Diagnosis PCR tuberkulosis pada kanak-kanak dan orang dewasa: tanda-tanda untuk

Batuk

Pertubuhan Kesihatan Sedunia diiktiraf 20 tahun yang lalu bahawa kadar penyebaran tuberkulosis tidak terkawal dan mencapai skala wabak. Sejak itu, keadaan tidak bertambah baik. Lebih daripada satu juta kes penyakit itu didiagnosis setiap tahun, di mana hampir satu perempat adalah maut. Dalam dekad yang lalu, kadar kejadian di kalangan kanak-kanak telah meningkat, kebanyakan bentuk penyakit tidak meminjamkan diri kepada terapi antibiotik yang standard.

Hari ini, salah satu tugas global untuk ubat adalah pembangunan kaedah diagnostik sedemikian yang akan membolehkan untuk mengenal pasti patologi sebelum permulaan gejala klinikal yang dinyatakan. Salah satunya adalah tindak balas rantai polimerase (PCR) untuk tuberkulosis, yang membantu mengesan penyakit Koch yang menyebabkan darah, dentuman dan cecair biologi yang lain.

Diagnosis tuberkulosis

Ujian pemeriksaan bertujuan untuk mengesan pesakit, pembawa tuberkulosis dan mencegah penyebaran jangkitan dalam masyarakat. Bagi kanak-kanak di bawah umur 14 tahun, ujian Mantoux digunakan secara besar-besaran. Ini adalah ujian imunologi di mana dos tuberculin disuntik subcutaneously - gabungan kompleks bahan genetik beberapa jenis mycobacteria. Penampilan reaksi yang jelas menunjukkan proses menular yang aktif.

Untuk pemeriksaan pencegahan pada orang dewasa menggunakan fluorografi atau x-ray. Kaedah ini membantu menggambarkan lesi patologi dalam tisu paru-paru. Walau bagaimanapun, ia menyebabkan kesukaran untuk membezakan tuberkulosis daripada patologi organik lain (neoplasma malignan dan jinak, proses keradangan, pencerobohan parasit, kerosakan paru-paru profesional).

Untuk menjelaskan struktur dan saiz fokus patologi, kajian instrumental tambahan mungkin diperlukan:

  • radiografi yang disasarkan;
  • pengiraan tomografi;
  • pengimejan resonans magnetik.

Kaedah untuk diagnosis batuk kering

Dalam kes keputusan yang diragukan dan untuk pelantikan terapi yang mencukupi, terdapat keperluan untuk kaedah diagnostik yang lebih tepat yang membolehkan anda mengasingkan patogen. Pemeriksaan Mikroskopik dan bakteriologi bagi sputum digunakan untuk mengesahkan bentuk tuberkulosis paru-paru untuk masa yang lama.

Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, kejadian mycobacterium dari pelbagai organ dan sistem - buah pinggang, tulang, usus, kulit - telah menjadi lebih kerap. Untuk mengenal pasti bentuk tuberkulosis, pemeriksaan ultrasound, kencing dan feses, pemeriksaan endoskopik boleh digunakan.

Diagnosis PCR untuk tuberkulosis akan membantu mengesahkan kehadiran koch sticks dalam darah, serta kepekaannya terhadap ubat-ubatan tertentu. Ini adalah kaedah yang sangat berkesan berdasarkan pengesanan bahan genetik bakteria dalam pelbagai cecair biologi.

Spesifikasi dan petunjuk

Tindak balas rantai polimerase adalah kaedah diagnostik mikrobiologi yang sangat sensitif, yang berdasarkan prinsip-prinsip kejuruteraan genetik. Untuk mengesahkan kehadiran patogen dalam bahan biologi, cukup untuk mengesan serpihan asid nukleik yang unik untuknya. PCR untuk tuberkulosis dapat mengesan bakteria dalam darah, sputum, air kencing.

Pada masa ini, dibangunkan beberapa kaedah analisis. Yang paling popular di antara mereka adalah yang berikut:

  • PCR masa nyata;
  • teknologi mikrofluid;
  • penjujukan dan pyrosequencing.

PCR masa nyata

Makmal paling kerap menggunakan tindak balas rantai polimer masa nyata, kerana ia mengurangkan bilangan hasil positif palsu, dan proses analisis itu sendiri mengambil masa yang singkat.

Memandangkan sebilangan besar bentuk tersembunyi penyakit dan ketidakcekapan kaedah diagnostik standard, PCR semakin digunakan. Tujuan analisis ini ditunjukkan di:

  • mengenal pasti kawasan mencurigakan pada sinar-X;
  • keputusan ujian uberculin yang ragu;
  • kemustahilan melakukan analisis mikroskopik dan bakteriologi dari dahak pada orang dalam keadaan yang serius;
  • melakukan campur tangan pembedahan apabila perlu memastikan dengan cepat bahawa tidak ada jangkitan;
  • tidak dapat diterima penggunaan fluorografi, x-ray atau tomografi yang dikira (contohnya, dalam wanita mengandung dan menyusu, dalam kes pendedahan radiasi yang berlebihan);
  • disyaki batuk kering ekstrapulmonary (disyorkan bukan sahaja darah tetapi juga dahak digunakan).

Diagnosis PCR tuberkulosis telah membuktikan dirinya dalam pemeriksaan kanak-kanak, kerana kurangnya pendedahan tambahan dan keputusan pesat.

Prosedur persediaan dan analisis

Persediaan khusus untuk darah PCR tidak diperlukan. Walau bagaimanapun, untuk mengelakkan komplikasi pensampelan darah dan untuk mendapatkan bahan yang berkualiti tinggi, peraturan am berikut harus diikuti:

  • analisis perlu diambil pada waktu pagi tidak lebih awal daripada 2 jam selepas bangun;
  • Ia harus menghadkan pengambilan makanan berlemak dan goreng sehari sebelum sampel darah;
  • menahan diri dari makan, teh dan kopi selama 8-9 jam, dibenarkan minum air bersih;
  • Jangan merokok selama sekurang-kurangnya 3-4 jam.

Dalam kes ubat kekal (hormon, antikoagulan, ubat anti-radang, antibiotik, penipisan darah), anda perlu memaklumkan pembantu makmal mengenai perkara ini.

Sekiranya penghantaran sputum, anda perlu berus gigi dengan baik dan bilas mulut anda beberapa kali. Kumpulkan bahan dalam bekas steril. Untuk keputusan yang lebih baik, agen expectorant atau mucolytic boleh diambil pada waktu petang.

Diagnosis itu sendiri terdiri daripada beberapa peringkat.

    Bahan pagar. Ia boleh dilakukan di makmal dan dari jauh. Sesetengah jenis bahan yang dikumpul pesakit secara berasingan (air kencing, kahak).

Pemusnahan struktur asid nukleik (denaturasi molekul DNA dan RNA). Untuk melakukan ini, bahan ujian dipanaskan pada suhu 98 darjah dan dipegang selama beberapa minit. Akibatnya, heliks berganda melepaskan, molekul terkandas tunggal terbentuk.

  • Annealing Selepas menambah primer (seksyen pendek asid nukleik), suhu berkurangan dengan beberapa darjah, polimerase diaktifkan.
  • Elognation. Suhu dibawa ke tahap yang optimum, aktiviti enzim mencapai maksimum dan rantai kedua diselesaikan selaras dengan peraturan Chargaff yang saling melengkapi.

    • Untuk menyelesaikan kajian, diperlukan untuk mensintesis bilangan molekul DNA yang diperlukan - kira-kira 50 kitaran reaksi di atas. Ia mengambil masa kira-kira 2-3 jam. Hasil positif tindak balas tidak selalu menunjukkan tahap aktif penyakit, tetapi merupakan penunjuk kehadiran mikroorganisma dalam tubuh.

    Kelebihan dan keburukan kaedah ini

    Sebagai perbandingan dengan kaedah mikrobiologi lain, PCR tidak mengambil masa yang lama untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis menggunakan PCR, hasilnya dapat diperoleh pada hari ujian.

    Satu lagi kelebihan adalah kekhususan tinggi analisis, yang memungkinkan untuk mengesan kehadiran patogen dengan ketepatan 90-95% dalam hampir mana-mana biomaterial (darah, air kencing, najis, cecair serebrospinal, sputum, bronchus flushing).

    Walau bagaimanapun, terdapat beberapa kelemahan kaedah:

    • peratusan yang agak tinggi hasil positif palsu (sehingga 15%), yang dikaitkan dengan pengesanan mikroorganisma yang tidak hidup;
    • dalam sesetengah kes, anda boleh melangkau fakta penyakit, kerana Mycobacterium tuberculosis sering tertakluk kepada mutasi dan perubahan genetiknya;
    • kecekapan rendah dalam pemeriksaan orang yang mempunyai kekurangan immunodeficiency;
    • kos penyelidikan yang tinggi, keperluan peralatan dan reagen yang mahal.

    Apa yang boleh diganti?

    Memandangkan pelbagai bentuk jangkitan tuberkulosis, untuk diagnosis yang lebih tepat dan pilihan rawatan adalah perlu untuk menggabungkan beberapa kajian diagnostik:

      Analisis mandatori untuk kanak-kanak adalah ujian Mantoux. Sekiranya pengenalan tuberculin (bahan genetik mycobacteria) berlaku reaksi yang jelas, ia boleh dijangkiti jangkitan dengan bacillus tubercle.

    Kaedah sinar-X boleh digunakan untuk menggambarkan fokus patologi. Dalam diagnosis tuberkulosis extrapulmonary, kaedah endoskopik digunakan dengan biopsi serentak:

    • bronkoskopi membantu mengenal pasti lesi-larynx, trakea, bronkus;
    • kolonoskopi - usus;
    • cystourethroscopy - organ sistem kencing;
    • histeroskopi - alat kelamin wanita. Kaedah ini tidak khusus, untuk membuat diagnosis yang tepat, patogen perlu dikenalpasti.

    Ujian klinikal umum akan membantu untuk menentukan keadaan badan yang lebih khusus. Kiraan darah lengkap dengan formula leukosit diperlukan.

    Peningkatan bilangan neutrophil dengan tahap limfosit yang dikurangkan dan peningkatan kadar sedimentasi erythrocyte (ESR) menunjukkan proses keradangan bakteria etiologi yang aktif. Mengecualikan kerosakan pada organ sistem kencing menggunakan urinalis umum dan budaya untuk kemandulan.

    PCR kini boleh didapati di kebanyakan makmal swasta. Ini memerlukan bukan sahaja pakar yang berkelayakan, tetapi juga peralatan mahal, sebilangan besar reagen. Oleh itu, penggunaan kaedah ini adalah terhad walaupun mempunyai ketepatan dan kekhususan yang tinggi.

    Analisis PCR untuk batuk kering

    Dalam kes penyakit yang disyaki, lebih baik segera lulus analisis PCR untuk tuberkulosis. Semasa kajian ini, darah diambil, yang diperiksa di bawah mikroskop. Reaksi rantai polimer semakin mula menggantikan ujian Mantoux untuk mengesan tuberkulosis.

