walau bagaimanapun, ia menyebabkan kesukaran untuk membezakan tuberkulosis daripada patologi organik lain (neoplasma malignan dan jinak, proses keradangan, pencerobohan parasit, kerosakan paru-paru profesional).

Untuk menjelaskan struktur dan saiz fokus patologi, kajian instrumental tambahan mungkin diperlukan:

• radiografi yang disasarkan;
• pengiraan tomografi;
• pengimejan resonans magnetik.

Kaedah untuk diagnosis batuk kering

Dalam kes keputusan yang diragukan dan untuk pelantikan terapi yang mencukupi, terdapat keperluan untuk kaedah diagnostik yang lebih tepat yang membolehkan anda mengasingkan patogen. Pemeriksaan Mikroskopik dan bakteriologi bagi sputum digunakan untuk mengesahkan bentuk tuberkulosis paru-paru untuk masa yang lama.

Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, kejadian mycobacterium dari pelbagai organ dan sistem - buah pinggang, tulang, usus, kulit - telah menjadi lebih kerap. Untuk mengenal pasti bentuk tuberkulosis, pemeriksaan ultrasound, kencing dan feses, pemeriksaan endoskopik boleh digunakan.

Diagnosis PCR untuk tuberkulosis akan membantu mengesahkan kehadiran koch sticks dalam darah, serta kepekaannya terhadap ubat-ubatan tertentu. Ini adalah kaedah yang sangat berkesan berdasarkan pengesanan bahan genetik bakteria dalam pelbagai cecair biologi.

Spesifikasi dan petunjuk

Tindak balas rantai polimerase adalah kaedah diagnostik mikrobiologi yang sangat sensitif, yang berdasarkan prinsip-prinsip kejuruteraan genetik. Untuk mengesahkan kehadiran patogen dalam bahan biologi, cukup untuk mengesan serpihan asid nukleik yang unik untuknya. PCR untuk tuberkulosis dapat mengesan bakteria dalam darah, sputum, air kencing.

Pada masa ini, dibangunkan beberapa kaedah analisis. Yang paling popular di antara mereka adalah yang berikut:

• PCR masa nyata;
• teknologi mikrofluid;
• penjujukan dan pyrosequencing.

PCR masa nyata

Makmal paling kerap menggunakan tindak balas rantai polimer masa nyata, kerana ia mengurangkan bilangan hasil positif palsu, dan proses analisis itu sendiri mengambil masa yang singkat.

Memandangkan sebilangan besar bentuk tersembunyi penyakit dan ketidakcekapan kaedah diagnostik standard, PCR semakin digunakan. Tujuan analisis ini ditunjukkan di:

• mengenal pasti kawasan mencurigakan pada sinar-X;
• keputusan ujian uberculin yang ragu;
• kemustahilan melakukan analisis mikroskopik dan bakteriologi dari dahak pada orang dalam keadaan yang serius;
• melakukan campur tangan pembedahan apabila perlu memastikan dengan cepat bahawa tidak ada jangkitan;
• tidak dapat diterima penggunaan fluorografi, x-ray atau tomografi yang dikira (contohnya, dalam wanita mengandung dan menyusu, dalam kes pendedahan radiasi yang berlebihan);
• disyaki batuk kering ekstrapulmonary (disyorkan bukan sahaja darah tetapi juga dahak digunakan).

Diagnosis PCR tuberkulosis telah membuktikan dirinya dalam pemeriksaan kanak-kanak, kerana kurangnya pendedahan tambahan dan keputusan pesat.

Prosedur persediaan dan analisis

Persediaan khusus untuk darah PCR tidak diperlukan. Walau bagaimanapun, untuk mengelakkan komplikasi pensampelan darah dan untuk mendapatkan bahan yang berkualiti tinggi, peraturan am berikut harus diikuti:

• analisis perlu diambil pada waktu pagi tidak lebih awal daripada 2 jam selepas bangun;
• Ia harus menghadkan pengambilan makanan berlemak dan goreng sehari sebelum sampel darah;
• menahan diri dari makan, teh dan kopi selama 8-9 jam, dibenarkan minum air bersih;
• Jangan merokok selama sekurang-kurangnya 3-4 jam.

Dalam kes ubat kekal (hormon, antikoagulan, ubat anti-radang, antibiotik, penipisan darah), anda perlu memaklumkan pembantu makmal mengenai perkara ini.

Sekiranya penghantaran sputum, anda perlu berus gigi dengan baik dan bilas mulut anda beberapa kali. Kumpulkan bahan dalam bekas steril. Untuk keputusan yang lebih baik, agen expectorant atau mucolytic boleh diambil pada waktu petang.

Diagnosis itu sendiri terdiri daripada beberapa peringkat.

Bahan pagar. Ia boleh dilakukan di makmal dan dari jauh. Sesetengah jenis bahan yang dikumpul pesakit secara berasingan (air kencing, kahak).

Pemusnahan struktur asid nukleik (denaturasi molekul DNA dan RNA). Untuk melakukan ini, bahan ujian dipanaskan pada suhu 98 darjah dan dipegang selama beberapa minit. Akibatnya, heliks berganda melepaskan, molekul terkandas tunggal terbentuk.

Annealing Selepas menambah primer (seksyen pendek asid nukleik), suhu berkurangan dengan beberapa darjah, polimerase diaktifkan.

Elognation. Suhu dibawa ke tahap yang optimum, aktiviti enzim mencapai maksimum dan rantai kedua diselesaikan selaras dengan peraturan Chargaff yang saling melengkapi.

Untuk menyelesaikan kajian, diperlukan untuk mensintesis bilangan molekul DNA yang diperlukan - kira-kira 50 kitaran reaksi di atas. Ia mengambil masa kira-kira 2-3 jam. Hasil positif tindak balas tidak selalu menunjukkan tahap aktif penyakit, tetapi merupakan penunjuk kehadiran mikroorganisma dalam tubuh.

Kelebihan dan keburukan kaedah ini

Sebagai perbandingan dengan kaedah mikrobiologi lain, PCR tidak mengambil masa yang lama untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis menggunakan PCR, hasilnya dapat diperoleh pada hari ujian.

