Terdapat kontraindikasi kepada ujian Mantoux? Analisis PCR untuk tuberkulosis akan dilakukan.

Pleurisy

Tuberculosis adalah penyakit berbahaya yang dapat dirawat dengan baik dengan diagnosis tepat pada masanya.

Salah satu kajian yang paling bermaklumat untuk mengenal pasti penyakit pada peringkat awal dipanggil kaedah tindak balas PCR (polimerase rantai).

Analisis PCR bukan sahaja merupakan yang paling bermaklumat, tetapi juga satu kajian yang paling mudah diakses yang dapat mengesan tuberkulosis pada peringkat awal.

Apakah analisis PCR?

Semua mikroorganisma yang hidup, termasuk virus dan bakteria, mengandungi RNA dan molekul DNA dalam struktur mereka. Dengan menonjolkan asid ini, adalah mungkin untuk mengatakan dengan pasti kepastian agen-agen asing berada dalam darah manusia dan membuat diagnosis yang tepat.

Inti dari kaedah PCR adalah pemprosesan khusus sampel cecair biologi, sebagai hasilnya adalah mungkin untuk menentukan spesies mana yang terdapat dalam mikroorganisma di dalamnya.

Analisis PCR untuk tuberkulosis: petunjuk, kebaikan dan keburukan

Teknik PCR digunakan pada orang dengan luka paru-paru yang teruk dalam kes-kes dan pernafasan pernafasan (batuk yang teruk, hemoptysis), ketika tidak mungkin untuk mendiagnosis dengan tepat oleh gejala klinik.

Ia disyorkan untuk menjalani kajian dan selepas hubungan langsung dengan pembawa penyakit itu. Kelebihannya termasuk:

  • kelajuan pelaksanaan - untuk mendapatkan hasil, anda tidak perlu mengembangkan budaya patogen atau menjalankan prosedur kompleks yang lain;
  • sangat bermaklumat - ketika mendiagnosis tuberkulosis, ketepatan analisis mencapai 90% dan lebih tinggi;
  • kepekaan dan kekhususan yang tinggi - untuk mengenal pasti patogen dalam bahan boleh mengandungi hanya satu sel virus;
  • universal - hampir mana-mana cecair biologi sesuai untuk analisis: dahak, darah, lavas bronkial.

Sebagai perbandingan: ketepatan mikroskopi pil perut, yang digunakan untuk mengesan tuberkulosis, hanya 40-50%, dan dengan jumlah patogen yang rendah dikurangkan kepada 10% atau kurang. Budaya sputum lebih bermaklumat, tetapi diperlukan 2 hingga 8 minggu untuk mendapatkan hasil.

Anda boleh menggunakan PCR untuk tuberkulosis dan bukannya Mantoux, jika orang itu mempunyai kontraindikasi terhadap sampel.

Kelemahan teknik ini termasuk risiko mendapatkan hasil negatif palsu. Dalam erti kata lain, ketiadaan DNA spesifik dalam dada, darah atau air kencing tidak lagi menunjukkan ketiadaan tuberkulosis dalam pesakit.

Adalah penting. Dalam diagnosis tuberkulosis pada kanak-kanak, sensitiviti analisis PCR adalah lebih rendah daripada orang dewasa, dan kira-kira 25-83%.

Foto 1. Melakukan PCR bukan Mantoux kepada kanak-kanak adalah pilihan yang baik jika dia alergi atau sering sakit.

Prosedur untuk analisis PCR

Prosedur untuk menjalankan analisis PCR dilakukan dengan cara alat khas yang disebut amplificator, dan terdiri dari empat tahap. Kajian ini memerlukan sekumpulan DNA yang memulakan sintesis molekul, nukleotida (pangkalan molekul DNA), serta polimerase, atau enzim yang mempercepatkan prosedur.

  1. Pengumpulan bahan biologi (dahak, darah, lavage bronkial).
  2. Pemanasan sampel ke suhu kira-kira 98% untuk menghancurkan struktur utama rantaian DNA.
  3. Annealing, atau menurunkan suhu beberapa darjah untuk mengikat primer ke helai DNA.
  4. Sintesis molekul diperlukan untuk menghasilkan hasil.

Selepas menjalankan 25-30 kitaran sedemikian, sejumlah salinan DNA virus terbentuk, dengan mudahnya menentukan agen penyebab penyakit ini.

Perhatian: Analisis PCR tidak membezakan antara mikroorganisma "mati" dan "hidup", oleh itu hasilnya boleh positif untuk masa tertentu selepas rawatan.

Penyediaan untuk analisis

Sekiranya ujian darah PCR diambil untuk tuberkulosis, maka tidak perlu latihan khas, tetapi pesakit dinasihatkan supaya mengikut peraturan am: mengelakkan diri daripada makan selama sekurang-kurangnya 8 jam, elakkan alkohol dan mengambil ubat, jangan merokok selama sejam sebelum mengambil bahan.

Sputum dikumpulkan pada waktu pagi selepas menyikat dan membilas mulut dengan teliti.

Jika exudate kurang diekskresikan, anda perlu mengambil expectorant malam sebelum atau mengambil penyedutan. Sputum dengan lendir, nanas, tompok putih atau kekuningan mempunyai nilai diagnostik.