    Kelebihan kaedah

    Analisis ini selepas beberapa jam menentukan kehadiran patogen. Di samping itu, jika terdapat sedikit bakteria di dalam badan, kaedah ini masih dapat mengenal pasti mereka.

    Kelebihan utama ujian PCR ialah mata positif berikut:

    1. Penyakit ini dikesan dalam 100% kes.
    2. Kekhususan DNA pejabat tinggi.
    3. Analisis itu mendedahkan agen penyebab dalam 4-4.5 jam.
    4. Tuberkulosis pulmonari berjaya didiagnosis, di mana kaedah lain tidak dapat diatasi.
    5. Keupayaan untuk mengesan serpihan tertentu, yang terkandung dalam patogen ini.

    Reaksi rantai polimer menjadikan ia bukan sahaja untuk mengenal pasti agen penyebabnya tepat pada masanya dan untuk memulakan rawatan pesakit, ia juga membolehkan masa untuk mengasingkan seseorang dari masyarakat sekiranya berlaku jangkitan. Tongkat Koch - agen penyebab tuberkulosis - boleh didapati di mana-mana di dalam badan. Dan hanya analisis PCR yang dapat mengenalpastinya di lokasi.

    Kajian PCR juga memberi peluang untuk memilih ubat bergantung kepada kepekaan mikroorganisma.

    Penerangan penyakit

    Pada abad kesembilan belas, tuberkulosis dipanggil penggunaan. Penyakit ini adalah jangkitan pada organ dalaman, terutamanya paru-paru. Tuberkulosis disebarkan melalui bersin dan batuk udara. Objek jangkitan boleh menjadi manusia dan haiwan.

    Selepas penembusan bakteria tuberkulosis ke dalam badan, penyakit ini boleh bertahan lama dalam bentuk laten.

    Bergantung kepada tahap pendedahan orang sakit kepada orang lain, 2 bentuk penyakit dibezakan:

    1. Bentuk tuberkulosis tertutup. Ia tidak berbahaya, kerana manusia tidak boleh menjangkiti orang lain. Malah dalam analisis, termasuk dan PCR, penyakit mycobacterium tidak dikesan. Tetapi masih ada bahaya dalam bentuk ini, sejak itu pada bila-bila masa bentuk tertutup boleh masuk ke dalam terbuka. Bentuk tuberkulosis yang aktif boleh membahayakan bukan sahaja untuk pesakit itu sendiri, tetapi juga bagi orang-orang di sekelilingnya.
    2. Bentuk jangkitan terbuka. Apabila ia berada dalam cecair biologi seseorang kayu Koch dikesan. Pesakit dengan batuk kering pada tahap ini membawa ancaman tertentu kepada mereka yang ada di sekelilingnya. Anda boleh dijangkiti walaupun pembawa teliti memantau diri dari segi kebersihan.

    Kaedah penyelidikan yang paling biasa digunakan untuk mengenalpasti penyakit termasuk:

    1. Fluorografi.
    2. Tomografi dada atau kawasan lain yang terjejas.
    3. Kajian radiografi.
    4. Kajian bahan biologi pesakit.
    5. Ujian Tuberculin (Mantoux).

    Cara yang paling berkesan untuk mengenal pasti bakteria Koch adalah analisis genetik molekul tindak balas rantai polimerase - diagnosis PCR tuberkulosis.

    Penyiasatan Tuberkulosis

    Tindak balas rantai polimerase adalah analisis genetik molekul yang paling tepat. Sekiranya jangkitan dengan jangkitan tuberkulosis telah berlaku, ujian polimer kajian membolehkan anda mengenal pasti DNA atau RNA patogen secara tepat. Untuk melakukan ini, menderma darah atau cecair biologi yang lain.

    Untuk menentukan kehadiran tuberkulosis, jumlah bakteria yang minimum adalah cukup, bahkan 1 sel akan dilakukan.

    Faedah diagnostik PCR lain termasuk perkara berikut:

    1. Dalam menjalankan analisis ini, satu enzim khas digunakan, kerana kehadiran tepat jangkitan tuberkulosis dikesan.
    2. Analisis PCR amat sensitif terhadap jangkitan mycobacterium, jadi ketepatan diagnostiknya hampir sama dengan 100%.
    3. Sudah selepas 3.5-5.5 jam selepas ujian telah dijalankan, ia mungkin dapat mengetahui keputusan analisis.

    Dengan penyakit seperti tuberkulosis, sangat penting untuk mengenal pasti patologi pada peringkat awal. Oleh itu, ujian untuk tindak balas rantai polimerase adalah yang paling bermaklumat dalam kes ini. Apabila bakteria baru mula menyerang, mereka harus dikesan sedini mungkin, sehingga kesannya telah mempengaruhi fungsi penting organ-organ dalaman.

    Analisis PCR mempunyai kelebihan lain terhadap jenis penyelidikan lain: teknik menentukan kepekaan mikroorganisma kepada ubat tertentu, yang membolehkan terapi menjadi paling berkesan.

    Bersedia untuk ujian PCR

    Sekiranya air liur memberi, penyediaan untuk ini diperlukan. 12 jam sebelum prosedur, anda mesti menyerah merokok, alkohol, ubat dan makanan. Menyikat gigi anda, membilas mulut anda dengan pelbagai penyegar, dan juga flosing adalah dilarang. Juga, anda tidak boleh menggunakan gincu dan kehidupan seks secara langsung. Ia adalah perlu untuk membilas rongga mulut dengan air masak.

    Bukan sahaja tuberkulosis dikesan oleh kaedah PCR. Dengan cara yang sama, penyakit tidak kurang serius seperti herpes, chlamydia, mononucleosis, pneumonia, barolleosis, HIV, hepatitis, rubella dapat dikesan.

    Darah paling sering diambil dari urat, tetapi dalam beberapa kes mungkin diperlukan bahan biologi yang berbeza:

    1. Air liur.
    2. Analisis air kencing
    3. Mengikis dari mana-mana bahagian badan.
    4. Rembesan seksual.
    5. Cal.
    6. Cecair tulang belakang.
    7. Pankreas dari bronkus semasa ekspektasi.
    8. Analisis lendir.

    Tetapi kaedah PCR yang paling bermaklumat masih merupakan ujian darah untuk tuberkulosis.

    Pengumpulan biomaterial

    Walaupun prosedur untuk mengenal pasti patogen dengan kaedah PCR hanya memerlukan 4-4.5 jam, ia adalah antara jenis diagnosis yang paling sukar. Banyak faktor boleh menjejaskan ketepatan keputusan. Sebagai contoh, adalah perlu untuk mengumpul sampel untuk penyelidikan mengikut peraturan tertentu. Yang utama ialah peningkatan kemandulan dalam pengumpulan bahan biologi. Oleh itu, analisis ini adalah sukar untuk menjalankan kanak-kanak kecil.

    Sekiranya sampel diambil sebagai darah dari urat, maka pakar melakukan ujian darah untuk PCR untuk tuberkulosis bukan sahaja dengan jarum suntikan steril, tetapi menurut semua peraturan kebersihan umum.

    Darah dikumpulkan dalam tiub ujian khusus dan sepanjang keseluruhan kajian disimpan dalam keadaan seperti yang menghalang pembekuannya.

    Jika ini adalah analisis PCR air kencing untuk tuberkulosis, maka cecair dikumpul pada waktu pagi ketika orang itu hanya terjaga. Sebelum pergi ke tandas, pesakit mengambil mandi dan kemudian mengambil bekas steril untuk mengumpul air kencing.

    Sekiranya mengambil mengikis dari alat kelamin, kedua-dua wanita dan lelaki, keseluruhan prosedur dijalankan di institusi perubatan.

    Terdapat ujian yang lebih kompleks, seperti mengambil cecair dari korda tunjang. Dalam kes ini, semua tindakan dilakukan di hospital oleh doktor berpengalaman.

    Selalunya, laluan analisis tindak balas rantai polimer diberikan dalam kes seperti berikut:

    1. Untuk mendiagnosis penyakit dalam tisu paru-paru.
    2. Untuk mengenal pasti punca penyakit tersebut.
    3. Untuk mengenal pasti penyakit di luar paru-paru.
    4. Untuk mendiagnosis pengulangan penyakit ini.

    Urutan ujian

    Diagnosis tuberkulosis pada kanak-kanak dan orang dewasa dengan bantuan tindak balas rantai polimer melalui langkah-langkah berikut:

    1. Dalam keadaan tertentu, bahan yang berbeza diambil untuk penyelidikan. Ini mungkin darah, dada, atau pembersihan bronkial.
    2. Selepas itu, bahan biologi yang diambil terdedah kepada suhu tinggi (sehingga + 97 ° C) untuk masa tertentu (selalunya ia adalah beberapa minit). Akibatnya, struktur asal DNA mikroorganisma, yang terdiri daripada 2 rantai, dimusnahkan.
    3. Selepas ini, suhu mula berkurangan, tindakan ini dipanggil penyepuhlindapan. Pada masa ini, primer menghubungkan kepada 1 litar terputus.
    4. Pada akhir pemanjangan dijalankan. Semasa itu, sintesis biologi yang diperlukan bagi molekul yang wujud berlaku.

    Ia akan mengambil masa 25-30 kitaran untuk mendapatkan jumlah salinan DNA yang diperlukan di Mycobacterium tuberculosis.

    Prosedur ini memerlukan peralatan yang mahal, jadi tidak semua institusi perubatan berpeluang melakukan ujian PCR untuk tuberkulosis dan bukannya Mantoux.

    Terima kasih kepada vaksinasi dan kajian PCR (bukan Mantoux) adalah mungkin untuk mencegah perkembangan penyakit seperti berbahaya seperti tuberkulosis. Sekarang anda tidak perlu menunggu permulaan penyakit atau mengambil gambar pada mesin X-ray. Sekiranya terdapat kecurigaan jangkitan, untuk menghapuskan akibat penyakit yang teruk, anda sentiasa boleh melakukan ujian PCR, yang menentukan keadaan badan dengan ketepatan maksimum. Dalam keadaan masa nyata, bentuk diagnostik seperti ujian Mantoux dan fluorografi secara beransur-ansur memudar ke latar belakang berbanding dengan kaedah PCR.

    Kaedah untuk ujian sputum untuk batuk kering

    Analisis sputum untuk tuberkulosis dimasukkan dalam set langkah diagnostik yang diperlukan untuk mengenal pasti dan menjelaskan diagnosis. Kandungan sputum akan membantu membuat rejimen rawatan yang kompeten.

    Bagaimana untuk melepasi ujian dahak untuk tuberkulosis

    Doktor telah membuat peraturan untuk mengambil analisis. Air liur dikumpulkan pada waktu pagi, sebelum orang itu telah sarapan pagi. Pertama, pesakit melakukan prosedur kebersihan:

    • pembersihan enamel gigi;
    • bilas dengan air bersih rongga mulut dan pharynx.