Satu lagi kelebihan adalah kekhususan tinggi analisis, yang memungkinkan untuk mengesan kehadiran patogen dengan ketepatan 90-95% dalam hampir mana-mana biomaterial (darah, air kencing, najis, cecair serebrospinal, sputum, bronchus flushing).

Walau bagaimanapun, terdapat beberapa kelemahan kaedah:

• peratusan yang agak tinggi hasil positif palsu (sehingga 15%), yang dikaitkan dengan pengesanan mikroorganisma yang tidak hidup;
• dalam sesetengah kes, anda boleh melangkau fakta penyakit, kerana Mycobacterium tuberculosis sering tertakluk kepada mutasi dan perubahan genetiknya;
• kecekapan rendah dalam pemeriksaan orang yang mempunyai kekurangan immunodeficiency;
• kos penyelidikan yang tinggi, keperluan peralatan dan reagen yang mahal.

Apa yang boleh diganti?

Memandangkan pelbagai bentuk jangkitan tuberkulosis, untuk diagnosis yang lebih tepat dan pilihan rawatan adalah perlu untuk menggabungkan beberapa kajian diagnostik:

Analisis mandatori untuk kanak-kanak adalah ujian Mantoux. Sekiranya pengenalan tuberculin (bahan genetik mycobacteria) berlaku reaksi yang jelas, ia boleh dijangkiti jangkitan dengan bacillus tubercle.

Kaedah sinar-X boleh digunakan untuk menggambarkan fokus patologi. Dalam diagnosis tuberkulosis extrapulmonary, kaedah endoskopik digunakan dengan biopsi serentak:

• bronkoskopi membantu mengenal pasti lesi-larynx, trakea, bronkus;
• kolonoskopi - usus;
• cystourethroscopy - organ sistem kencing;
• histeroskopi - alat kelamin wanita. Kaedah ini tidak khusus, untuk membuat diagnosis yang tepat, patogen perlu dikenalpasti.

Ujian klinikal umum akan membantu untuk menentukan keadaan badan yang lebih khusus. Kiraan darah lengkap dengan formula leukosit diperlukan.

Peningkatan bilangan neutrophil dengan tahap limfosit yang dikurangkan dan peningkatan kadar sedimentasi erythrocyte (ESR) menunjukkan proses keradangan bakteria etiologi yang aktif. Mengecualikan kerosakan pada organ sistem kencing menggunakan urinalis umum dan budaya untuk kemandulan.

PCR kini boleh didapati di kebanyakan makmal swasta. Ini memerlukan bukan sahaja pakar yang berkelayakan, tetapi juga peralatan mahal, sebilangan besar reagen. Oleh itu, penggunaan kaedah ini adalah terhad walaupun mempunyai ketepatan dan kekhususan yang tinggi.

Analisis PCR untuk diagnosis tuberkulosis

Perubatan tidak pernah berhenti, dan sehingga kini, kemajuan dalam sektor kesihatan memungkinkan untuk mendiagnosis dan menyembuhkan banyak penyakit sebelum ini yang tidak terjejas. Terdapat juga penyakit yang tidak dapat dikesan dengan pemeriksaan visual. Tuberkulosis sentiasa ada di kalangan mereka. Ia adalah penyakit berjangkit berbahaya yang memberi kesan kepada paru-paru, sendi dan tulang, dan sering menyebabkan kematian walaupun pada zaman kita. Kaedah diagnostik untuk penyakit ini telah diperbaiki, yang memungkinkan untuk mengesan penyakit pada peringkat awal apabila ia boleh dirawat. Antaranya bukan sahaja ujian X-ray dan Mantoux, tetapi juga PCR untuk batuk kering.

Tuberkulosis - apa itu

Sebelum ini, tuberkulosis dipanggil penyakit kering atau phthisis. Ini adalah jangkitan bakteria yang paling kerap memberi kesan kepada paru-paru. Bentuk ekstrapulmonary - tuberkulosis tulang dan sendi, meningitis tuberkular - tahap kurang biasa dan lebih maju. Agen penyebab penyakit berjangkit ini adalah mycobacteria. Bacillus tuberculosis juga dikenali sebagai tongkat Koch.

Infeksi TB sangat menular, ia ditularkan melalui titisan udara apabila batuk dan bersin dengan pesakit. Satu-satunya perlindungan terhadap penyakit ini adalah vaksin yang diberikan tepat pada masanya. Ia tidak melindungi jangkitan, tetapi tidak membenarkan bacilli masuk ke dalam badan untuk menyebabkan tuberkulosis.

Bentuk tuberkulosis

Penyakit ini boleh berlaku dalam bentuk terbuka dan tertutup. Perbezaannya adalah seperti berikut:

• tuberkulosis yang tertutup adalah asimtomatik. Dalam keadaan sedemikian, tongkat Koch di dalam dahak adalah mustahil untuk mengesan, oleh itu, yang dijangkiti tidak berbahaya bagi alam sekitar. Cara semacam penyakit ini biasanya tidak mengancam yang paling terinfeksi, tetapi ada pengecualian - dalam satu kes sepuluh, tuberkulosis tertutup dapat masuk ke bentuk terbuka;
• dengan bentuk terbuka, mikobakteria yang menyebabkan tuberkulosis ditemui dalam air liur dan pesakit pesakit. Organisma yang dijangkiti memberikan bahaya besar kepada masyarakat, walaupun secara berasingan. Sebagai peraturan, penyakit ini mula-mula mempengaruhi paru-paru. Jika tidak didiagnosis lebih awal, ia mungkin mengambil bentuk lain, seperti tuberkulosis tulang atau sendi.

Bentuk tuberkulosis yang terbuka didiagnosis dalam pelbagai cara. Pesakit menjalani X-ray dada atau X-ray dada, menganalisis bahan biologi atau ujian kulit Mantoux. Baru-baru ini, kaedah lain telah muncul yang dianggap sama berkesan - analisis tindak balas rantai polimerase (PCR).

Apakah maksud PCR?