Sekiranya tidak mungkin mengambil analisis dahak, bronchio swabs digunakan untuk mengenal pasti patogen. Analisis sedemikian tidak memerlukan penyediaan, dan bahan tersebut diambil seperti berikut. Dengan bantuan picagari laring, pesakit dituangkan ke dalam trakea larutan natrium klorida, yang menyebabkan batuk yang kuat - batuk cair digunakan untuk penyelidikan.

Perhatian. Hasil analisis mengganggu antibiotik, heparin dan ubat lain yang digunakan untuk rawatan setempat, jadi kajian itu disarankan 10-14 hari selepas pentadbiran.

Apakah PCR untuk tuberkulosis dan bagaimana membuat ujian?

PCR untuk tuberkulosis ditetapkan apabila tidak mungkin membuat diagnosis atau tidak mungkin melakukan kajian lain. Analisis ini memungkinkan untuk mengenal pasti tongkat Koch di peringkat terawal dan memulakan rawatan tepat pada masanya.

Perihalan PCR untuk batuk kering

Petunjuk untuk diagnostik PCR

Jenis PCR untuk batuk kering

Penyediaan untuk analisis

Bagaimana PCR untuk tuberkulosis?

Tafsiran hasil tinjauan

Kepastian PCR untuk batuk kering pada kanak-kanak

Berapakah jumlah PCR untuk kos tuberkulosis?

Komen dan Ulasan

Perihalan PCR untuk batuk kering

PCR (tindak balas rantai polimer) untuk tuberkulosis adalah analisis yang tepat yang dapat mengesan tongkat Koch dalam beberapa jam. Diagnostik adalah berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Doktor mengasingkan sel DNA, menggunakan ujian molekul gen untuk menentukan jenis patogen.

Kelebihan kaedah

  • membolehkan anda mengenal pasti patogen pada peringkat awal, tanpa manifestasi gejala yang kelihatan;
  • Diagnostik tidak ada contraindications dan dibenarkan untuk kanak-kanak;
  • penyelidikan boleh dijalankan dengan mengambil jumlah minimum bahan.
  • universiti penyelidikan biomaterial;
  • Kajian ini berkesan dalam menentukan penyakit yang berulang.

Kelemahan kaedah ini

Bersama dengan kelebihan, kajian PCR juga mempunyai kelemahan.

Yang utama ialah:

  1. Kajian ini bukan di mana-mana sahaja yang anda boleh lulus. Oleh kerana peralatan untuk diagnosis seperti itu mahal, ia dipasang di makmal yang dibayar.
  2. PCR untuk tuberkulosis boleh memberi tindak balas positif jika ia mengesan mikobakteria yang telah mati, sebagai contoh, selepas rawatan.
  3. Mutasi patogen ketara mengurangkan keberkesanan kaedah PCR, kerana lembaran DNA tidak mampu menghasilkan sintesis secara berurutan.
  4. Keperluan untuk memilih biomaterial dengan teliti untuk dianalisis.

Petunjuk untuk diagnostik PCR

Hantar kepada kaji selidik untuk tanda-tanda berikut:

  1. Sekiranya terdapat sekurang-kurangnya satu hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis dan sukar untuk mengenal pasti penyakit menggunakan ujian standard.
  2. Terdapat situasi apabila tidak mungkin untuk membawa seseorang untuk X-ray atau kajian lain. Dalam kes sedemikian, lebih mudah menyampaikan sputum.
  3. Analisis ini dilantik pada malam sebelum operasi yang akan datang, apabila perlu menentukan sama ada seseorang sakit atau tidak.
  4. Jika pesakit mempunyai hasil yang meragukan tindak balas Mantoux.
  5. Berikan kepada wanita hamil dan kanak-kanak untuk mengelakkan pendedahan kepada x-ray.

Jenis PCR untuk batuk kering

Pilihan biomaterial untuk pemeriksaan untuk tuberkulosis perlu dilantik secara individu.

Untuk diagnosis PCR untuk tuberkulosis boleh mengambil ujian:

Ujian darah

Ciri-ciri ujian darah untuk batuk kering:

  1. Dilakukan dalam kes di mana diagnostik lain tidak sesuai atau kontraindikasi. Sebagai contoh, untuk membuat diagnosis yang betul, anda perlu mengambil lebih daripada satu imej X-ray. Pendedahan yang berlebihan tidak selamat untuk badan, jadi lebih mudah untuk mengambil darah dari pesakit.
  2. Juga, doktor boleh memberikan arahan kepada darah apabila menerima hasil kontroversi selepas fluorografi.

Analisis air liur

  1. Analisis air liur kurang popular dan bermaklumat daripada kajian lain, kerana batuk kering tidak menjejaskan kelenjar air liur. Oleh itu, dalam kebanyakan kes, hasilnya akan negatif.
  2. Kaedah ini bertujuan untuk mengenalpasti bentuk paru-paru dan ekstrapulmonari.
  3. Jika warna sampel tidak berubah di bawah tindakan reagen, ini bermakna tiada patogen. Jika, bagaimanapun, kecurigaan penyakit timbul, maka analisis analisis tambahan dilakukan.

Analisis sputum

Analisis sputum adalah yang paling bermaklumat untuk mengesan patogen tuberkulosis. Sampel diambil beberapa kali, sebagai peraturan, tiga kali cukup. Ini menghapuskan kemungkinan kesilapan dalam mendapatkan bahan berkualiti rendah.