    Kemudian memulakan penyerahan segera bahan untuk analisis. Bagaimana untuk lulus ujian dada? Keperluan untuk prosedur:

    1. Persediaan bermula lebih awal, pada waktu petang. Pesakit digalakkan mengambil ubat khas yang akan membuat rembesan pulmonari lebih semula jadi. Ini adalah ekspektoran dan penipisan sebatian. Jika prosedur sedemikian tidak membantu, lakukan penyedutan dengan komposisi farmaseutikal untuk pendedahan.
    2. Sediakan bekas untuk dahagakan. Mucus perlu dikumpulkan dalam hidangan steril, tutup rapat, ketat.
    3. Sebelum bersalin, batuk dan meludah dalam bekas. Jumlah air liur tidak boleh besar, ia memerlukan dahak dari laring. Bakteria rongga mulut adalah luaran dalam analisis.
    4. Kumpulkan air liur di dalam bilik dengan pengudaraan yang sangat baik. Analisis dilakukan dengan membuka transom, menjalankan hud. Adalah dinasihatkan untuk membuka tingkap, atau keluar ke udara segar.

    Semasa prosedur di dalam bilik dilarang masuk. Orang luar boleh menyumbang kepada mikroflora pejabat, dan dengan itu, untuk pembedahan, pembentukan patologi. Pekerja perubatan menerima analisis dalam topeng khas (respirator).

    Analisis sputum untuk transkrip tuberkulosis

    Pengekodan bermula dengan melihat rupa lendir. Patologi mencirikan perubahan warna - menjadi gelap, dengan penambahan darah yang jelas. Warna bukan penunjuk utama. Sputum menjadi gelap dari minum wain merah, semangat kopi. Sesetengah ubat dan minuman berwarna mengubah rupa lendir.

    Bahan yang dikumpul diuraikan oleh dua indikator, iaitu, doktor memperoleh dua hasil:

    Jawapan positif

    Analisis sputum yang dihasilkan mengesahkan kehadiran penyakit dalam badan. Yang mengesahkan ini:

    • perkara asing atau kemasukan yang tidak diketahui;
    • kehadiran gumpalan lendir;
    • garis-garis yang kelihatan;
    • bau yang tidak murni atau berjangkit;
    • nanah.

    Kaedah penyelidikan makroskopik menyediakan data lain:

    • convolutions fibrinous;
    • Pembentukan tongkat kanta koch;
    • produk daripada penguraian penguraian bahan bakteria;
    • sisa proses patologi dalam tisu paru-paru.

    Hasil positif menunjukkan peningkatan jumlah sebatian protein. Ia mencapai 100-120g / l.

    Kaedah mikroskopik lain memungkinkan untuk mengenal pasti elemen berbahaya yang lain:

    • makrofaj alveolar;
    • komposisi leukosit yang terlalu tinggi;
    • kadar limfosit yang tinggi.

    Untuk batuk kering, seseorang sering cuba meludah keluar dari mulutnya. Hemoptisis meningkatkan pembentukan sel darah merah. Jumlah air liur di mulut adalah sedemikian rupa sehingga seseorang tidak dapat menelannya tanpa melihatnya. Lebih dari pada keadaan yang sihat.

    Jawapan negatif

    Kajian menunjukkan bahawa jumlah leukosit kecil, sesuai dengan norma. Mikrobacteria juga tidak dikesan. Sekiranya pesakit berasa tidak sihat, maka pakar akan menetapkan peperiksaan tambahan. Ada kemungkinan penyakit ini dikaitkan dengan penyakit paru-paru. Jenis dan kaedah diagnostik tambahan bergantung kepada gejala dan keadaan pesakit.

    Bagaimana kajian lendir

    Tuberkulosis adalah kesan patologi berbahaya pada tisu paru-paru, pemisahan mereka diperhatikan. Analisis dilakukan dengan beberapa kaedah. Yang paling biasa - ELISA (immunoassay). Intipati kaedah:

    1. Antibodi ditambah kepada penyelesaian di mana sebahagian daripada sputum diletakkan.
    2. Semak konsentrasi antigen, berbanding dengan norma badan yang sihat.
    3. Tentukan aktiviti persekitaran patologi.
    4. Diagnosis.

    Versi kedua penyelidikan makmal adalah WASTES. Untuk kaedah mengambil peralatan perubatan khas. Intipati penyelidikan perkakasan:

    1. Di dalam mikrojekan yang disuntikkan untuk jenis jangkitan yang dimaksudkan.
    2. Radas mula berkembang pada strain bakteria tertentu.
    3. Karbon dioksida dihasilkan dalam proses, dan sensor mengambilnya.
    4. Gas menggabungkan dengan pewarna.
    5. Pada indeks pendarfluor membuat kesimpulan tentang jenis penyakit.

    Cara paling mudah adalah kebudayaan. Pankre yang ditaburkan dalam persekitaran khas. Doktor meneliti jenis-jenis koloni pembentukan mikrob. Kaedah ini adalah yang paling lama, tetapi membolehkan anda membuktikan diagnosis. Ia digunakan sangat jarang, tepat kerana jangka masa yang panjang, yang tidak selalu sesuai untuk pesakit.

    Analisis sperma pcr untuk batuk kering

    PCR adalah singkatan tindak balas rantaian polimerase istilah perubatan. Diagnostik adalah salah satu perkembangan saintis terkini. Ia dibuka pada tahun 1983, kepentingan penemuan dihargai di dunia, saintis menerima pengiktirafan tertinggi - Hadiah Nobel.

    Kaedah ini berdasarkan penggunaan kejuruteraan genetik. Fleksibilitasnya dalam keperluan untuk sedikit bahan untuk diagnosis yang tepat. Kenal pasti jangkitan dengan tuberkulosis sebenarnya adalah pada awal jangkitan, tanpa menunggu perkembangan penyakit.

    Intipati kaedah yang adalah polimerase:

    • pesakit mengambil serpihan zarah DNA;
    • menjalankan sintesis biologi bahan;
    • ditentukan oleh kelas mikroorganisma.

    Prosesnya adalah teknologi yang kompleks, ia melibatkan peperiksaan genetik molekul. PCR untuk batuk kering mengambil masa beberapa jam. Masa yang diperlukan untuk kaedah lain tidak dapat dibandingkan dengannya dengan cepat. Setelah lulus analisis, pesakit sedang menunggu pengesanan agen penyebabnya. Proses yang mendasari hanya pakar boleh difahami. Orang biasa tidak memahami selok-belok kaedah.

    Bagaimana diagnosis ujian tuberkulosis:

    1. Ambil bahan yang diperlukan untuk analisis. Apa yang boleh terjadi: darah, perut, dada, air, dicuci dengan bronchi.
    2. Jenis bahan dipilih bergantung kepada jenis jangkitan mungkin patogen.
    3. Langkah seterusnya ialah mengkaji hubungan rantai. Dua rantai tertakluk kepada suhu tinggi sehingga 98 darjah. Tahap ini disebut denaturation (pemusnahan rantai DNA struktur). Waktu pendedahan suhu - sehingga 2 minit.
    4. Peringkat seterusnya adalah penyepuhlindapan. Suhu dikurangkan, primer dibenarkan untuk menyambung kepada helai DNA.
    5. Akibatnya, pemanjangan berlaku - sintesis molekul yang diperlukan untuk proses itu.

    Untuk apa-apa analisis, peralatan khas diperlukan. Ia mahal, jadi ia tidak terdapat di mana-mana kemudahan penjagaan kesihatan. PCR dilakukan dalam kes-kes yang sukar, apabila tidak ada hasil tepat dari kaedah diagnostik konvensional, adalah mustahil untuk menjalankan kaedah instrumental untuk memeriksa keadaan pesakit.

    Kelebihan teknologi PCR:

    1. Kelajuan mendapatkan hasilnya. Kira-kira 5 jam doktor mempunyai data yang tepat. Kelajuan ini membolehkan anda membantu pesakit dalam keadaan kecemasan. Selalunya, ia adalah tempoh praoperasi.
    2. Dibenarkan apabila kaedah lain tidak boleh digunakan. Sebagai contoh, pengulangan kerap X-ray menyebabkan radiasi. PCR tidak berbahaya untuk pesakit.
    3. Anda boleh meneroka sebarang persekitaran biologi. Bentuk tuberkulosis yang rumit juga dikenalpasti.
    4. Kaedah ini selamat, oleh itu, sesuai untuk kanak-kanak.
    5. Jangkitan dikesan di mana-mana peringkat.
    6. PCR tidak membenarkan menyembunyikan walaupun sebilangan kecil pembentukan mikro bakteria.
    7. Sesuai untuk memeriksa kemungkinan berulang tuberkulosis.

    Berapa banyak analisis dahak untuk batuk kering?

    Sampel diambil lebih dari satu kali. Pengulangan tidak termasuk kemungkinan kesilapan atau mendapatkan bahan berkualiti rendah yang tidak mencerminkan kedudukan dan keadaan sebenar pesakit. Berapa kali untuk mengumpul dahak, beritahu doktor yang hadir. Pilihan terbaik adalah tiga kali sehari. Kadangkala sampel tambahan mungkin diperlukan. Dalam tempoh masa yang mereka kumpul:

    1. Sebelum makan pada waktu pagi.
    2. 3-4 jam selepas ujian pertama.
    3. Pada hari kedua juga sebelum makan.

    Tuberculosis adalah penyakit berbahaya yang boleh menjejaskan tubuh mana-mana orang. Terdapat banyak keadaan jangkitan. Dengan sebarang kecurigaan kemungkinan jangkitan, jangan menunggu gejala yang terang. Ia perlu diuji, diperiksa dan dalam masa untuk memulakan rawatan.

    Diagnosis tuberkulosis PCR

    Tuberkulosis adalah jangkitan khusus, tumpuannya mungkin dalam tisu manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronik yang rejimen rawatan yang optimum sukar dipilih. Salah satu sebab untuk ini adalah diagnosis lewat, ketika mycobacteria, ketika di dalam tubuh manusia, telah disesuaikan dengan banyak ubat.

    Apakah kaedah diagnosis moden yang ada? Diagnostik PCR - apa itu? Bagaimana kajian ini dilakukan? Dalam kes yang mana tuberkulosis didiagnosis dengan kaedah ini dan apakah intipatinya?

    Apakah diagnostik PCR?

    Ini adalah salah satu kaedah yang paling moden untuk mendiagnosis bukan sahaja penyakit, tetapi juga pengesanan bahan biologi. Diagnostik PCR dicipta baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mencadangkan skim pemulihan kompleks untuk bahan biologi mikroorganisma dalam satu segmen pendek. Terima kasih kepada penemuannya, saintis itu dianugerahkan anugerah tertinggi - Hadiah Nobel.

    Apakah itu - diagnosis PCR jangkitan? Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah diagnosis pengesanan penyakit virus, berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Ia digunakan secara meluas dalam mikrobiologi perubatan, imunologi dan virologi. Kaedah ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sedikit bahan. Jangkitan dapat dikesan secara literal pada jam pertama jangkitan dengannya, jauh sebelum gejala penyakit pertama muncul.

    Kaedah ini terdiri daripada mendapatkan dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi serpihan genom (zarah DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya untuk kelas mikroorganisma yang diperolehi daripada bahan genetik yang dimiliki melalui kaedah genetik molekul.