Dalam amalan perubatan, kaedah mendiagnosis ini atau penyakit dengan mengesan DNA atau RNA dalam tubuh manusia telah lama digunakan. Ini adalah PCR untuk tuberkulosis. Ini adalah analisis ketepatan tinggi darah atau cecair biologi yang lain, yang membolehkan anda mengenal pasti bakteria dengan sekurang-kurangnya kepekatan mereka dalam bahan terpilih, sel tunggal cukup. Kajian ini dijalankan menggunakan enzim polimerase khas.

Kelebihan kaedah

PCR adalah kaedah diagnostik yang telah menunjukkan dirinya dari sisi terbaik, oleh itu ia digunakan dengan kerap, kedua-duanya digabungkan dengan kaedah lain dan secara bebas. Kelebihannya:

• syarat pengeluaran yang paling singkat. Kajian ini dijalankan dengan cepat, dalam masa 5 jam menggunakan PCR dapat mengesan kehadiran bacillus tuberkulosis dalam cairan biologis pesakit. Ini benar terutamanya jika anda perlu melakukan campur tangan pembedahan segera, dan sebelum itu mendapat diagnosis yang tepat;
• Ia berlaku bahawa kaedah diagnostik lain adalah kontraindikasi kepada pesakit. Sebagai contoh, X-ray boleh dilakukan dengan tidak bermakna semua orang. Di samping itu, gambar tidak selalu mungkin untuk membuat diagnosis, terutama jika penyakit itu berada di peringkat awal. Dengan bantuan kaedah PCR, patogen dikesan dengan serta-merta;
• Mana-mana bendalir biologi pesakit sesuai untuk analisis. PCR air kencing dan air liur untuk tuberkulosis dilakukan untuk mengenal pasti bentuk paru-paru dan ekstrapulmonari. Kajian ini juga dijalankan menggunakan cairan tulang belakang pesakit untuk mengesan meningitis tuberkulosis.
• Kaedah ini sememangnya selamat. Untuk menjalankannya, ia cukup untuk mendapatkan cecair biologi dari pesakit. Diagnosis PCR tuberkulosis pada kanak-kanak adalah mudah dan tidak berbahaya, kerana pemeriksaan sinar-X dibenarkan hanya dari usia 18 tahun, dan ujian Mantoux kadang-kadang menyebabkan reaksi buruk;
• PCR adalah analisis yang sangat sensitif. Ia membolehkan anda mengenal pasti batang Koch dengan kepekatan minimum mycobacteria;
• Dengan bantuan enzim polimerase khas, penyakit disahkan di mana-mana peringkat, dari awal hingga maju;
• kaedah ini berkesan dalam mendiagnosis kekambuhan penyakit;
• Kaedah ini merupakan satu kejayaan dalam membuat diagnosis tepat pada peringkat awal penyakit. Ini membolehkan anda memulakan rawatan dalam masa yang sesingkat mungkin dan memusnahkan patogen, ketika mereka belum mempunyai kesan negatif yang tidak dapat diubah pada organ dan sistem tubuh manusia.

Di mana untuk melakukan analisis PCR untuk batuk kering

Walaupun analisis PCR untuk tuberkulosis adalah kaedah yang sangat berkesan untuk mendiagnosis penyakit ini, ia jarang digunakan sendiri. Sebagai peraturan, ini adalah satu kaedah tambahan untuk mengesan tuberkulosis dan ia jarang digunakan. Hakikatnya ialah kaedah ini agak mahal.

Klinik awam tidak mempunyai peluang untuk membeli peralatan khas untuk menjalankan analisis PCR, dan kerajaan tidak melihat titik pembiayaan artikel ini, kerana tuberkulosis boleh didiagnosis dengan cara lain. Kajian semacam ini sering dijalankan di klinik swasta yang mampu membeli peralatan yang diperlukan.

Kelemahan kaedah ini

Harga yang tinggi bukanlah satu-satunya kelemahan PCR. Sebagai tambahan kepada kos yang tinggi, kaedah ini mempunyai kelemahan dan kekurangan lain, sebagai contoh:

• PCR untuk tuberkulosis memberikan hasil positif walaupun selepas rawatan, kerana ia mengambil sel-sel mati sebagai bakteria hidup, maka kaedah ini tidak sesuai sebagai pemeriksaan kawalan pesakit untuk mengesahkan pemulihannya;
• mutasi bacilli tuberkulosis, dan DNA mereka diubah suai, yang boleh menjejaskan kebolehpercayaan hasilnya;
• Ujian darah PCR untuk tuberkulosis jarang dilakukan, kerana kehadiran Koch dalam cecair biologi ini amat sukar untuk diuji. Ini hanya boleh dilakukan pada peringkat akhir atau sepsis. Biasanya, pesakit pesakit diambil untuk diagnosis;

Perlu diingat bahawa hasil yang paling tepat adalah dengan tepat pengumpulan kandungan perut pesakit. Jika tuberkulosis pulmonari disyaki, budaya dahak akan menjadi cara yang paling berkesan untuk mendiagnosis penyakit ini. Sekiranya pesakit mempunyai bentuk ekstrapulmonari, maka tidak ada bakteria dalam bioenvironment ini. Untuk menentukan tuberkulosis tulang, sendi, dan lain-lain menggunakan PCR, satu lagi cecair biologi diperlukan, contohnya, cecair spinal.

Bagaimana PCR untuk tuberkulosis?

Seperti yang dijelaskan sebelumnya, intipati analisis PCR adalah untuk mengenal pasti DNA patogen dalam cecair biologi pesakit oleh tindak balas polimerase. Tahap utama kaedah:

1. Pensampelan bahan biologi. PCR bukan sahaja hemotest - biomas yang dikaji boleh menjadi air liur, air kencing, cecair cerebrospinal, cecair cuci bronkial, kandungan perut, dahak.
2. Selepas itu, biomas terdedah kepada suhu tinggi untuk menghancurkan struktur DNA patogen.
3. Kemudian suhu secara beransur-ansur berkurangan dan primer dipasangkan ke elemen DNA yang telah dimusnahkan.
4. Menurut hasil sintesis molekul, yang mengambil masa kira-kira 30 kitaran, ketegangan bakteria patogen tertentu dikesan atau ketiadaannya.

Analisis ini memerlukan pembiayaan yang baik, jadi PCR tidak dilakukan dengan kerap. Walau bagaimanapun, kaedah ini tidak sama, apabila pilihan diagnostik lain dilarang, atau dalam keadaan kecemasan, apabila tidak ada masa untuk menunggu hasilnya.