Sekiranya seseorang dijangkiti tuberkulosis, selesema dalam jumlah kecil akan dikeluarkan bersama-sama dengan batuk. Pada pesakit dalam peringkat lanjut penyakit itu, lendir akan dikeluarkan dengan tompok berdarah.

Ia tidak digalakkan mengambil sputum untuk pemeriksaan jika pesakit mempunyai kecurigaan tuberkulosis tulang atau sistem saraf.

Analisis air kencing

Urinalisis adalah salah satu cara untuk mengesan bentuk ekstrapulmonary penyakit: sistem tuberkulosis ginjal dan sistem kencing.

Dalam kes bentuk pulmonari penyakit ini, analisis umum air kencing adalah tidak praktikal, kerana tidak ada perubahan patologi yang jelas.

Dari video anda akan mengetahui doktor yang membuat diagnosis tuberkulosis. Dilancarkan oleh saluran tuberculum. ru.

Penyediaan untuk analisis

Apabila mengambil PCR ujian darah harus mengikuti beberapa peraturan untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai:

  • Adalah disyorkan untuk mengambil analisis perut kosong;
  • harus mengecualikan alkohol pada malam sebelum tinjauan;
  • anda perlu mengambil antibiotik 15-20 hari sebelum analisis;
  • Adalah disyorkan untuk menahan diri dari merokok selama satu jam sebelum pengumpulan darah.

Apabila mengambil sputum untuk pemeriksaan, ia juga disyorkan untuk mengikuti beberapa peraturan:

  • bahan dikumpulkan pada waktu pagi, oleh itu, mereka pra-berus gigi mereka dan teliti bilas rongga mulut;
  • jika dahaga tidak bergerak dengan baik, disyorkan untuk mengambil expectorant di waktu petang atau menghirup;
  • Ia perlu berhenti mengambil antibiotik 15 hari sebelum peperiksaan.

Untuk mendapatkan hasil analisis air kencing yang boleh dipercayai, pesakit disarankan untuk mematuhi peraturan berikut:

  • bahan mesti dikumpulkan pada waktu pagi;
  • pada malam itu tidak disyorkan untuk memakan makanan yang boleh mengubah warna cecair (bit, blueberry dan lain-lain);
  • Berhenti mengambil antibiotik selama 15 hari sebelum peperiksaan.

Bagaimana PCR untuk tuberkulosis?

Ciri pengambilan bahan:

  1. Ujian darah diambil dari pesakit pada waktu pagi dari vena di makmal.
  2. Untuk penghantaran sputum pada lendir, semestinya perlu dari laring, dan sebaik-baiknya tanpa banyak air liur. Pesakitnya harus meludah ke dalam bekas steril khas, kemudian diserahkan kepada kajian.
  3. Doktor mengambil mengikis dengan alat khas dari mukosa pipi.
  4. Urin disewa dalam bekas khas. Ambil bahagian tengah bahagian pagi.

Tindak balas genetik molekul oleh PCR dilakukan menggunakan alat khas yang dipanggil penguat. Untuk mengkaji segmen DNA yang diperlukan, yang memulakan sintesis molekul.

Teknik ini terdiri daripada empat tahap:

  1. Pada mulanya, biomaterial yang diperlukan dikumpulkan untuk penyelidikan (darah, dada dan air liur).
  2. Kemudian sampel dipanaskan pada suhu sehingga 98 darjah dan tidak lebih daripada dua minit. Oleh itu, bentuk utama genetik DNA telah musnah dan dua rantai terbentuk.
  3. Seterusnya datang penyepuhlindapan atau pengurangan suhu, kerana yang primer mengikat ke helai DNA.
  4. Peringkat terakhir dipanggil elongation. Ini adalah sintesis molekul, yang membawa kepada hasil akhir.

Anda perlu menghabiskan 25-30 kitaran sedemikian untuk mendapatkan sejumlah salinan DNA virus. Agen penyebab penyakit itu ditentukan oleh mereka.

Kandungan maklumat dan kebolehpercayaan diagnostik PCR adalah 100%.

Tafsiran hasil tinjauan

Masa pengeluaran analisis adalah kira-kira 5-6 jam.

Diagnostik dengan kaedah PCR memberikan 2 varian keputusan:

  1. Dikesan. Dalam bahan yang disiasat, DNA ejen tuberkulanya dikesan. Kebarangkalian jangkitan adalah 97%. Pesakit sedemikian cepat dihantar ke ubat TB, di mana rawatan akan dijalankan.
  2. Tidak dikesan. Satu tindak balas negatif menunjukkan ketiadaan agen penyebabnya.

Sekiranya hasilnya positif, doktor melakukan penyahkod terperinci, yang menentukan peringkat dan fokus penyakit.

Galeri Foto

Kepastian PCR untuk batuk kering pada kanak-kanak

PCR ditetapkan jika keputusan ujian Mantoux tidak pasti atau pada kecurigaan sedikit jangkitan. Menyediakan prosedur selamat untuk kanak-kanak.