    Walaupun ia adalah proses yang kompleks, ia mengambil masa yang lebih sedikit daripada banyak kaedah biologi mengesan agen berjangkit. Dalam masa beberapa jam, mikroorganisma boleh dikesan oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengasingkannya dari persekitaran (darah, cecair cerebrospinal, dahak) dan membesar untuk masa yang lama pada media nutrien tiruan. Adalah cukup bahawa serpihan kecil benang DNA agen berjangkit hadir dalam bahan yang sedang dipelajari.

    Asas tindak balas adalah kemungkinan di bawah keadaan buatan (in vitro) untuk menghasilkan sintesis molekul asid nukleus agen berjangkit.

    Apa yang diperlukan untuk PCR?

    1. Primer adalah segmen DNA yang mana biosintesis atau penciptaan bermula.
    2. Nukleotida atau sebatian kompleks yang merupakan asas molekul DNA atau RNA.
    3. Tindak balas rantai polimerase tidak mungkin tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

    Tahap diagnostik PCR

    Bagaimanakah diagnosis molekul dilakukan oleh PCR? Prosedur ini mudah dan mengambil masa yang singkat, dengan mengambil kira pengumpulan bahan.

    1. Sebelum memulakan kajian, mereka mengambil bahan biologi yang diperlukan - ini adalah air basuh bronkial, darah, kandungan lambung, dahak. Jenis bahan biologi bergantung kepada patogen yang disyaki.
    2. Denaturasi atau pemusnahan struktur utama DNA, yang terdiri daripada dua rantai. Intipati tahap ini adalah untuk memisahkan dua rantai di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang tidak berlangsung lebih dari dua minit).
    3. Pada tahap berikutnya PCR, dipanggil penyepuhlindapan, suhu dikurangkan dengan beberapa darjah supaya primer akan terikat pada helai DNA.
    4. Pemanjangan, di mana sintesis molekul yang dikehendaki berlaku secara langsung.

    Akibatnya, hanya 25-30 kitaran sedemikian menerima bilangan salinan DNA mikroorganisma yang diperlukan, yang mudah dikenali.

    Adakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

    Tidak mungkin benar-benar semua orang yang disyaki menggunakan tuberkulosis untuk melakukan PCR, kerana kaedah ini memerlukan peralatan mahal. Tidak semua klinik awam mampu membelinya. Di samping itu, ia berlaku bahawa kaedah biasa mendiagnosis jangkitan dalam kebanyakan kes juga membenarkan diri mereka sendiri.

    Ini termasuk:

    • tinjauan pesakit, pengambilan sejarah;
    • pemeriksaan penuh orang itu;
    • satu kajian menggunakan ujian tuberkulin Mantoux;
    • radiografi atau fluorografi;
    • diagnostik komputer jika perlu;
    • Kaedah penyelidikan mikrobiologi: mikroskopi smear dan pemeriksaan bacteriological sputum.

    PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kes-kes khas apabila sukar untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk menjalankan kaedah instrumental lain.

    Walaupun terdapat banyak kaedah diagnostik, kejadian tuberkulosis terus berkembang. Pada masa ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga ciri-ciri lain:

    • penyakit ini sering berlaku dalam bentuk yang teruk;
    • bilangan kes maut meningkat;
    • semakin tahan terhadap kemoterapi moden didiagnosis bentuk penyakit.

    Kehadiran rakyat sendiri menjalani pemeriksaan kesihatan rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi menyebabkan penyebaran tuberkulosis. Dalam keadaan sedemikian, kita memerlukan kaedah penyelidikan yang cepat, bermaklumat dan berkesan yang boleh diakses oleh kanak-kanak dan orang dewasa. Semua kaedah diagnostik di atas adalah lebih rendah daripada PCR.

    Faedah mendiagnosis batuk kering dengan PCR

    Penyelidikan ini, walaupun baru, telah terbukti dengan baik, terutamanya dalam kes-kes kontroversi di mana mustahil untuk membuat diagnosis untuk beberapa sebab.

    Terima kasih kepada PCR, lebih mudah untuk mengesan agen penyebab tuberkulosis dalam bahan ujian.

    Kelebihan diagnostik PCR adalah seperti berikut.

    1. Ini adalah analisis cepat. Serpihan kecil molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi kecemasan ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit tuberkulosis.
    2. Analisis PCR dibenarkan dalam kes apabila kaedah lain tidak tersedia atau dilarang (untuk pengesanan tuberkulosis pulmonari, kadang-kadang anda perlu mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi dos radiasi yang besar).
    3. Dengan bantuan PCR, sebarang persekitaran biologi diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair serebrospinal, jika terdapat kecurigaan terhadap meningitis tuberkulosis.
    4. Mengizinkan diagnosis PCR penyakit berjangkit pada kanak-kanak, kerana kaedahnya selamat.
    5. Membolehkan anda mengenal pasti patogen di mana-mana peringkat penyakit ini.
    6. Kepekaan tinggi PCR memungkinkan untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis, walaupun terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam bahan biologi.
    7. Adalah baik untuk menjalankan diagnosis penyakit berulang.

    Selepas semua PCR yang dibaca seolah-olah menjadi kaedah diagnostik yang hampir sempurna, yang sepatutnya membuat setiap orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka mesti diambil kira.

    Kelemahan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

    Di zaman kita, diagnostik sedemikian lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini terdapat sebab.

    1. Ini adalah kaedah penyelidikan yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak hadir kerana kos yang tinggi, tetapi analisis masih boleh dilakukan di makmal berbayar.
    2. Sejurus selepas rawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam kuantiti yang kecil mungkin masih terdapat di dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif semasa diagnosis PCR), jadi kaedah ini tidak boleh dipercayai pada masa ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
    3. Mutasi mycobacteria mengakibatkan PCR tidak berkesan - urutan serai DNA biasa tidak dapat disintesis.
    4. Ia adalah perlu untuk memilih persekitaran yang sesuai untuk kajian ini, darah diambil hanya jika ia disyaki dijangkiti (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada persoalan tuberkulosis organ-organ sistem saraf. Dalam kes ini, PCR tidak dapat mengesan patogen dan diagnosis akan menjadi tidak diketahui.

    Petunjuk untuk mengesan batuk kering menggunakan analisis PCR

    Diagnosis tuberkulosis PCR paling kerap dilakukan dalam kes kontroversi. Bilakah doktor merujuk kajian ini?

    1. Sekiranya sukar untuk membuat diagnosis menggunakan kaedah yang sedia ada, tetapi ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
    2. Dalam kes apabila seseorang tidak dapat dihantar ke klinik untuk menjalani ujian rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksa dia menggunakan PCR, memandangkan sputum untuk ujian boleh dihantar ke dalam balang dan diagnosis disahkan dalam masa beberapa jam.
    3. Sekiranya seseorang akan menjalani operasi kecemasan dan ia perlu mengetahui sama ada dia sakit dengan tuberkulosis.
    4. Sekiranya perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa tuberkulosis menggunakan PCR, kerana kaedahnya adalah selamat.
    5. Secara berbayar, sesiapa yang belum didiagnosis dengan tuberkulosis telah disahkan menggunakan kaedah bacteriological dan fluoroscopy. Ini berlaku apabila luka di paru-paru tidak dapat dilihat dalam imej langsung, dan orang semasa penghantaran sputum untuk kajian itu tidak dapat mengikuti cadangan untuk pengumpulan bahan yang betul. Dalam kes ini, orang itu bimbang dengan semua ciri-ciri gejala batuk kering pulmonari.
    6. Apabila terdapat keraguan tentang hasil ujian Mantoux.
    7. Adalah lebih baik untuk melakukan diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak. Prosedur ini selamat, tidak membuat pendedahan radiasi tambahan, dan berkesan dalam mengesan sukar untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

    Diagnosis tuberkulosis tepat pada masanya adalah kunci kepada rawatan yang ditetapkan dengan betul dan mengurangkan penyebaran penyakit. Selalunya, kaedah pengesanan penyakit biasa tidak selalu berkesan. Oleh itu, PCR hari ini adalah salah satu cara yang paling boleh dipercayai dan selamat untuk mengesan jangkitan pada peringkat awal perkembangannya.

    Analisis PCR

    PCR (tindak balas rantai polimerase) adalah kaedah yang paling cepat dan paling dipercayai untuk mendiagnosis penyakit berjangkit.

    Prinsip kaedah tindak balas rantai polimerase telah dibangunkan oleh Kary Mullis pada tahun 1983. Untuk penemuannya, K. Mullis pada tahun 1993 menerima Hadiah Nobel dalam Kimia.

    Kaedah PCR membolehkan untuk mencapai peningkatan ketara dalam kepekatan kecil fragmen asid nukleik tertentu (DNA) dalam bahan biologi (sampel). Kaedah ini didasarkan pada pelbagai penyalinan selektif (amplifikasi) seksyen tertentu DNA menggunakan enzim di bawah keadaan buatan.

    Kelebihan kaedah diagnostik PCR sebagai kaedah diagnostik untuk penyakit berjangkit

    Pengesanan langsung patogen

    Banyak kaedah diagnostik tradisional, seperti enzim immunoassay, mengesan penanda protein yang merupakan produk aktiviti penting agen berjangkit, yang memberikan bukti tidak langsung tentang kehadiran jangkitan. Pengenalpastian rantaian DNA patogen spesifik oleh kaedah PCR memberikan petunjuk langsung kehadiran patogen.

    Kekhususan yang tinggi

    Kekhususan tinggi dari kaedah PCR adalah disebabkan oleh fakta bahawa pecahan DNA unik dikesan dalam bahan di bawah kajian. Kekhususan ditentukan oleh urutan nukleotida primer, yang tidak termasuk kemungkinan mendapatkan hasil palsu, berbanding kaedah analisis imunologi, di mana kesilapan yang berkaitan dengan antigen balas bertindak balas adalah kerap.

    Kepekaan yang tinggi

    Kaedah PCR membolehkan untuk mengesan sel tunggal bakteria atau virus. Analisis PCR mendedahkan kehadiran patogen penyakit berjangkit dalam kes di mana kaedah lain (imunologi, bakteriologi, mikroskopik) tidak dapat melakukan ini. Kepekaan analisis PCR adalah 10-100 sel setiap sampel (sensitiviti ujian imunologi dan mikroskopik adalah 103-105 sel).

    Universaliti prosedur untuk mengesan pelbagai patogen

    Bahan untuk kajian oleh PCR adalah DNA patogen. Kaedah ini didasarkan pada pengesanan fragmen DNA atau RNA yang khusus untuk organisma tertentu. Kesamaan komposisi kimia semua asid nukleik membolehkan penggunaan kaedah penyelidikan makmal bersatu. Ini memungkinkan untuk mendiagnosis beberapa patogen daripada satu bioassay.

    Kadar hasil analisis yang tinggi

    Untuk analisis PCR, pengasingan dan penanaman budaya patogen tidak diperlukan, yang memerlukan banyak masa. Kaedah terpadu pemprosesan biomaterial dan pengesanan produk tindak balas dan proses penguatkuasaan automasi memungkinkan untuk menjalankan analisis lengkap dalam 4-5 jam.