Menyimpulkan

Sebagai kesimpulan, kita boleh membuat kesimpulan berikut:

• PCR adalah analisis yang sangat tepat yang dapat mengesan tuberkulosis beberapa hari selepas jangkitan;
• analisis ini dilakukan dalam masa 3.5 - 5 jam, jadi dalam kes apabila bil berjalan ke jam, ia tidak boleh ditukar;
• ia adalah kaedah yang selamat yang tidak mempunyai kesan sampingan;
• Ia digunakan apabila kaedah diagnostik lain menunjukkan hasil yang tidak konsisten atau penggunaannya adalah kontraindikasi.

Walau bagaimanapun, PCR jarang dilakukan, kerana ia adalah analisis mahal yang memerlukan pemasangan peralatan khas. Di samping itu, ia tidak selalu bermaklumat, jadi pakar menggunakan kaedah mengesan tuberkulosis sebagai tambahan.

Analisis PCR (diagnosis) tuberkulosis

Tuberkulosis atau penggunaan - salah satu penyakit berjangkit yang paling popular pada abad ke-21. Patogennya adalah mikrobakteria khas - Koch melekat.

Penyakit ini tidak hanya menyebar ke paru-paru, tetapi juga ke otak, pencernaan, sendi atau tulang belakang, sistem kencing, dan kulit.

Menurut WHO, 10 juta orang menderita tuberkulosis setiap tahun, di mana 3 juta maut.

Keadaan ini amat menyedihkan di wilayah negara-negara CIS, di sini epidemik berair berlaku secara berkala. Rusia, Kazakhstan, Ukraine diketuai oleh penarafan sedih mengenai penyebaran jangkitan ini.

Jangkitan ini mudah disebarkan melalui titisan udara atau melalui sistem pencernaan, mempengaruhi organ-organ penting, dan juga dapat dengan cepat menyesuaikan diri dengan ubat-ubatan dan kemoterapi polimer.

Salah satu faktor utama untuk rawatan tuberkulosis yang berjaya ialah pengesanan jangkitan tepat pada masanya.

Kaedah diagnostik

Umat ​​manusia telah mencipta banyak kaedah untuk mengenali penyakit berbahaya. Diagnosis tuberkulosis dibahagikan kepada instrumental dan makmal.

Dalam kes pertama, ujian darah untuk tuberkulosis, serta sputum, air kencing.

Kumpulan kedua adalah kajian menggunakan X-ray dan endoskopi. Kaedah instrumen untuk mendiagnosis tuberkulosis, pada gilirannya, adalah radiasi dan pembedahan.

Jenis kaedah radiasi untuk mencari penyakit

• Fluorografi adalah satu kaedah untuk mendiagnosis penyakit yang biasa kepada setiap penduduk CIS. Menggunakan sinar-x, paru-paru dan nodus limfa hilar diperiksa.
• X-ray dada - serupa dengan fluorografi, tetapi kaedah yang lebih baik untuk mengesan jangkitan. Gambar itu diperoleh dengan lebih terperinci dan dalam dua taksiran, tetapi prosedur ini adalah sekitar enam kali lebih mahal. Biasanya ia digunakan selepas kecurigaan serius penyakit telah timbul.
• Komputasi tomografi dilakukan sebagai diagnosis tambahan, juga digunakan selepas alasan yang baik untuk kehadiran jangkitan.

Kaedah diagnosis pembedahan termasuk endoskopi bronkial, serta mediastinoscopy dan thoracocoscopy.

Kaedah pertama ialah mengkaji pokok bronkus paru-paru dengan bantuan "siasatan" dalam organ ini. Dua cara yang selebihnya memungkinkan untuk mengkaji bahagian pleura dari paru-paru dengan menusuk dada.

Ketiga kaedah ini adalah campur tangan pembedahan yang serius dan paling sering digunakan dalam proses perkembangan penyakit.

Ujian makmal termasuk:

• Analisis sputum untuk bacillus tubercle.
• Pemeriksaan mikroskopik.
• Diagnosis tuberkulosis PCR

Apakah diagnosis PCR?

Salah satu kaedah diagnosis makmal yang paling maju pakar-pakar jangkitan memanggil tindak balas rantai polimerase.

Kaedah ini dibangunkan oleh ahli sains Amerika Syarikat yang terkenal Carrie Mullis pada tahun 1983, di mana beliau memenangi Hadiah Nobel.

Analisis PCR adalah pengasingan zarah DNA dari sputum, darah, cecair serebrospinal, najis, dan sebagainya. untuk biosintesis seterusnya.

Dengan bantuan kajian genetik molekul kompleks, sifat mikrob di dalam tubuh pesakit ditentukan.

Analisis jenis tuberkulosis ini dilakukan dalam beberapa peringkat:

• Pertama, sampel biologi diambil. Bahan diletakkan di dalam bekas khas dan dihantar ke makmal.
• Di pusat penyelidikan, analisis dipanaskan hingga 97 derajat. Ini memungkinkan untuk memusnahkan struktur genom DNA mikroorganisma, yang terdiri daripada beberapa rantai.
• Suhu itu secara khusus diturunkan supaya primer (peserta DNA dari mana proses biosintesis bermula) boleh menyambung kepada mana-mana rantai asid deoksiribonukleik.
• Selepas itu, biosintesis molekul yang diperlukan untuk pengesanan dilakukan.

Selepas 25-30 kitaran berulang dalam proses penyelidikan makmal, doktor mempunyai peluang untuk mengenal pasti sama ada mikroorganisme berjangkit hadir di dalam tubuh pesakit atau tidak.