Tafsiran hasil PCR untuk batuk kering

  • Apakah diagnostik PCR?
  • Tanggungjawab sebelum lulus ujian
  • Proses pengumpulan
  • Bagaimana hasilnya diuraikan

Baru-baru ini, PCR untuk tuberkulosis dianggap analisis yang paling tepat, walaupun terdapat kaedah lain. Penyakit ini mendapat momentum, oleh itu pakar berusaha mencipta teknologi baru untuk mengenal pasti tongkat Koch di dalam badan. Semua orang tahu bahawa tuberkulosis adalah penyakit berjangkit yang boleh ditularkan oleh tetesan udara dan melalui serangga, dan lain-lain. Oleh itu, adalah penting untuk melakukan tinjauan berkala.

Apakah diagnostik PCR?

Reaksi rantai polimerase (PCR) membolehkan hanya beberapa jam untuk mengesan agen berjangkit, dan anda juga boleh mengenal pasti 1-2 molekul di antara sejumlah besar. Ujian ini mempunyai banyak kelebihan, yang ditunjukkan dalam perkara berikut:

  • Pengesanan 100%, seperti dalam sampel biologi ditentukan dari 10 hingga 100 sel;
  • kekhususan DNA MBT sangat tinggi;
  • analisis kelajuan mempunyai 4 hingga 4.5 jam;
  • diagnosis tuberkulosis pulmonari, yang hampir tidak realistik untuk kaedah lain;
  • serpihan tertentu diturunkan, yang terdapat hanya dalam patogen tertentu.

Dengan diagnosis ini, adalah mungkin bukan sahaja untuk mengesan jangkitan pada masa yang tepat, tetapi juga untuk mengasingkan seseorang dan menetapkan rawatan yang sesuai untuknya. Ini terutama berlaku bagi tuberkulosis, kerana lokasi sebenar batang kayu Koch sukar dikenal pasti. Di samping itu, analisis ini dapat mengkaji rintangan mikobakteri kepada ubat tertentu, dengan itu menentukan kaedah rawatan. Untuk melakukan tindak balas rantai polimerase untuk rintangan, gunakan gen yang mengekalkan imuniti terhadap ubat-ubatan tertentu, selepas itu dua hari kemudian anda dapat memperoleh hasil. Ini mempunyai kesan yang baik terhadap pencegahan penyakit ini.

Tanggungjawab sebelum lulus ujian

Perlu diingatkan bahawa PCR mengesan bukan sahaja patogen bacillus bacillus, tetapi juga banyak penyakit lain dan juga HIV. Analisis ini dijalankan dengan sebarang cecair biologi. Ini boleh:

  • darah;
  • air kencing;
  • najis;
  • cecair kemaluan;
  • sputum;
  • cecair tunjang;
  • mengikis dari semua organ.

Bahan yang dikumpul ditempatkan di penguat khas, iaitu, reaktor, di mana beberapa enzim terletak, berkat reaksi rantai terjadi untuk menggandakan jangkitan DNA. Setelah ini dilakukan penyahkodan. Hasilnya, sebagai peraturan, sama ada positif atau negatif.

Diagnosis tuberkulosis ditetapkan dalam kes-kes di mana, pertama, ada gejala utama penyakit, kedua, orang itu telah menderita penyakit pernafasan akut untuk waktu yang sangat lama dan, ketiga, orang-orang bersentuhan dengan pesakit dengan tuberkulosis. Tetapi doktor boleh menjalankan analisis ini dan di hadapan imej yang dipersoalkan selepas peperiksaan x-ray.

Pakar pakar seperti ahli pulmonologi, doktor TB, ahli terapi dan pakar kanak-kanak boleh mengarahkan tindak balas rantai polimerase. Sudah tentu, ada peraturan yang mesti diikuti oleh pesakit sebelum menderma, sebagai contoh, darah untuk tuberkulosis. Pertama sekali, anda tidak boleh makan makanan selama 4-5 jam sebelum penghantaran, dan sehari sebelum ini anda harus mengecualikan makanan berlemak dan alergen dari diet anda. Ia juga dinasihatkan untuk tidak menggunakan antibiotik dan produk kebersihan diri dalam bentuk gel.

Proses pengumpulan

Tetapi bukan hanya pesakit yang wajib mematuhi syarat-syarat yang diperlukan. Perkara yang sama berlaku kepada doktor. Agar ujian tuberculosis diambil dengan betul, ia harus dilakukan hanya di bawah keadaan steril, jika tidak, mikroorganisma lain mungkin masuk ke dalam medium cair, oleh itu, tafsirannya tidak betul. Semua instrumen, instrumen dan bekas hendaklah juga steril.

Oleh itu, bahan itu dikumpulkan dalam bekas khas, yang, jika perlu, pakar memberikan pesakit. Sebagai contoh, air kencing dikumpulkan hanya yang pertama selepas seseorang bangun pada waktu pagi. Tetapi perlu melakukan prosedur air pagi di tempat yang sesuai. Urin untuk mengumpul cukup dari 20 hingga 30 ml. Tetapi cecair sinovial dari saraf tunjang dan analisis kompleks lain hanya mengambil pakar yang berkelayakan, yang terletak dalam keadaan pegun.

Dalam separuh wanita, hanya seorang pakar sakit puan mengambil sapu pada kerusi yang khusus, dan pada lelaki yang mengikis atau mengusap diambil dari uretra (dari luar). Dari smear pharynx mengambil doktor dengan spatula khas atau alat lain. Darah diambil secara langsung dari urat dengan jarum suntikan steril.