    Keupayaan untuk mendiagnosis bukan sahaja jangkitan akut tetapi juga laten

    Kaedah PCR sangat berkesan untuk mendiagnosis bentuk-bentuk mikroorganisma yang sukar ditanam, tidak ditanam dan berterusan yang sering dijumpai dalam jangkitan laten dan kronik, kerana kaedah ini mengelakkan kesulitan yang berkaitan dengan pertumbuhan mikroorganisma seperti di makmal. Penggunaan diagnostik PCR juga sangat berkesan terhadap patogen yang mempunyai variasi antigenik tinggi dan parasit intrasel.

    Seberapa berkesan pengujian dahak untuk tuberkulosis oleh PCR?

    Untuk mengenalpasti batang Koch pada manusia, kaedah diagnostik yang berbeza digunakan. Terima kasih kepadanya, patologi itu dapat dikesan walaupun di peringkat awal, yang meningkatkan peluang pesakit untuk pemulihan. Analisis sputum untuk tuberkulosis adalah teknik yang paling dihargai dan agak berkesan. Apakah itu dan sejauh manakah kos analisis tersebut?

    Apakah analisis kuman oleh PCR?

    PCR bermaksud tindak balas rantai polimerase. Kaedah ini berkesan terhadap penyakit berjangkit. Untuk menubuhkan diagnosis yang jelas, anda tidak perlu mengumpul sejumlah besar biomaterial dan menunggu masa yang lama, seperti dalam hal penebaran sputum.

    Kaedah ini didasarkan pada mendapatkan DNA zarah mikroorganisma. Selanjutnya, penyelidikan genetik molekul akan menentukan jenis mikroorganisma yang seharusnya termasuk bahan yang ada. Di bawah keadaan tiub ujian, pakar akan mensintesis molekul bakteria dan membuat kesimpulan yang sesuai dalam beberapa jam.

    Keberkesanan

    Analisis sputum untuk Mycobacterium tuberculosis adalah berkesan apabila tongkat Koch telah melanda sistem pernafasan. Dalam kes ini, penyakit ini dapat dikenal pasti dengan mudah, walaupun pada jam pertama jangkitan.

    Tetapi, analisis dahak tidak akan menunjukkan hasil yang boleh dipercayai jika tuberkulosis hadir:

    • tulang;
    • otak, saraf tunjang;
    • sistem saraf;
    • sendi, dsb.

    Phthisiatrician akan dapat menentukan jenis penyakit, dengan mengambil kira gejala-gejala sekarang dan bergantung pada hasil analisis umum dan lain-lain.

    Ia juga tidak sesuai untuk kaedah penyelidikan sedemikian apabila anda perlu menjalankan analisis kawalan selepas rawatan terapeutik penyakit ini. Hasilnya akan positif, seperti dalam tubuh, dalam apa jua keadaan, masih ada IBC hidup atau mati. Adalah lebih baik untuk memberi keutamaan kepada prosedur diagnostik yang lain.

    Kontra dengan kaedah ini

    Oleh itu, tidak ada contraindications untuk ujian dada untuk batuk kering menggunakan PCR. Terdapat batasan. Seperti yang disebutkan di atas, tidak perlu melakukan itu selepas rawatan batuk kering. Hasilnya tidak berguna. Di sini adalah wajar untuk menggunakan diagnosis yang berbeza.

    Di samping itu, tiada halangan lain untuk diagnosis ini. Sputum boleh diperiksa dalam kategori umur dan untuk sebarang penyakit yang berkaitan. Sekalipun tidak terdapat pembebasan dahak yang berlimpah, analisis dapat dilakukan dengan mengambil lendir menggunakan bronkoskopi.

    Faedah

    Dalam kaedah ini, jisim plus, ini termasuk:

    1. Kepelbagaian dan kepekaan yang tinggi. Hanya agen penyebab tuberkulosis dikesan. Tidak boleh ada jawapan palsu jika semua nuansa prosedur itu diambil kira. Mycobacteria dikesan walaupun nombor minimum mereka. Walaupun terdapat 10 sel yang tidak normal dalam bahan yang dikumpul, jangkitan akan dikesan.
    2. Kelajuan mendapat jawapan. Berapa banyak analisis yang dilakukan? Selepas 3-5 jam, anda boleh mendapatkan hasilnya. Tidak perlu melakukan budaya dahak untuk tuberkulosis, dan ini mengurangkan masa.
    3. Anda boleh mengenal pasti sebagai jangkitan tersembunyi, dan yang dalam bentuk akut.
    4. Tiada contraindications mutlak. Ini memungkinkan untuk melaksanakan prosedur untuk semua orang tanpa pengecualian (walaupun untuk kanak-kanak kecil), dan terutama apabila kaedah lain tidak dapat diselesaikan.
    5. Dengan bantuan diagnostik PCR, pelbagai biomaterial (air kencing, najis, darah, air liur, cecair cerebrospinal, dll) dipelajari.
    6. Kaedah mendedahkan tuberkulosis pada peringkat awal, pada jam pertama selepas jangkitan.
    kepada kandungan ↑

    Kelemahan

    Selain sisi positif, ada juga yang negatif. Ini adalah:

    1. Analisis PCR adalah "keseronokan" yang mahal. Di samping itu, peralatan yang diperlukan untuk pelaksanaannya tidak terdapat di setiap pusat perubatan. Di klinik, jarang terdapat, kerana nilainya juga hebat. Jika kita bercakap mengenai klinik swasta, maka ya, anda boleh mencari diagnosis jenis ini. Biarkan dirinya, sayangnya, tidak boleh semua orang.
    2. Ia menunjukkan hasil positif yang salah pada orang-orang yang baru-baru ini menjalani rawatan tuberkulosis.
    3. Sekiranya MBC bermutasi, kaedah ini juga boleh memberikan hasil palsu.
    4. Sekiranya bahan dikumpulkan dengan tidak betul, atau pakar yang menjalankan penyelidikan tidak mempunyai tahap kelayakan, maka kemungkinan kerosakan juga mungkin. Dalam beberapa kes, prosedur itu perlu diulang beberapa kali dan setiap kali pembayaran diulang.
    kepada kandungan ↑

    Penyediaan untuk analisis

    Agar bahan menjadi berkualiti tinggi, mestilah dipasang dengan betul dan bersedia untuknya dengan betul.

    Ada peraturan tertentu untuk mengumpul dahak untuk tuberkulosis. Algoritma tindakan adalah seperti berikut:

    1. Walaupun pada waktu malam, pada waktu petang seseorang perlu minum ekspektoran (jika dahak bergerak buruk). Walaupun ia tidak membantu, penyedutan harus dilakukan berdasarkan ubat pengedaran dan ekspektoran ubat. Sekiranya tiada sputum, pesakit disasarkan kepada bronkoskopi. Ia adalah semasa prosedur ini diambil bahan untuk kajian ini.
    2. Beli bekas khas terlebih dahulu. Ia steril dan kedap udara, jadi tidak ada tambahan yang boleh diletakkan di sana, serta dibuka terlebih dahulu.
    3. Bilik di mana kuman akan dikumpulkan harus berventilasi dengan baik. Ia perlu membuka tingkap, pintu, menghidupkan tudung. Satu lagi pilihan yang baik adalah untuk mendapatkan udara segar (misalnya, ke balkoni atau ke halaman).
    4. Seketika sebelum prosedur, anda perlu memberi amaran kepada semua orang agar tiada sesiapa memasuki bilik di mana segala-galanya akan berlaku. Tidak perlu ada mikrofon tambahan dalam biomaterial - ini penting.
    5. Makan sebelum memilih tidak digalakkan.
    6. Mulut dan tekak dibilas.
    7. Air liur meludah. Kapasitinya harus jatuh minimum.
    8. Dengan batuk, seseorang mengambil tongos keluar dan meludah ke dalam bekas yang disediakan. Selepas prosedur, tutup penutup dengan ketat dan ambil sampel ke makmal.

    Cara mengumpul dahak harus memberitahu doktor. Sekiranya pesakit tidak berani melakukannya sendiri, maka pekerja kesihatan datang untuk menyelamatkannya. Semasa manipulasi, mereka memakai topeng pelindung khas. Kumpulkan sputum akan berada di bilik khas, di mana tidak ada cara untuk orang asing. Jika pesakit tidak dapat datang ke klinik, pakar datang ke rumahnya dan membantu mengumpul lendir.

    Jika bronkoskopi dilakukan, pesakit disuntik ke dalam trakea dengan peranti - bronkoskop. Ia adalah dengan bantuannya bahawa bahan itu diambil.

    Untuk kebolehpercayaan, disarankan untuk lulus analisis tiga kali, iaitu:

    • pada waktu pagi di perut kosong;
    • selepas pertama kali selepas 4-5 jam;
    • 24 jam selepas kajian pertama dan juga sebelum makan.
    kepada kandungan ↑

    Bagaimana analisis ini dilakukan?

    Melalui ujian sputum untuk tuberkulosis hanya sebahagian daripada pekerjaan. Utama di hadapan. Banyak bergantung pada bagaimana mempersiapkan pakar.

    Kursus kajian ini adalah seperti berikut:

    1. Pakar ini meneruskan pemusnahan struktur utama DNA (denaturation). Terdapat dua rantai di sini. Pada suhu tinggi, mereka dipisahkan.
    2. Pada peringkat seterusnya, suhu dikurangkan (anil). Ini adalah perlu untuk sambungan sambungan DNA dengan primer.
    3. Peringkat ketiga adalah pemanjangan. Di sini, molekul-molekul yang diperlukan disintesis.
    kepada kandungan ↑

    Keputusan penyahkodan

    Mycobacterium tuberculosis dalam dada oleh PCR boleh dikesan atau tidak. Hasil positif adalah berdasarkan hakikat bahawa terdapat Koch melekat DNA dalam biomaterial. Ini menunjukkan bahawa orang itu dijangkiti. Dengan negatif - 98% hakikat bahawa subjek tidak dijangkiti.

    Petunjuk boleh diadili pada:

    • fasa patologi (laten atau aktif);
    • berapa banyak badan terjejas;
    • sama ada rawatan yang dipilih adalah berkesan dalam kes tertentu.

    Perlu diingat bahawa tiada apa-apa yang menyeluruh. Oleh itu, mungkin terdapat hasil positif palsu atau palsu. Untuk memastikan ketepatannya, prosedur diagnostik lain disyorkan atau PCR dilakukan dua kali (tiga kali).

    Analisis kos di pusat-pusat yang berbeza

    Anda boleh memberi dahaga untuk PCR di klinik yang berbeza. Marilah kita memberi contoh beberapa pusat Moscow yang popular dengan dasar harga.

    Analisis dahak PCR untuk batuk kering

    Mycobacterium tuberculosis (tuberkulosis), DNA (PCR), berkualiti tinggi, dahagakan

    Penyediaan pelajaran khusus tidak diperlukan.