Kelebihan dan kekurangan

PCR untuk tuberkulosis adalah teknik diagnostik yang paling moden. Kaedah ini memungkinkan untuk mengesan jangkitan di mana-mana peringkat dengan kebolehpercayaan yang tinggi. Faedah:

• Kelajuan - kajian mengambil masa tidak lebih daripada lima jam. Keputusan ujian untuk mikroba tuberkulosis dapat dijumpai dalam 24 jam.
• Keselamatan - Kaedah PCR tidak mempunyai kontraindikasi umur.
• Ketepatan masa - teknik ini membolehkan anda mengesan tuberkulosis pada peringkat tersebut apabila penyakit ini tidak mempunyai gejala.
• Takat ketepatan yang tinggi - jika terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam analisis, ia akan dijumpai menggunakan tindak balas rantai polimerase. Juga, teknik ini memudahkan untuk mengenal pasti agen penyebab tuberkulosis.
• Ketidaksuburan - diagnostik digunakan bukan sahaja untuk pengesanan penggunaan, tetapi juga untuk penyakit lain seperti klamidia, gonorrhea, dll.

Walaupun banyak kelebihan, penggunaan teknik ini dalam amalan perubatan domestik adalah pengecualian dan bukannya peraturan. Terdapat beberapa sebab untuk ini.

Kelemahan kaedah ini ialah:

• Kos kajian yang tinggi.
• Kaedah ini tidak sesuai untuk mereka yang telah menjalani terapi, kerana kehadiran bakteria Koch yang mati boleh membawa kepada hasil positif palsu.
• Dalam kes mutasi mikroorganisma berjangkit, genom mereka tidak boleh diiktiraf dengan membuat kesimpulan palsu.
• Adalah penting untuk memilih persekitaran pengesanan yang tepat. Sebagai contoh, hasil ujian darah untuk PCR untuk tuberkulosis (kemasukan pencairan) akan menjadi negatif sekiranya sistem saraf dijangkiti.
• Ia tidak selalu mungkin untuk menggunakan kaedah ini untuk pesakit yang didiagnosis dengan lesi paru-paru.

Di samping itu, analisis seperti itu untuk batuk kering memerlukan peralatan moden yang 90 peratus tidak mempunyai hospital. Dalam CIS, analisis sedemikian boleh dilakukan oleh rangkaian klinik Invitro.

Syarat analisis

Cadangan untuk pesakit yang menjalani ujian sedemikian untuk batuk kering bergantung kepada jenis analisis yang mereka lalui.

Apabila mengambil darah untuk PCR, adalah perlu untuk menahan diri dari merokok sejam sebelum prosedur, selama dua jam - untuk mengecualikan makanan alkohol dan lemak.

Ia juga disyorkan untuk menahan diri daripada melakukan senaman fizikal, tetapi juga mustahil untuk mengambil darah untuk tuberkulosis pada perut kosong.

Apabila mengambil tamparan dari mulut dan rongga hidung, anda tidak boleh makan 2-4 jam sebelum prosedur, jika tidak, ia tidak akan memberi maklumat. Juga, jangan minum alkohol.

Untuk analisis bacaan yang tepat adalah dilarang untuk merokok lebih awal daripada sejam sebelum prosedur. Pada malam itu, jangan gunakan sikat gigi dan gunakan semburan semburan dan mulut.

Jika anda mengesyaki tuberkulosis sistem urogenital, pesakit selama 2-3 hari sebelum penghantaran harus mengecualikan seks, selama 2-3 jam sebelum prosedur, jangan pergi ke tandas "dengan cara yang kecil". Organ-organ kemaluan perlu dibasuh dengan air kosong tanpa cara khas.

Wanita dinasihatkan untuk tidak menggunakan tablet faraj, lilin, bola, dan juga untuk mengelakkan daripada ujian pada hari kritikal.

5 hari sebelum penghantaran, hasilnya adalah perlu untuk meninggalkan prosedur kolposkopi, serta ultrasound transvaginal,

Kapan diagnostik PCR digunakan?

Tidak semua klinik mempunyai diagnosis yang kompleks, tetapi doktor semakin menggunakan kaedah penyelidikan sedemikian. Biasanya analisis seperti ini dijalankan dalam keadaan khas.

• Sekiranya keputusan ragu manta, ujian darah untuk tuberkulosis boleh digunakan.
• Dalam kes di mana pesakit telah bersentuhan dengan orang yang dijangkiti, tetapi doktor yang hadir tidak boleh menentukan diagnosis secara tepat.
• Sekiranya pembedahan kecemasan, apabila perlu untuk mengetahui dalam masa yang singkat sama ada pesakit mempunyai jangkitan ini.
• Apabila pesakit hamil, apabila kaedah penyelidikan lain tidak cukup selamat untuk bayi yang baru dilahirkan.

Perlu diingat bahawa diagnosis ini disyorkan untuk kanak-kanak kerana keselamatannya.

Sekiranya pelajar mempunyai kontraindikasi terhadap ujian tuberkulin, dia boleh mengambil ujian darah untuk tuberkulosis dan bukannya mantel oleh PCR.

Analisis PCR untuk batuk kering

Analisis PCR untuk tuberkulosis adalah yang paling popular di kalangan penyelidikan perubatan dalam bidang penyakit ini.

Tetapi bagaimana untuk memberi amaran kepada diri sendiri dan orang tersayang daripada penyakit yang dahsyat ini? Bagaimana untuk menghantar ujian yang diperlukan untuk PCR?

Gejala batuk kering dan pencegahannya

Pakar mengatakan bahawa kira-kira 30% daripada jumlah penduduk menderita batuk kering.

Peratusan tertinggi penyakit ini dikembangkan di negara-negara yang belum dimajukan. Ini yang paling sering berlaku akibat imuniti dikurangkan pada manusia.

Penyakit ini adalah salah satu yang paling tua. Penyakit ini boleh didapati di lapisan otak, dalam saluran pencernaan, pada sendi dan tulang belakang, dalam sistem kencing dan di kawasan kecil pada kulit manusia.

Pakar paling mudah menentukan kulit yang terjejas. Di tapak terdapat segel kecil, yang meningkat dari masa ke masa, pecah dengan cecair putih.

Ejen penyebab tuberkulosis paling kerap dijangkiti apabila bercakap dengan orang yang sakit, ketika mereka batuk atau bersin. Biasanya, penyakit itu terus tanpa gejala atau mempunyai bentuk terbuka, tetapi diagnosis tuberkulosis PCR memungkinkan untuk mengesannya pada peringkat awal dan dalam keadaan kecemasan.