Pada peringkat akhir koleksi, doktor, dengan mengambil kira semua keperluan pengangkutan dan penyimpanan, menghantar sampel ke makmal khas untuk siasatan lanjut. Untuk melakukan ini, kakitangan makmal meletakkan darah atau smear lain dalam tiub ujian, di mana bahan yang menghalang penuaan pramatang sampel ditambah terlebih dahulu.

Dalam hal darah, yang sangat penting, bahan ini tidak membekukan, oleh itu, kehadiran gumpalan dikecualikan. Tiub tidak digoncang, kerana ia mungkin merosakkan keadaan sel darah merah. Ini semua perlu untuk memudahkan dan cepat mengenal pasti semua komponen darah.

Kemudian darah untuk tuberkulosis adalah sentrifuged, yang memisahkan sedimen sel dari plasma, yang dikaji di bawah mikroskop. Selepas memeriksa data awal, tambahkan enzim (transkrip) dan pada rejim suhu tertentu, tindak balas rantai berikut. Disebabkan ini, serpihan bahan genetik terbentuk, yang tertakluk kepada penyahkodan.

Bagaimana hasilnya diuraikan

Analisis ini tidak selalu benar. Hasil positif palsu hanya berlaku jika semua keperluan untuk menyiapkan dan menyerahkan sebatan, dan lain-lain tidak dipenuhi. Itulah sebabnya kedua pesakit dan doktor harus tegas mematuhi semua peraturan yang disebutkan di atas.

Decryption boleh menjadi mudah dan rumit. Yang pertama adalah definisi "negatif" atau "positif", yang menunjukkan bahawa dengan penyahkod negatif, pesakit tidak perlu risau, kerana tiada jangkitan dikesan.

Dengan hasil positif bentuk mudah, bilangan patogen yang terkandung diabaikan. Faktanya ialah dalam bidang perubatan ada norma-norma tertentu, berkat ketahanan terhadap penyakit dapat ditentukan.

Tetapi dalam penyahkodan kompleks ujian ditentukan oleh kandungan spesifik mikroorganisma tertentu, yang membolehkan anda membuat kesimpulan yang paling tepat. Secara semulajadi, tidak ada pesakit yang dapat menguraikan semua angka ini secara bebas, dan doktor dapat menjelaskan pesakit secara terperinci.

Ia adalah angka-angka yang menunjukkan di mana tumpuan terletak, pada peringkat apa mereka dan apa yang menyebabkan berlakunya penyakit tuberkulosis.

Atas dasar penyahkodan, para pakar menetapkan kaedah rawatan, dan lain-lain. Anda tidak boleh lupa bahawa kehadiran patogen sedikit yang menunjukkan kehadiran mereka dalam tubuh. Oleh itu, lambat laun, jangkitan boleh terus berleluasa dan tahap tuberkulosis akan meningkat. Jangan menjadi tidak bertanggungjawab terhadap kesihatan mereka sendiri, sentiasa mengikuti saranan pakar.

Diagnosis tuberkulosis PCR

Tuberkulosis adalah jangkitan khusus, tumpuannya mungkin dalam tisu manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronik yang rejimen rawatan yang optimum sukar dipilih. Salah satu sebab untuk ini adalah diagnosis lewat, ketika mycobacteria, ketika di dalam tubuh manusia, telah disesuaikan dengan banyak ubat.

Apakah kaedah diagnosis moden yang ada? Diagnostik PCR - apa itu? Bagaimana kajian ini dilakukan? Dalam kes yang mana tuberkulosis didiagnosis dengan kaedah ini dan apakah intipatinya?

Apakah diagnostik PCR?

Ini adalah salah satu kaedah yang paling moden untuk mendiagnosis bukan sahaja penyakit, tetapi juga pengesanan bahan biologi. Diagnostik PCR dicipta baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mencadangkan skim pemulihan kompleks untuk bahan biologi mikroorganisma dalam satu segmen pendek. Terima kasih kepada penemuannya, saintis itu dianugerahkan anugerah tertinggi - Hadiah Nobel.

Apakah itu - diagnosis PCR jangkitan? Reaksi rantai polimerase (PCR) adalah diagnosis pengesanan penyakit virus, berdasarkan kaedah kejuruteraan genetik. Ia digunakan secara meluas dalam mikrobiologi perubatan, imunologi dan virologi. Kaedah ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sedikit bahan. Jangkitan dapat dikesan secara literal pada jam pertama jangkitan dengannya, jauh sebelum gejala penyakit pertama muncul.

Kaedah ini terdiri daripada mendapatkan dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi serpihan genom (zarah DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya untuk kelas mikroorganisma yang diperolehi daripada bahan genetik yang dimiliki melalui kaedah genetik molekul.

Walaupun ia adalah proses yang kompleks, ia mengambil masa yang lebih sedikit daripada banyak kaedah biologi mengesan agen berjangkit. Dalam masa beberapa jam, mikroorganisma boleh dikesan oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengasingkannya dari persekitaran (darah, cecair cerebrospinal, dahak) dan membesar untuk masa yang lama pada media nutrien tiruan. Adalah cukup bahawa serpihan kecil benang DNA agen berjangkit hadir dalam bahan yang sedang dipelajari.