    Bahan ujian: Sputum

    Tuberkulosis (dari tuberculum Latin - "tubercle") adalah penyakit berjangkit spesifik manusia dan haiwan, yang disebarkan terutamanya oleh titisan udara. Risiko jangkitan meningkat berikutan penurunan imuniti yang disebabkan oleh HIV / AIDS, penyakit ginjal kronik, diabetes, kehamilan, penuaan, pemindahan organ, dan ubat penahan imun yang berkaitan. Di samping itu, kanak-kanak di bawah 5 tahun selepas ujian tuberkulin berpaling dan mereka yang mempunyai hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis lebih terdedah kepada penyakit ini. Kumpulan yang paling rentan termasuk tahanan, tahanan, penagih dadah, dan orang tua.

    Tuberkulosis manusia dan haiwan menyebabkan beberapa spesies mycobacteria yang berkait rapat. Ejen penyebab tuberkulosis yang paling umum pada manusia adalah spesis Mycobacterium tuberculosis.

    Selepas mengenal pasti agen penyebab tuberkulosis, adalah perlu untuk menjalankan tinjauan mengenai kepekaan mikobakteria yang dikesan untuk ubat-ubatan anti-TB. Prosedur ini sangat penting untuk pelantikan rawatan yang mencukupi penyakit ini.

    Analisis ini membolehkan untuk menentukan kehadiran bahan genetik (DNA) mycobacterium tuberculosis dalam dahak. Analisis ini membantu dalam diagnosis tuberkulosis pulmonari.

    Kaedah PCR adalah tindak balas rantai polimerase, yang membolehkan mengenal pasti kehadiran bahan genetik dalam bahan biologi.
    Maklumat lanjut mengenai kaedah PCR - jenis, kelebihan dan aplikasi dalam diagnostik perubatan.

    Nilai Rujukan - Norm
    (Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis), DNA (PCR), kualitatif, dahak)

    Maklumat mengenai nilai rujukan indikator, serta komposisi penunjuk yang termasuk dalam analisis mungkin berbeza sedikit bergantung kepada makmal!

    Biasanya, mycobacterium tuberculosis DNA tidak hadir di dalam dahak.

    No. 341MK, Mycobacterium tuberculosis, penentuan DNA (Mycobacterium tuberculosis, DNA) dalam kuman, mencuci, cecair lavage

    Penentuan DNA patogen tuberkulosis: Mycobacterium complex: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum dalam sputum, pencucian dari bronkus, cairan lavage oleh kaedah reaksi rantai polimerase (PCR) masa.

    Tuberculosis (dari Latin Tuberculum - tubercle) - penyakit manusia yang bergantung kepada sosial. Mereka sakit dan haiwan. Ejen penyebab tuberkulosis ditemui oleh R. Koch pada tahun 1882. Ini adalah bakteria aerobik yang tahan asid (74 spesies) daripada mycobacterium genus, yang tersebar luas dalam tanah, air, dan haiwan. Pada manusia, patogen yang paling biasa ialah Mycobacterium tuberculosis. Yang paling kerap kali ialah Mycobacterium bovis. Kedua-dua spesies ini sangat tahan terhadap banyak faktor persekitaran, dan kekal berdaya maju dalam tubuh untuk masa yang lama dan boleh menyebabkan penyakit bertahun-tahun selepas jangkitan. Adalah sangat penting bahawa mycobacterium tuberculosis boleh membentuk bentuk L yang dipanggil. Berterusan dalam badan, mereka membuat kekebalan tuberkulosis. Untuk masa yang lama, tuberkulosis boleh berlaku secara laten dan dapat dikesan secara kebetulan, walaupun gejala seperti kelemahan, keletihan, demam rendah, berpeluh malam, dan anemia dan leukopenia sering kali diwujudkan.

    Pada masa ini, walaupun semua pencapaian terapi antimikrobial, tuberkulosis mengancam masa depan negara. Oleh itu, semua kaedah diagnostik, terutamanya bentuk latennya sangat penting.

    Terdapat banyak kaedah diagnosis makmal tuberkulosis: mikroskopi smear (yang paling sering digunakan untuk sputum ini), kaedah budaya klasik, ELISA. Mereka semua mempunyai kelebihan, tetapi juga kekurangan tertentu, khususnya, pengesanan mikobakteria hanya dalam hal jumlah yang mencukupi.

    Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, tindak balas rantai polimerase (PCR) telah digunakan untuk diagnosis. Kepekaan yang tinggi membolehkan mengesan sel tunggal dan juga serpihan DNA dalam bahan di bawah kajian. Kaedah menghilangkan tindak balas balas dan kekhususan mencapai 100%. PCR membenarkan pembezaan bentuk tuberkulosis yang terhad dan tersebar, terutama pada kanak-kanak, walaupun dengan keputusan negatif kajian mikrobiologi.

    Penunjuk analitik:

    • serpihan yang dapat dikesan - bahagian spesifik DNA mycobacterial;
    • kekhususan penentuan - 100%;
    • sensitiviti pengesanan - 100 salinan DNA mikobakteria dalam sampel.
    • Bronkitis, bronkopneumonia disertai oleh peningkatan tajam dalam nod limfa basal.
    • Hemoptisis pada latar belakang keadaan asthenik biasa.
    • Keradangan akut saluran pernafasan atas dan bawah, disertai batuk yang produktif dengan adanya hubungan yang berpanjangan dengan pesakit dengan tuberkulosis dalam sejarah

    Tafsiran hasil penyelidikan mengandungi maklumat untuk doktor yang menghadiri dan bukan diagnosis. Maklumat dalam bahagian ini tidak boleh digunakan untuk diagnosis diri dan rawatan diri. Diagnosis yang tepat dibuat oleh doktor, menggunakan kedua-dua hasil peperiksaan ini dan maklumat yang diperlukan dari sumber-sumber lain: anamnesis, hasil peperiksaan lain, dsb.

    Kualiti ujian. Hasilnya diberikan dari segi "dikesan" atau "tidak dikesan."

    "Dikesan": Serpihan DNA spesifik Mycobacterium yang spesifik untuk mikobakteria didapati dalam sampel untuk dianalisis.

    "Tidak dikesan": dalam sampel yang dianalisis, serpihan DNA mycobacterium yang khusus atau kepekatan patogen dalam sampel tidak didapati di bawah had kepekaan ujian.

    Perhatikan, bahawa masa kajian PCR boleh ditingkatkan apabila menjalankan ujian pengesahan.

    1. Makarevich A.E. Penyakit Pernafasan - M. Higher School, 2000. - 368 p.
    2. Jacobs D. et al. Buku panduan ujian makmal / Lexi-Comp./2002 - hlm. 828 - 829.
    • Maklumat am

    * Tempoh yang ditentukan tidak termasuk hari pengambilan biomaterial

    Sputum, swab, cecair lavage

    Pengesanan PCR masa nyata.

    Dalam bahagian ini, anda boleh mengetahui berapa banyak kos untuk menyelesaikan kajian ini di bandar anda, lihat penerangan ujian dan jadual tafsiran hasil. Memilih di mana untuk lulus analisis "Mycobacterium tuberculosis, penentuan DNA (Mycobacterium tuberculosis, DNA) dalam kuman, cuci, cecair lavage" di Moscow dan bandar-bandar lain di Rusia, jangan lupa bahawa harga analisis, kos mengambil biomaterial, kaedah dan masa penyelidikan Pejabat perubatan serantau mungkin berbeza-beza.

    Kaedah untuk ujian sputum untuk batuk kering

    Analisis sputum untuk tuberkulosis dimasukkan dalam set langkah diagnostik yang diperlukan untuk mengenal pasti dan menjelaskan diagnosis. Kandungan sputum akan membantu membuat rejimen rawatan yang kompeten.

    Bagaimana untuk melepasi ujian dahak untuk tuberkulosis

    Doktor telah membuat peraturan untuk mengambil analisis. Air liur dikumpulkan pada waktu pagi, sebelum orang itu telah sarapan pagi. Pertama, pesakit melakukan prosedur kebersihan:

    • pembersihan enamel gigi;
    • bilas dengan air bersih rongga mulut dan pharynx.

    Kemudian memulakan penyerahan segera bahan untuk analisis. Bagaimana untuk lulus ujian dada? Keperluan untuk prosedur:

    1. Persediaan bermula lebih awal, pada waktu petang. Pesakit digalakkan mengambil ubat khas yang akan membuat rembesan pulmonari lebih semula jadi. Ini adalah ekspektoran dan penipisan sebatian. Jika prosedur sedemikian tidak membantu, lakukan penyedutan dengan komposisi farmaseutikal untuk pendedahan.
    2. Sediakan bekas untuk dahagakan. Mucus perlu dikumpulkan dalam hidangan steril, tutup rapat, ketat.
    3. Sebelum bersalin, batuk dan meludah dalam bekas. Jumlah air liur tidak boleh besar, ia memerlukan dahak dari laring. Bakteria rongga mulut adalah luaran dalam analisis.
    4. Kumpulkan air liur di dalam bilik dengan pengudaraan yang sangat baik. Analisis dilakukan dengan membuka transom, menjalankan hud. Adalah dinasihatkan untuk membuka tingkap, atau keluar ke udara segar.

    Semasa prosedur di dalam bilik dilarang masuk. Orang luar boleh menyumbang kepada mikroflora pejabat, dan dengan itu, untuk pembedahan, pembentukan patologi. Pekerja perubatan menerima analisis dalam topeng khas (respirator).

    Analisis sputum untuk transkrip tuberkulosis

    Pengekodan bermula dengan melihat rupa lendir. Patologi mencirikan perubahan warna - menjadi gelap, dengan penambahan darah yang jelas. Warna bukan penunjuk utama. Sputum menjadi gelap dari minum wain merah, semangat kopi. Sesetengah ubat dan minuman berwarna mengubah rupa lendir.

    Bahan yang dikumpul diuraikan oleh dua indikator, iaitu, doktor memperoleh dua hasil:

    Jawapan positif

    Analisis sputum yang dihasilkan mengesahkan kehadiran penyakit dalam badan. Yang mengesahkan ini:

    • perkara asing atau kemasukan yang tidak diketahui;
    • kehadiran gumpalan lendir;
    • garis-garis yang kelihatan;
    • bau yang tidak murni atau berjangkit;
    • nanah.

    Kaedah penyelidikan makroskopik menyediakan data lain:

    • convolutions fibrinous;
    • Pembentukan tongkat kanta koch;
    • produk daripada penguraian penguraian bahan bakteria;
    • sisa proses patologi dalam tisu paru-paru.

    Hasil positif menunjukkan peningkatan jumlah sebatian protein. Ia mencapai 100-120g / l.

    Kaedah mikroskopik lain memungkinkan untuk mengenal pasti elemen berbahaya yang lain:

    • makrofaj alveolar;
    • komposisi leukosit yang terlalu tinggi;
    • kadar limfosit yang tinggi.

    Untuk batuk kering, seseorang sering cuba meludah keluar dari mulutnya. Hemoptisis meningkatkan pembentukan sel darah merah. Jumlah air liur di mulut adalah sedemikian rupa sehingga seseorang tidak dapat menelannya tanpa melihatnya. Lebih dari pada keadaan yang sihat.