Gejala penyakit: batuk basah yang berpanjangan, demam, menggigil, berkeringat berlebihan pada waktu malam, kehilangan berat badan yang tajam, rasa keletihan dan kelemahan.

Bentuk terbuka penyakit adalah yang paling berbahaya. Seseorang yang mengidap tuberkulosis dapat menjangkiti orang yang sihat.

Gejala yang paling penting dalam penyakit paru ialah hemoptisis. Ia berlaku dalam sebarang bentuk penyakit.

Dalam sesetengah keadaan, ini boleh mengakibatkan pendarahan dari paru-paru seseorang. Ia sangat berbahaya dan memerlukan campur tangan perubatan segera.

Untuk pencegahan dan pengiktirafan tuberkulosis, pakar menetapkan: sampel - ujian tuberkulin, pemeriksaan bahan biologi, fluorografi, X-ray dan ujian darah, sputum atau air liur.

Diagnosis penyakit ini

Diagnosis yang lebih baik daripada penyakit ini - ini adalah betul dan semasa rawatan bermula. Dalam kebanyakan kes, kaedah biasa untuk mengesan patogen tidak selalu mempunyai kesan dan sudah lapuk.

Cara yang paling penting untuk mengenal pasti dan mendiagnosis penyakit paru adalah ujian peperiksaan perubatan. Biasanya menggunakan diagnostik PCR. Tinjauan ini ditemui agak baru-baru ini, pada tahun 1983, oleh biokimia Amerika Mullis.

Ujian dalam pesakit dengan tuberkulosis pulmonari dilakukan secara eksklusif dalam kes-kes khas apabila sukar untuk menentukan diagnosis atau tidak mungkin untuk mengesan penyakit dengan cara instrumental.

Tindak balas rantai polimerase adalah kaedah PCR yang boleh dipercayai. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan agen penyebab berapa banyaknya dalam cecair darah, air kencing dan saraf tulang belakang. Pemeriksaan perubatan sedemikian adalah yang paling selamat.

Analisis PCR memberikan 100% hasil.

Ia mempunyai kepekaan yang tinggi, yang membantu mengenali penyakit untuk jam pertama kali selepas jangkitan, sebelum gejala penyakit muncul. Kaedah analisis ini memberikan keputusan dalam masa beberapa jam selepas penyerahan bahan biologi. Penyebaran analisis ini dilakukan tiga kali, tetapi aspirasi perut berpenyakit hanya dilakukan di hospital.

Tiga kriteria telah dibangunkan untuk menentukan keputusan: ketepatan tinggi, kepekaan sehingga 90%, kekhususan.

Ujian untuk PCR digunakan dalam beberapa kes:

1. untuk mendiagnosis tuberkulosis pulmonari;
2. tentukan sumber penyakit itu;
3. definisi penerokaan extrapulmonary;
4. diagnosis berulang.

Menilai hasilnya, dan menetapkan rawatan perubatan yang betul, hanya boleh menjadi spesialis. Adalah sangat penting untuk menetapkan skim rawatan perubatan yang betul untuk pengesanan tuberkulosis, adalah perlu untuk melakukan ujian untuk kerentanan patogen kepada alat-alat anti-tuberkulosis.

Pelbagai ujian perubatan batuk

Anda boleh mengambil analisis yang diperlukan dalam dua cara: mengambil darah atau air liur dari seseorang atau mengambil ubat.

Ujian darah oleh PCR boleh terdiri daripada dua jenis: ELISA dan PCR. Kajian sedemikian membantu memantau keberkesanan rawatan perubatan.

ELISA membantu mencari antibodi dalam tubuh manusia yang menentang mikrob tuberculosis. Kajian ini dilakukan sekali sehari. Kekurangan utama adalah kepekaan yang rendah, yang memungkinkan untuk menentukan hanya satu penyakit dengan tahap jangkitan yang rendah.

Penyelidikan yang paling popular dan berkesan adalah analisis terhadap mycobacterium tuberculosis. Bersama beliau, doktor dapat dengan mudah mencari DNA bakteria dalam darah manusia. Kaedah ini juga digunakan untuk menentukan bilangan bakteria, untuk mengawal rawatan pesakit, untuk mengesan pengulangan awal.

Air liur PCR adalah salah satu kaedah penyelidikan yang paling maju. Analisis sedemikian akan membantu mengenal pasti bakteria berjangkit dalam air liur. Menggunakan PCR meningkatkan bilangan serpihan DNA mikroba yang berbahaya.

Kaedah budaya ini bertujuan untuk pemeriksaan sputum manusia, untuk mengesan mikroba bakteria.

Bersedia untuk ujian PCR

Perhatian, anda memerlukan penyediaan air liur yang tepat untuk PCR. Jika semua preskripsi tidak diikuti, analisis mungkin positif palsu.

Sebelum mengambil ujian, dilarang merokok, mengambil makanan dan ubat-ubatan, serta mengambil alkohol selama 12 jam. Ia dilarang untuk memberus gigi anda, anda tidak boleh menggunakan bantuan bilas, penyegar mulut dan flos gigi.

Ia dilarang menggunakan gincu dan memasuki hubungan intim. Dibenarkan untuk membilas mulut anda dengan air rebus yang biasa;

Pemeriksaan ini akan membantu mengenalpasti: herpes, chlamydia, tuberculosis, patogen pneumonia, onkovirus, barolleosis, mononucleosis, HIV, hepatitis dari semua jenis, rubella.

Analisis untuk mikobakteria terutamanya dijalankan dalam kes kontroversi, iaitu jika sukar untuk membuat diagnosis atau ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis, sebelum memulakan operasi, untuk mengesan penyakit ini. Digunakan untuk pemeriksaan seorang wanita hamil, kerana kaedah ini adalah yang paling selamat untuk ibu dan janin.

Kadang-kadang analisis dilakukan di klinik swasta, kerana pesakit tidak mematuhi peraturan untuk ujian, tetapi pada masa yang sama ia bimbang tentang semua gejala. Analisis boleh dilakukan apabila pakar tidak pasti selepas menjalankan ujian Mantoux atau pesakit adalah kanak-kanak.

Kelebihan dan kelemahan ujian perubatan untuk menentukan batuk kering

PCR adalah cara yang paling popular dan berkesan untuk menentukan penyakit ini.