Asas tindak balas adalah kemungkinan di bawah keadaan buatan (in vitro) untuk menghasilkan sintesis molekul asid nukleus agen berjangkit.

Apa yang diperlukan untuk PCR?

  1. Primer adalah segmen DNA yang mana biosintesis atau penciptaan bermula.
  2. Nukleotida atau sebatian kompleks yang merupakan asas molekul DNA atau RNA.
  3. Tindak balas rantai polimerase tidak mungkin tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

Tahap diagnostik PCR

Bagaimanakah diagnosis molekul dilakukan oleh PCR? Prosedur ini mudah dan mengambil masa yang singkat, dengan mengambil kira pengumpulan bahan.

  1. Sebelum memulakan kajian, mereka mengambil bahan biologi yang diperlukan - ini adalah air basuh bronkial, darah, kandungan lambung, dahak. Jenis bahan biologi bergantung kepada patogen yang disyaki.
  2. Denaturasi atau pemusnahan struktur utama DNA, yang terdiri daripada dua rantai. Intipati tahap ini adalah untuk memisahkan dua rantai di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang tidak berlangsung lebih dari dua minit).
  3. Pada tahap berikutnya PCR, dipanggil penyepuhlindapan, suhu dikurangkan dengan beberapa darjah supaya primer akan terikat pada helai DNA.
  4. Pemanjangan, di mana sintesis molekul yang dikehendaki berlaku secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 kitaran sedemikian menerima bilangan salinan DNA mikroorganisma yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Adakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

Tidak mungkin benar-benar semua orang yang disyaki menggunakan tuberkulosis untuk melakukan PCR, kerana kaedah ini memerlukan peralatan mahal. Tidak semua klinik awam mampu membelinya. Di samping itu, ia berlaku bahawa kaedah biasa mendiagnosis jangkitan dalam kebanyakan kes juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

  • tinjauan pesakit, pengambilan sejarah;
  • pemeriksaan penuh orang itu;
  • satu kajian menggunakan ujian tuberkulin Mantoux;
  • radiografi atau fluorografi;
  • diagnostik komputer jika perlu;
  • Kaedah penyelidikan mikrobiologi: mikroskopi smear dan pemeriksaan bacteriological sputum.

PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kes-kes khas apabila sukar untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk menjalankan kaedah instrumental lain.

Walaupun terdapat banyak kaedah diagnostik, kejadian tuberkulosis terus berkembang. Pada masa ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga ciri-ciri lain:

  • penyakit ini sering berlaku dalam bentuk yang teruk;
  • bilangan kes maut meningkat;
  • semakin tahan terhadap kemoterapi moden didiagnosis bentuk penyakit.

Kehadiran rakyat sendiri menjalani pemeriksaan kesihatan rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi menyebabkan penyebaran tuberkulosis. Dalam keadaan sedemikian, kita memerlukan kaedah penyelidikan yang cepat, bermaklumat dan berkesan yang boleh diakses oleh kanak-kanak dan orang dewasa. Semua kaedah diagnostik di atas adalah lebih rendah daripada PCR.

Faedah mendiagnosis batuk kering dengan PCR

Penyelidikan ini, walaupun baru, telah terbukti dengan baik, terutamanya dalam kes-kes kontroversi di mana mustahil untuk membuat diagnosis untuk beberapa sebab.

Terima kasih kepada PCR, lebih mudah untuk mengesan agen penyebab tuberkulosis dalam bahan ujian.

Kelebihan diagnostik PCR adalah seperti berikut.

  1. Ini adalah analisis cepat. Serpihan kecil molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi kecemasan ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit tuberkulosis.
  2. Analisis PCR dibenarkan dalam kes apabila kaedah lain tidak tersedia atau dilarang (untuk pengesanan tuberkulosis pulmonari, kadang-kadang anda perlu mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi dos radiasi yang besar).
  3. Dengan bantuan PCR, sebarang persekitaran biologi diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Sebagai contoh, anda boleh menjalankan kajian cecair serebrospinal, jika terdapat kecurigaan terhadap meningitis tuberkulosis.
  4. Mengizinkan diagnosis PCR penyakit berjangkit pada kanak-kanak, kerana kaedahnya selamat.
  5. Membolehkan anda mengenal pasti patogen di mana-mana peringkat penyakit ini.
  6. Kepekaan tinggi PCR memungkinkan untuk mengesan Mycobacterium tuberculosis, walaupun terdapat hanya beberapa mikroorganisma dalam bahan biologi.
  7. Adalah baik untuk menjalankan diagnosis penyakit berulang.

Selepas semua PCR yang dibaca seolah-olah menjadi kaedah diagnostik yang hampir sempurna, yang sepatutnya membuat setiap orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka mesti diambil kira.

Kelemahan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Di zaman kita, diagnostik sedemikian lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini terdapat sebab.

  1. Ini adalah kaedah penyelidikan yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak hadir kerana kos yang tinggi, tetapi analisis masih boleh dilakukan di makmal berbayar.
  2. Sejurus selepas rawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam kuantiti yang kecil mungkin masih terdapat di dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif semasa diagnosis PCR), jadi kaedah ini tidak boleh dipercayai pada masa ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
  3. Mutasi mycobacteria mengakibatkan PCR tidak berkesan - urutan serai DNA biasa tidak dapat disintesis.
  4. Ia adalah perlu untuk memilih persekitaran yang sesuai untuk kajian ini, darah diambil hanya jika ia disyaki dijangkiti (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada persoalan tuberkulosis organ-organ sistem saraf. Dalam kes ini, PCR tidak dapat mengesan patogen dan diagnosis akan menjadi tidak diketahui.