    Jawapan negatif

    Kajian menunjukkan bahawa jumlah leukosit kecil, sesuai dengan norma. Mikrobacteria juga tidak dikesan. Sekiranya pesakit berasa tidak sihat, maka pakar akan menetapkan peperiksaan tambahan. Ada kemungkinan penyakit ini dikaitkan dengan penyakit paru-paru. Jenis dan kaedah diagnostik tambahan bergantung kepada gejala dan keadaan pesakit.

    Bagaimana kajian lendir

    Tuberkulosis adalah kesan patologi berbahaya pada tisu paru-paru, pemisahan mereka diperhatikan. Analisis dilakukan dengan beberapa kaedah. Yang paling biasa - ELISA (immunoassay). Intipati kaedah:

    1. Antibodi ditambah kepada penyelesaian di mana sebahagian daripada sputum diletakkan.
    2. Semak konsentrasi antigen, berbanding dengan norma badan yang sihat.
    3. Tentukan aktiviti persekitaran patologi.
    4. Diagnosis.

    Versi kedua penyelidikan makmal adalah WASTES. Untuk kaedah mengambil peralatan perubatan khas. Intipati penyelidikan perkakasan:

    1. Di dalam mikrojekan yang disuntikkan untuk jenis jangkitan yang dimaksudkan.
    2. Radas mula berkembang pada strain bakteria tertentu.
    3. Karbon dioksida dihasilkan dalam proses, dan sensor mengambilnya.
    4. Gas menggabungkan dengan pewarna.
    5. Pada indeks pendarfluor membuat kesimpulan tentang jenis penyakit.

    Cara paling mudah adalah kebudayaan. Pankre yang ditaburkan dalam persekitaran khas. Doktor meneliti jenis-jenis koloni pembentukan mikrob. Kaedah ini adalah yang paling lama, tetapi membolehkan anda membuktikan diagnosis. Ia digunakan sangat jarang, tepat kerana jangka masa yang panjang, yang tidak selalu sesuai untuk pesakit.

    Analisis sperma pcr untuk batuk kering

    PCR adalah singkatan tindak balas rantaian polimerase istilah perubatan. Diagnostik adalah salah satu perkembangan saintis terkini. Ia dibuka pada tahun 1983, kepentingan penemuan dihargai di dunia, saintis menerima pengiktirafan tertinggi - Hadiah Nobel.

    Kaedah ini berdasarkan penggunaan kejuruteraan genetik. Fleksibilitasnya dalam keperluan untuk sedikit bahan untuk diagnosis yang tepat. Kenal pasti jangkitan dengan tuberkulosis sebenarnya adalah pada awal jangkitan, tanpa menunggu perkembangan penyakit.

    Intipati kaedah yang adalah polimerase:

    • pesakit mengambil serpihan zarah DNA;
    • menjalankan sintesis biologi bahan;
    • ditentukan oleh kelas mikroorganisma.

    Prosesnya adalah teknologi yang kompleks, ia melibatkan peperiksaan genetik molekul. PCR untuk batuk kering mengambil masa beberapa jam. Masa yang diperlukan untuk kaedah lain tidak dapat dibandingkan dengannya dengan cepat. Setelah lulus analisis, pesakit sedang menunggu pengesanan agen penyebabnya. Proses yang mendasari hanya pakar boleh difahami. Orang biasa tidak memahami selok-belok kaedah.

    Bagaimana diagnosis ujian tuberkulosis:

    1. Ambil bahan yang diperlukan untuk analisis. Apa yang boleh terjadi: darah, perut, dada, air, dicuci dengan bronchi.
    2. Jenis bahan dipilih bergantung kepada jenis jangkitan mungkin patogen.
    3. Langkah seterusnya ialah mengkaji hubungan rantai. Dua rantai tertakluk kepada suhu tinggi sehingga 98 darjah. Tahap ini disebut denaturation (pemusnahan rantai DNA struktur). Waktu pendedahan suhu - sehingga 2 minit.
    4. Peringkat seterusnya adalah penyepuhlindapan. Suhu dikurangkan, primer dibenarkan untuk menyambung kepada helai DNA.
    5. Akibatnya, pemanjangan berlaku - sintesis molekul yang diperlukan untuk proses itu.

    Untuk apa-apa analisis, peralatan khas diperlukan. Ia mahal, jadi ia tidak terdapat di mana-mana kemudahan penjagaan kesihatan. PCR dilakukan dalam kes-kes yang sukar, apabila tidak ada hasil tepat dari kaedah diagnostik konvensional, adalah mustahil untuk menjalankan kaedah instrumental untuk memeriksa keadaan pesakit.

    Kelebihan teknologi PCR:

    1. Kelajuan mendapatkan hasilnya. Kira-kira 5 jam doktor mempunyai data yang tepat. Kelajuan ini membolehkan anda membantu pesakit dalam keadaan kecemasan. Selalunya, ia adalah tempoh praoperasi.
    2. Dibenarkan apabila kaedah lain tidak boleh digunakan. Sebagai contoh, pengulangan kerap X-ray menyebabkan radiasi. PCR tidak berbahaya untuk pesakit.
    3. Anda boleh meneroka sebarang persekitaran biologi. Bentuk tuberkulosis yang rumit juga dikenalpasti.
    4. Kaedah ini selamat, oleh itu, sesuai untuk kanak-kanak.
    5. Jangkitan dikesan di mana-mana peringkat.
    6. PCR tidak membenarkan menyembunyikan walaupun sebilangan kecil pembentukan mikro bakteria.
    7. Sesuai untuk memeriksa kemungkinan berulang tuberkulosis.

    Berapa banyak analisis dahak untuk batuk kering?

    Sampel diambil lebih dari satu kali. Pengulangan tidak termasuk kemungkinan kesilapan atau mendapatkan bahan berkualiti rendah yang tidak mencerminkan kedudukan dan keadaan sebenar pesakit. Berapa kali untuk mengumpul dahak, beritahu doktor yang hadir. Pilihan terbaik adalah tiga kali sehari. Kadangkala sampel tambahan mungkin diperlukan. Dalam tempoh masa yang mereka kumpul:

    1. Sebelum makan pada waktu pagi.
    2. 3-4 jam selepas ujian pertama.
    3. Pada hari kedua juga sebelum makan.

    Tuberculosis adalah penyakit berbahaya yang boleh menjejaskan tubuh mana-mana orang. Terdapat banyak keadaan jangkitan. Dengan sebarang kecurigaan kemungkinan jangkitan, jangan menunggu gejala yang terang. Ia perlu diuji, diperiksa dan dalam masa untuk memulakan rawatan.

    Diagnosis tuberkulosis PCR

    Tuberkulosis adalah jangkitan khusus, tumpuannya mungkin dalam tisu manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronik yang rejimen rawatan yang optimum sukar dipilih. Salah satu sebab untuk ini adalah diagnosis lewat, ketika mycobacteria, ketika di dalam tubuh manusia, telah disesuaikan dengan banyak ubat.

    Apakah kaedah diagnosis moden yang ada? Diagnostik PCR - apa itu? Bagaimana kajian ini dilakukan? Dalam kes yang mana tuberkulosis didiagnosis dengan kaedah ini dan apakah intipatinya?

    Apakah diagnostik PCR?

    Ini adalah salah satu kaedah yang paling moden untuk mendiagnosis bukan sahaja penyakit, tetapi juga pengesanan bahan biologi. Diagnostik PCR dicipta baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mencadangkan skim pemulihan kompleks untuk bahan biologi mikroorganisma dalam satu segmen pendek. Terima kasih kepada penemuannya, saintis itu dianugerahkan anugerah tertinggi - Hadiah Nobel.

    Apakah itu - diagnosis PCR jangkitan? Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah diagnosis pengesanan penyakit virus, berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Ia digunakan secara meluas dalam mikrobiologi perubatan, imunologi dan virologi. Kaedah ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sedikit bahan. Jangkitan dapat dikesan secara literal pada jam pertama jangkitan dengannya, jauh sebelum gejala penyakit pertama muncul.

    Kaedah ini terdiri daripada mendapatkan dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi serpihan genom (zarah DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya untuk kelas mikroorganisma yang diperolehi daripada bahan genetik yang dimiliki melalui kaedah genetik molekul.

    Walaupun ia adalah proses yang kompleks, ia mengambil masa yang lebih sedikit daripada banyak kaedah biologi mengesan agen berjangkit. Dalam masa beberapa jam, mikroorganisma boleh dikesan oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengasingkannya dari persekitaran (darah, cecair cerebrospinal, dahak) dan membesar untuk masa yang lama pada media nutrien tiruan. Adalah cukup bahawa serpihan kecil benang DNA agen berjangkit hadir dalam bahan yang sedang dipelajari.

    Asas tindak balas adalah kemungkinan di bawah keadaan buatan (in vitro) untuk menghasilkan sintesis molekul asid nukleus agen berjangkit.

    Apa yang diperlukan untuk PCR?

    1. Primer adalah segmen DNA yang mana biosintesis atau penciptaan bermula.
    2. Nukleotida atau sebatian kompleks yang merupakan asas molekul DNA atau RNA.
    3. Tindak balas rantai polimerase tidak mungkin tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

    Tahap diagnostik PCR

    Bagaimanakah diagnosis molekul dilakukan oleh PCR? Prosedur ini mudah dan mengambil masa yang singkat, dengan mengambil kira pengumpulan bahan.

    1. Sebelum memulakan kajian, mereka mengambil bahan biologi yang diperlukan - ini adalah air basuh bronkial, darah, kandungan lambung, dahak. Jenis bahan biologi bergantung kepada patogen yang disyaki.
    2. Denaturasi atau pemusnahan struktur utama DNA, yang terdiri daripada dua rantai. Intipati tahap ini adalah untuk memisahkan dua rantai di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang tidak berlangsung lebih dari dua minit).
    3. Pada tahap berikutnya PCR, dipanggil penyepuhlindapan, suhu dikurangkan dengan beberapa darjah supaya primer akan terikat pada helai DNA.
    4. Pemanjangan, di mana sintesis molekul yang dikehendaki berlaku secara langsung.

    Akibatnya, hanya 25-30 kitaran sedemikian menerima bilangan salinan DNA mikroorganisma yang diperlukan, yang mudah dikenali.

    Adakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

    Tidak mungkin benar-benar semua orang yang disyaki menggunakan tuberkulosis untuk melakukan PCR, kerana kaedah ini memerlukan peralatan mahal. Tidak semua klinik awam mampu membelinya. Di samping itu, ia berlaku bahawa kaedah biasa mendiagnosis jangkitan dalam kebanyakan kes juga membenarkan diri mereka sendiri.

    Ini termasuk:

    • tinjauan pesakit, pengambilan sejarah;
    • pemeriksaan penuh orang itu;
    • satu kajian menggunakan ujian tuberkulin Mantoux;
    • radiografi atau fluorografi;
    • diagnostik komputer jika perlu;
    • Kaedah penyelidikan mikrobiologi: mikroskopi smear dan pemeriksaan bacteriological sputum.

    PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kes-kes khas apabila sukar untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk menjalankan kaedah instrumental lain.