Perbezaan terbesar dari kajian lain adalah hasil yang cepat dan tepat.

Kelebihan pemeriksaan perubatan ini boleh dilakukan untuk kajian urologi, ginekologi, onkologi, infeksi, hematologi, pulmonari, gastroenterologi dan lain-lain.

Kelebihan utama kajian seperti itu ialah ujian darah, dada dan air liur siap dalam masa yang singkat (ia akan mengambil masa 5 jam untuk mengesan penyakit). Peperiksaan perubatan sedemikian membolehkan ujian dijalankan apabila kaedah tertentu untuk mengkaji penyakit adalah dilarang atau tidak boleh diakses. Hebat untuk mengesan kambuh pada manusia.

Terima kasih kepada analisis ini, menjadi mungkin untuk menjalankan penyelidikan untuk sebarang persekitaran biologi. Ia dibenarkan mengambil bahan dari kanak-kanak. PCR memungkinkan untuk mengenal pasti agen penyebab di mana-mana peringkat penyakit. Oleh kerana kepekaannya yang tinggi, mikrob boleh didapati walaupun terdapat sedikit bakteria sahaja.

Kaedah PCR memperluaskan keupayaannya. Ia juga digunakan untuk menentukan paterniti, untuk menghasilkan gen baru, mutasi, untuk melintasi elemen DNA, dan sebagainya.

Kelemahan kajian ini adalah kaedah tinjauan yang mahal.

Selepas rawatan perubatan, ujian darah dapat menunjukkan kehadiran patogen secara langsung atau mati dalam kuantiti yang kecil, selepas pemeriksaan perubatan, ia akan memberikan hasil yang positif.

Bakteria dan mikrob boleh mengalami mutasi, dan selepas itu PCR tidak akan dapat mengenal pasti dan mengenal pasti mereka, oleh itu, hanya seorang pakar yang boleh menetapkan kajian persekitaran yang diperlukan, jika tidak, pemeriksaan perubatan tidak akan berkesan.

Selepas ujian, terdapat keputusan negatif, tetapi ini tidak mengecualikan kemungkinan seseorang dijangkiti tuberkulosis. Pemeriksaan perubatan seperti itu dijalankan untuk pesakit yang mengalami penyakit paru-paru yang teruk, apabila mana-mana kajian lain tidak memberikan hasil yang tepat. PCR akan berguna untuk orang yang mempunyai batuk kering paru-paru dan extrapulmonary.

Malangnya, peralatan perubatan untuk mengesan patogen tuberkulosis sangat mahal.

Hospital awam dan klinik tidak mampu, tetapi klinik berbayar mengambil ujian pesakit dan menyediakan hasil yang siap dalam masa yang singkat.

Diagnosis tuberkulosis PCR

Tuberkulosis adalah jangkitan khusus, tumpuannya mungkin dalam tisu manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronik yang rejimen rawatan yang optimum sukar dipilih. Salah satu sebab untuk ini adalah diagnosis lewat, ketika mycobacteria, ketika di dalam tubuh manusia, telah disesuaikan dengan banyak ubat.

Apakah kaedah diagnosis moden yang ada? Diagnostik PCR - apa itu? Bagaimana kajian ini dilakukan? Dalam kes yang mana tuberkulosis didiagnosis dengan kaedah ini dan apakah intipatinya?

Apakah diagnostik PCR?

Ini adalah salah satu kaedah yang paling moden untuk mendiagnosis bukan sahaja penyakit, tetapi juga pengesanan bahan biologi. Diagnostik PCR dicipta baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mencadangkan skim pemulihan kompleks untuk bahan biologi mikroorganisma dalam satu segmen pendek. Terima kasih kepada penemuannya, saintis itu dianugerahkan anugerah tertinggi - Hadiah Nobel.

Apakah itu - diagnosis PCR jangkitan? Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah diagnosis pengesanan penyakit virus, berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Ia digunakan secara meluas dalam mikrobiologi perubatan, imunologi dan virologi. Kaedah ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sedikit bahan. Jangkitan dapat dikesan secara literal pada jam pertama jangkitan dengannya, jauh sebelum gejala penyakit pertama muncul.

Kaedah ini terdiri daripada mendapatkan dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi serpihan genom (zarah DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya untuk kelas mikroorganisma yang diperolehi daripada bahan genetik yang dimiliki melalui kaedah genetik molekul.

Walaupun ia adalah proses yang kompleks, ia mengambil masa yang lebih sedikit daripada banyak kaedah biologi mengesan agen berjangkit. Dalam masa beberapa jam, mikroorganisma boleh dikesan oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengasingkannya dari persekitaran (darah, cecair cerebrospinal, dahak) dan membesar untuk masa yang lama pada media nutrien tiruan. Adalah cukup bahawa serpihan kecil benang DNA agen berjangkit hadir dalam bahan yang sedang dipelajari.

Asas tindak balas adalah kemungkinan di bawah keadaan buatan (in vitro) untuk menghasilkan sintesis molekul asid nukleus agen berjangkit.

Apa yang diperlukan untuk PCR?

1. Primer adalah segmen DNA yang mana biosintesis atau penciptaan bermula.
2. Nukleotida atau sebatian kompleks yang merupakan asas molekul DNA atau RNA.
3. Tindak balas rantai polimerase tidak mungkin tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

Tahap diagnostik PCR

Bagaimanakah diagnosis molekul dilakukan oleh PCR? Prosedur ini mudah dan mengambil masa yang singkat, dengan mengambil kira pengumpulan bahan.