Petunjuk untuk mengesan batuk kering menggunakan analisis PCR

Diagnosis tuberkulosis PCR paling kerap dilakukan dalam kes kontroversi. Bilakah doktor merujuk kajian ini?

  1. Sekiranya sukar untuk membuat diagnosis menggunakan kaedah yang sedia ada, tetapi ada hubungan dengan pesakit dengan tuberkulosis.
  2. Dalam kes apabila seseorang tidak dapat dihantar ke klinik untuk menjalani ujian rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksa dia menggunakan PCR, memandangkan sputum untuk ujian boleh dihantar ke dalam balang dan diagnosis disahkan dalam masa beberapa jam.
  3. Sekiranya seseorang akan menjalani operasi kecemasan dan ia perlu mengetahui sama ada dia sakit dengan tuberkulosis.
  4. Sekiranya perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa tuberkulosis menggunakan PCR, kerana kaedahnya adalah selamat.
  5. Secara berbayar, sesiapa yang belum didiagnosis dengan tuberkulosis telah disahkan menggunakan kaedah bacteriological dan fluoroscopy. Ini berlaku apabila luka di paru-paru tidak dapat dilihat dalam imej langsung, dan orang semasa penghantaran sputum untuk kajian itu tidak dapat mengikuti cadangan untuk pengumpulan bahan yang betul. Dalam kes ini, orang itu bimbang dengan semua ciri-ciri gejala batuk kering pulmonari.
  6. Apabila terdapat keraguan tentang hasil ujian Mantoux.
  7. Adalah lebih baik untuk melakukan diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak. Prosedur ini selamat, tidak membuat pendedahan radiasi tambahan, dan berkesan dalam mengesan sukar untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

Diagnosis tuberkulosis tepat pada masanya adalah kunci kepada rawatan yang ditetapkan dengan betul dan mengurangkan penyebaran penyakit. Selalunya, kaedah pengesanan penyakit biasa tidak selalu berkesan. Oleh itu, PCR hari ini adalah salah satu cara yang paling boleh dipercayai dan selamat untuk mengesan jangkitan pada peringkat awal perkembangannya.

Diagnosis tuberkulosis PCR pada kanak-kanak dan orang dewasa

Kaedah diagnostik moden (pcr, diaskintest, ujian kuantiferon) sangat berkesan, tetapi dalam praktiknya kajian tidak disahkan. Diagnosis Tuberculin adalah asas untuk mengenal pasti orang yang dijangkiti dan sakit.

Kaedah yang dibenarkan untuk mengenal pasti ramai orang sakit, mengurangkan statistik morbiditi, kematian.

Menyebarkan mikobakteria dan mikroskopi sputum mengikut Zill-Nelson membolehkan anda untuk mendiagnosis jangkitan dengan tepat. Masalahnya menyebabkan pengambilan sputum secara langsung dari bronkus yang terjejas. Di latar belakang proses tabung, sebahagian besar dari pokok bronkial dipengaruhi. Selepas pembibitan bakteria, adalah mungkin untuk menguji kepekaan agen penyebab kepada antibiotik.

Selepas menganalisis hasil diagnostik oleh ahli fisiologi, menjadi jelas bahawa kekurangan perkumuhan kayu Koch tidak bermakna ketiadaan jangkitan dalam tubuh. Ejen kausatif boleh ditentukan selepas bahan pengambilan kedua, ketiga dan keempat.

Kaedah diagnostik moden (dst, ujian Quantiferon) mengesan mycobacteria dengan cara aktif penyakit ini. Di hadapan mikobakteria di dalam nodus limfa, dengan bentuk extrapulmonary penyakit, ujian paling sering negatif.

Diagnosis tepat pada masanya adalah asas untuk mencegah komplikasi serius dan akibat berbahaya penyakit.

Kaedah moden

Penggantian diagnosis tuberculin klasik adalah diaskintest (dst). Menurut peraturan terkini, kajian itu harus menggantikan ujian Mantoux standard, yang memungkinkan untuk mengenal pasti banyak kes morbiditi dan jangkitan di kalangan penduduk.

Intipati Diaskintest, serta diagnosis tuberkulin, melibatkan pentadbiran subkutaneus protein patogen tuberkulosis. Sebagai tindak balas kepada suntikan, tindak balas hipersensitiviti dikembangkan dengan perubahan kulit tertentu: kemerahan, indurasi, melepuh.

Hasil positif dari Diaskintest adalah tipikal untuk pesakit yang menjalani penyakit aktif. Dalam kes jangkitan atau peningkatan alergi, kajian akan menjadi negatif. Kesan negatif dst boleh menjadi hasil imuniti yang kuat, tetapi apabila seseorang dijangkiti.

Apabila dibandingkan dengan Mantu, Diaskintest adalah cara yang lebih serba boleh dan sensitif untuk mendiagnosis tuberkulosis. Ketiadaan pengesanan jangkitan memerlukan penggunaan secara serentak dengan diagnosis tuberculin.