    Walaupun terdapat banyak kaedah diagnostik, kejadian tuberkulosis terus berkembang. Pada masa ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga ciri-ciri lain:

    • penyakit ini sering berlaku dalam bentuk yang teruk;
    • bilangan kes maut meningkat;
    • semakin tahan terhadap kemoterapi moden didiagnosis bentuk penyakit.

    Kehadiran rakyat sendiri menjalani pemeriksaan kesihatan rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi menyebabkan penyebaran tuberkulosis. Dalam keadaan sedemikian, kita memerlukan kaedah penyelidikan yang cepat, bermaklumat dan berkesan yang boleh diakses oleh kanak-kanak dan orang dewasa. Semua kaedah diagnostik di atas adalah lebih rendah daripada PCR.

    Faedah mendiagnosis batuk kering dengan PCR

    Penyelidikan ini, walaupun baru, telah terbukti dengan baik, terutamanya dalam kes-kes kontroversi di mana mustahil untuk membuat diagnosis untuk beberapa sebab.

    Terima kasih kepada PCR, lebih mudah untuk mengesan agen penyebab tuberkulosis dalam bahan ujian.

    Kelebihan diagnostik PCR adalah seperti berikut.

    1. Ini adalah analisis cepat. Serpihan kecil molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi kecemasan ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit tuberkulosis.
    2. Analisis PCR dibenarkan dalam kes apabila kaedah lain tidak tersedia atau dilarang (untuk pengesanan tuberkulosis pulmonari, kadang-kadang anda perlu mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi dos radiasi yang besar).
    3. Dengan bantuan PCR, sebarang persekitaran biologi diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair serebrospinal, jika terdapat kecurigaan terhadap meningitis tuberkulosis.
    4. Mengizinkan diagnosis PCR penyakit berjangkit pada kanak-kanak, kerana kaedahnya selamat.
    5. Membolehkan anda mengenal pasti patogen di mana-mana peringkat penyakit ini.
    6. Kepekaan tinggi PCR memungkinkan untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis, walaupun terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam bahan biologi.
    7. Adalah baik untuk menjalankan diagnosis penyakit berulang.

    Selepas semua PCR yang dibaca seolah-olah menjadi kaedah diagnostik yang hampir sempurna, yang sepatutnya membuat setiap orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka mesti diambil kira.

    Kelemahan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

    Di zaman kita, diagnostik sedemikian lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini terdapat sebab.

    1. Ini adalah kaedah penyelidikan yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak hadir kerana kos yang tinggi, tetapi analisis masih boleh dilakukan di makmal berbayar.
    2. Sejurus selepas rawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam kuantiti yang kecil mungkin masih terdapat di dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif semasa diagnosis PCR), jadi kaedah ini tidak boleh dipercayai pada masa ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
    3. Mutasi mycobacteria mengakibatkan PCR tidak berkesan - urutan serai DNA biasa tidak dapat disintesis.
    4. Ia adalah perlu untuk memilih persekitaran yang sesuai untuk kajian ini, darah diambil hanya jika ia disyaki dijangkiti (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada persoalan tuberkulosis organ-organ sistem saraf. Dalam kes ini, PCR tidak dapat mengesan patogen dan diagnosis akan menjadi tidak diketahui.

    Petunjuk untuk mengesan batuk kering menggunakan analisis PCR

    Diagnosis tuberkulosis PCR paling kerap dilakukan dalam kes kontroversi. Bilakah doktor merujuk kajian ini?

    1. Sekiranya sukar untuk membuat diagnosis menggunakan kaedah yang sedia ada, tetapi ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
    2. Dalam kes apabila seseorang tidak dapat dihantar ke klinik untuk menjalani ujian rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksa dia menggunakan PCR, memandangkan sputum untuk ujian boleh dihantar ke dalam balang dan diagnosis disahkan dalam masa beberapa jam.
    3. Sekiranya seseorang akan menjalani operasi kecemasan dan ia perlu mengetahui sama ada dia sakit dengan tuberkulosis.
    4. Sekiranya perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa tuberkulosis menggunakan PCR, kerana kaedahnya adalah selamat.
    5. Secara berbayar, sesiapa yang belum didiagnosis dengan tuberkulosis telah disahkan menggunakan kaedah bacteriological dan fluoroscopy. Ini berlaku apabila luka di paru-paru tidak dapat dilihat dalam imej langsung, dan orang semasa penghantaran sputum untuk kajian itu tidak dapat mengikuti cadangan untuk pengumpulan bahan yang betul. Dalam kes ini, orang itu bimbang dengan semua ciri-ciri gejala batuk kering pulmonari.
    6. Apabila terdapat keraguan tentang hasil ujian Mantoux.
    7. Adalah lebih baik untuk melakukan diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak. Prosedur ini selamat, tidak membuat pendedahan radiasi tambahan, dan berkesan dalam mengesan sukar untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

    Diagnosis tuberkulosis tepat pada masanya adalah kunci kepada rawatan yang ditetapkan dengan betul dan mengurangkan penyebaran penyakit. Selalunya, kaedah pengesanan penyakit biasa tidak selalu berkesan. Oleh itu, PCR hari ini adalah salah satu cara yang paling boleh dipercayai dan selamat untuk mengesan jangkitan pada peringkat awal perkembangannya.

    Mycobacterium tuberculosis, DNA [PCR masa nyata]

    Satu kajian untuk mengenal pasti agen penyebab tuberkulosis (Mycobacterium tuberculosis), di mana bahan genetik mycobacterium dalam sampel biomaterial ditentukan menggunakan kaedah tindak balas rantai polimer masa sebenar (RT-PCR).

    Sinonim Rusia

    Tuberkulosis, Mycobacterium tuberculosis, Koch sticks.

    Sinonim bahasa Inggeris

    Tuberkulosis, bacillus Tubercle, bacillus Koch.

    Kaedah penyelidikan

    Tindak balas rantai polimer masa nyata.

    Apakah biomaterial yang boleh digunakan untuk penyelidikan?

    Ubat vena, biopsi, sel-sel endometrium rahim, cecair serebrospinal, urogenital smear (dengan rembesan prostat), dada, cecair pleura, bahagian pertama air kencing pagi, ejakulasi.

    Bagaimana hendak mempersiapkan kajian?

    Tiada latihan diperlukan.

    Maklumat am mengenai kajian ini

    Tuberkulosis (dari Latin Tuberculum - "tubercle") - penyakit berjangkit manusia dan haiwan, yang disebarkan terutamanya oleh titisan udara. Risiko jangkitan meningkatkan imunosupresi yang disebabkan oleh HIV / AIDS, kencing manis, penyakit buah pinggang, pemindahan organ dan penggunaan imunosupresan, kehamilan, penuaan. Di samping itu, mereka yang bersentuhan dengan pesakit dengan batuk kering, serta kanak-kanak di bawah 5 tahun selepas ujian tuberkulin, paling mudah terdedah kepadanya. Kumpulan yang paling terdedah kepada penduduk termasuk penduduk yang tidak berumah, tahanan, pendatang dari negara-negara dengan kejadian tuberkulosis yang tinggi, pengguna dadah, dan orang tua.

    Untuk kajian ini, sistem ujian berdasarkan pengesanan DNA genomik agen penyebab tuberkulosis menggunakan reaksi rantai polimerase (PCR) masa sebenar digunakan (PCR masa nyata). Dalam diagnostik moden, ia adalah salah satu kaedah yang paling cepat, paling serba boleh dan sangat sensitif.

    Kaedah standard untuk mengesan mycobacterium tuberculosis adalah berdasarkan penanaman mikroorganisma patogen dalam medium nutrien. Kesukaran yang berkaitan dengan kadar pertumbuhan koloni Mycobacterium tuberculosis yang rendah - dijangkakan sehingga 1.5 bulan selepas mengambil bahan.

    Kaedah biologi molekul berdasarkan pengesanan bahan genetik Mycobacterium tuberculosis mempunyai sensitiviti dan kekhususan yang tinggi. Kelebihan mereka yang paling penting ialah kelajuan tinggi mendapatkan hasil. Menggunakan masa nyata PCR membolehkan anda mengenal pasti agen penyebab tuberkulosis pada hari penerimaan sampel klinikal.

    Bacteremia (mycobacterium memasuki aliran darah pesakit) boleh berlaku pada peringkat awal jangkitan tuberkulosis, dan juga dalam perkembangan tuberkulosis umum atau extrapulmonary. Ia berbahaya kerana tindak balas imun terhadap bakteria akan menyebabkan sepsis dan kejutan septik, yang penuh dengan kematian. Risiko untuk membangunkan tuberkulosis umum adalah paling tinggi pada pesakit HIV di peringkat yang lebih tinggi, di kalangan mereka yang telah mengganggu terapi anti-tuberkulosis, dan juga di kalangan mereka yang tidak mendapatkan bantuan perubatan pada masa untuk gejala batuk kering.

    Diagnosis tuberkulosis pada orang yang dijangkiti HIV adalah sukar disebabkan keadaan imunosupresi badan, yang sering menampakkan diri dalam keputusan palsu-tuberculin palsu dan ujian mikrobiologi. Dalam hal ini, ujian Mycobacterium tuberculosis oleh PCR masa nyata sangat penting.

    Apakah penyelidikan yang digunakan?

    • Untuk diagnosis tuberkulosis pulmonari (khususnya, yang umum dan extrapulmonary, yang berkaitan dengan bakteremia, bentuk), dan memantau rawatannya.

    Bilakah kajian itu dijadualkan?

    • Apabila disyaki ekstrapulmonary tuberculosis.
    • Dengan gejala bakteria pada latar belakang jangkitan tuberkulosis: peningkatan suhu badan, berpeluh, dan lain-lain (dengan sedikit bakteria dalam darah, bakteria mungkin tidak asimtomatik).
    • Sekiranya pesakit mempunyai hubungan yang berpanjangan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
    • Dengan reaksi yang tidak normal terhadap ujian tuberkulin pada kanak-kanak.
    • Apabila pesakit mempunyai jangkitan HIV.

    Apa maksudnya?

    Nilai rujukan: negatif.

    • Kehadiran patogen dalam biomaterial yang dikaji. Ia biasanya berlaku dengan batuk kering yang memerlukan rawatan. Mengenal pasti sejumlah besar mycobacteria sering menunjukkan bentuk ekstrapulmonary tuberculosis atau generalisasi jangkitan.
    • Ejen penyebab tuberkulosis tidak dikesan. Bacteremia tidak hadir.

    Apa yang boleh menjejaskan hasilnya?

    Terapi anti-tuberkulosis yang berkesan sepanjang masa membawa kepada kehilangan mikobakteria dalam bahan klinikal.

    Nota penting

    Untuk menetapkan rejimen rawatan yang betul apabila pesakit didiagnosis dengan tuberkulosis, adalah perlu untuk melakukan ujian untuk sensitiviti mikobakteria kepada ubat anti-tuberkulosis.

    Juga disyorkan

    Siapa yang membuat kajian itu?

    Pengamal am, pakar terapeutik, ahli fisiologi, ahli urologi, pakar sakit puan, pakar penyakit berjangkit.

    Artikel Tambahan Mengenai Laryngitis