1. Sebelum memulakan kajian, mereka mengambil bahan biologi yang diperlukan - ini adalah air basuh bronkial, darah, kandungan lambung, dahak. Jenis bahan biologi bergantung kepada patogen yang disyaki.
2. Denaturasi atau pemusnahan struktur utama DNA, yang terdiri daripada dua rantai. Intipati tahap ini adalah untuk memisahkan dua rantai di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang tidak berlangsung lebih dari dua minit).
3. Pada tahap berikutnya PCR, dipanggil penyepuhlindapan, suhu dikurangkan dengan beberapa darjah supaya primer akan terikat pada helai DNA.
4. Pemanjangan, di mana sintesis molekul yang dikehendaki berlaku secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 kitaran sedemikian menerima bilangan salinan DNA mikroorganisma yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Adakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

Tidak mungkin benar-benar semua orang yang disyaki menggunakan tuberkulosis untuk melakukan PCR, kerana kaedah ini memerlukan peralatan mahal. Tidak semua klinik awam mampu membelinya. Di samping itu, ia berlaku bahawa kaedah biasa mendiagnosis jangkitan dalam kebanyakan kes juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

• tinjauan pesakit, pengambilan sejarah;
• pemeriksaan penuh orang itu;
• satu kajian menggunakan ujian tuberkulin Mantoux;
• radiografi atau fluorografi;
• diagnostik komputer jika perlu;
• Kaedah penyelidikan mikrobiologi: mikroskopi smear dan pemeriksaan bacteriological sputum.

PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kes-kes khas apabila sukar untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk menjalankan kaedah instrumental lain.

Walaupun terdapat banyak kaedah diagnostik, kejadian tuberkulosis terus berkembang. Pada masa ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga ciri-ciri lain:

• penyakit ini sering berlaku dalam bentuk yang teruk;
• bilangan kes maut meningkat;
• semakin tahan terhadap kemoterapi moden didiagnosis bentuk penyakit.

Kehadiran rakyat sendiri menjalani pemeriksaan kesihatan rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi menyebabkan penyebaran tuberkulosis. Dalam keadaan sedemikian, kita memerlukan kaedah penyelidikan yang cepat, bermaklumat dan berkesan yang boleh diakses oleh kanak-kanak dan orang dewasa. Semua kaedah diagnostik di atas adalah lebih rendah daripada PCR.

Faedah mendiagnosis batuk kering dengan PCR

Penyelidikan ini, walaupun baru, telah terbukti dengan baik, terutamanya dalam kes-kes kontroversi di mana mustahil untuk membuat diagnosis untuk beberapa sebab.

Terima kasih kepada PCR, lebih mudah untuk mengesan agen penyebab tuberkulosis dalam bahan ujian.

Kelebihan diagnostik PCR adalah seperti berikut.

1. Ini adalah analisis cepat. Serpihan kecil molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi kecemasan ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit tuberkulosis.
2. Analisis PCR dibenarkan dalam kes apabila kaedah lain tidak tersedia atau dilarang (untuk pengesanan tuberkulosis pulmonari, kadang-kadang anda perlu mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi dos radiasi yang besar).
3. Dengan bantuan PCR, sebarang persekitaran biologi diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair serebrospinal, jika terdapat kecurigaan terhadap meningitis tuberkulosis.
4. Mengizinkan diagnosis PCR penyakit berjangkit pada kanak-kanak, kerana kaedahnya selamat.
5. Membolehkan anda mengenal pasti patogen di mana-mana peringkat penyakit ini.
6. Kepekaan tinggi PCR memungkinkan untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis, walaupun terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam bahan biologi.
7. Adalah baik untuk menjalankan diagnosis penyakit berulang.

Selepas semua PCR yang dibaca seolah-olah menjadi kaedah diagnostik yang hampir sempurna, yang sepatutnya membuat setiap orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka mesti diambil kira.

Kelemahan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Di zaman kita, diagnostik sedemikian lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini terdapat sebab.

1. Ini adalah kaedah penyelidikan yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak hadir kerana kos yang tinggi, tetapi analisis masih boleh dilakukan di makmal berbayar.
2. Sejurus selepas rawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam kuantiti yang kecil mungkin masih terdapat di dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif semasa diagnosis PCR), jadi kaedah ini tidak boleh dipercayai pada masa ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
3. Mutasi mycobacteria mengakibatkan PCR tidak berkesan - urutan serai DNA biasa tidak dapat disintesis.
4. Ia adalah perlu untuk memilih persekitaran yang sesuai untuk kajian ini, darah diambil hanya jika ia disyaki dijangkiti (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada persoalan tuberkulosis organ-organ sistem saraf. Dalam kes ini, PCR tidak dapat mengesan patogen dan diagnosis akan menjadi tidak diketahui.

Petunjuk untuk mengesan batuk kering menggunakan analisis PCR

Diagnosis tuberkulosis PCR paling kerap dilakukan dalam kes kontroversi. Bilakah doktor merujuk kajian ini?

1. Sekiranya sukar untuk membuat diagnosis menggunakan kaedah yang sedia ada, tetapi ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
2. Dalam kes apabila seseorang tidak dapat dihantar ke klinik untuk menjalani ujian rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksa dia menggunakan PCR, memandangkan sputum untuk ujian boleh dihantar ke dalam balang dan diagnosis disahkan dalam masa beberapa jam.
3. Sekiranya seseorang akan menjalani operasi kecemasan dan ia perlu mengetahui sama ada dia sakit dengan tuberkulosis.
4. Sekiranya perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa tuberkulosis menggunakan PCR, kerana kaedahnya adalah selamat.
5. Secara berbayar, sesiapa yang belum didiagnosis dengan tuberkulosis telah disahkan menggunakan kaedah bacteriological dan fluoroscopy. Ini berlaku apabila luka di paru-paru tidak dapat dilihat dalam imej langsung, dan orang semasa penghantaran sputum untuk kajian itu tidak dapat mengikuti cadangan untuk pengumpulan bahan yang betul. Dalam kes ini, orang itu bimbang dengan semua ciri-ciri gejala batuk kering pulmonari.
6. Apabila terdapat keraguan tentang hasil ujian Mantoux.
7. Adalah lebih baik untuk melakukan diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak. Prosedur ini selamat, tidak membuat pendedahan radiasi tambahan, dan berkesan dalam mengesan sukar untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

Diagnosis tuberkulosis tepat pada masanya adalah kunci kepada rawatan yang ditetapkan dengan betul dan mengurangkan penyebaran penyakit. Selalunya, kaedah pengesanan penyakit biasa tidak selalu berkesan. Oleh itu, PCR hari ini adalah salah satu cara yang paling boleh dipercayai dan selamat untuk mengesan jangkitan pada peringkat awal perkembangannya.