Walaupun keputusan percubaan klinikal, saintis berpendapat tentang universalality umum dan sensitiviti kaedah, kajian itu tidak boleh dianggap penyelesaian diagnostik sejagat.

Ujian telah dibangunkan oleh ahli akademik dari Institut Penyelidikan Sechenov. Ketiadaan alahan apabila menggunakan diaskintest dijelaskan oleh pentadbiran subkutaneus protein spesifik spesies tuberculosis. Selepas pengenalannya ditentukan oleh reaksi kulit dalam bentuk kemerahan, anjing laut.

Apakah ujian quantiferon itu

Ujian quantiferon dinilai setelah mengambil darah pesakit. Mekanisme prosedur ini adalah untuk menentukan gamma-interferon, yang dikeluarkan oleh T-limfosit selepas bertemu dengan tuberkulosis mycobacteria. Ujian menentukan protein saraf yang mengandungi bukan sahaja bakteria manusia dan baka. Ujian quantiferon juga boleh digunakan untuk mendiagnosis mycobacteriosis yang disebabkan oleh mikobakteria lain yang membentuk perubahan khusus pada sinar X. Keputusan ujian ditentukan dalam beberapa tiub ujian, yang meningkatkan sensitiviti diagnostik kaedah.

PCR untuk diagnosis tuberkulosis kanak-kanak

Tindak balas rantai polimerase adalah kaedah yang tepat tetapi mahal untuk mendiagnosis tuberkulosis. PCR dilakukan selepas bronkoskopi.

Adalah rasional untuk melakukan tindak balas rantai polimer selepas menerima keputusan negatif. Keputusan dinilai selepas budaya dahak tiga kali Mycobacterium tuberculosis. Di bawah keadaan yang paling baik, pengenalan patogen menunjukkan jangkitan. Tujuan chemoprophylaxis menghindari proses berbahaya aktif di hadapan batang Koch.

Setelah menerima ketegangan mikroorganisma, pembenihan kerentanan antibiotik adalah mungkin. Penentuan antibiotik yang boleh membunuh mikroorganisma, membolehkan kita menilai ubat-ubatan yang mana untuk merawat jangkitan.

PCR pada kanak-kanak dijalankan dengan keputusan negatif pembenihan, tetapi jika terdapat giliran ujian tuberkulin, visualisasi tanda-tanda infeksi X-ray, pengesanan gejala klinikal jangkitan semasa.

Tindak balas rantaian polimerase memberikan ketepatan yang tinggi (kira-kira 99%). Kaedah ini berdasarkan penguatan asid nukleik. Mycobacteria, virus dan mikroorganisma lain mempunyai urutan nukleotida yang unik. Diagnosis mereka membolehkan untuk mengenal pasti agen penyebab penyakit ini.

Kepekaan PCR pada kanak-kanak adalah kurang rendah berbanding orang dewasa. Dalam amalan, ciri-ciri berikut tindak balas rantai polimer dalam seorang kanak-kanak telah didedahkan:

  1. Spesifikasi - 80-100%;
  2. Kepekaan - 25-80%.

Walaupun ketepatan tinggi kaedah ini, mendapat keputusan negatif tidak bermakna ketiadaan tuberkulosis pada kanak-kanak. Penggunaan kaedah yang lebih rasional dalam pesakit dengan keadaan imunodeficiency. Dalam diagnosis jangkitan tuberkulosis extrapulmonary.

Kesalahan tafsiran ditentukan oleh pelanggaran dalam pengumpulan dan penyediaan bahan untuk kajian.

Sebab-sebab hasil negatif PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Penyebaran mikrogakteria di dalam tubuh oleh limfa (melalui saluran limfa) dan hematogen (melalui aliran darah) memastikan penjajahan banyak tisu, penampilan jangkitan fungsional extrapulmonary.

Apabila penentuan sinar-X pertahanan pemusnahan (kemusnahan) dalam paru-paru tidak perlu untuk PCR. Pada orang dewasa, menggunakan radiografi, adalah mungkin untuk mengenal pasti bentuk-bentuk maju dengan tahap keyakinan yang tinggi.

Pada kanak-kanak, kajian PCR lebih kerap digunakan kerana penyebaran laten mycobacteria di dalam nodus limfa, yang membawa kepada keputusan negatif apabila menggunakan kaedah diagnostik lain. Dengan kultur bakteria, cukup untuk mengesan 10 mikroorganisma. Perlu diingat bahawa tidak semua orang bertanggungjawab terhadap tuberkulosis pulmonari yang aktif.

Untuk diagnosis PCR yang betul, pembenihan bakteria, DST keperluan harus diikuti:

  1. Simpan bahan dalam tiub steril;
  2. Hilangkan kemasukan bakteria lain;
  3. Semasa mengangkut, perhatikan kebersihan diri untuk mencegah biomaterial daripada jatuh pada badan, muka, dan saluran udara.

Disimpan darah bersama pengawet EDTA. Terdapat ciri-ciri unik penyediaan bahan untuk setiap analisis makmal, yang pakar sudah biasa.

Kaedah diagnostik inovatif

Pengesanan awal jangkitan membolehkan chemoprophylaxis tepat pada masanya, untuk mencegah penyakit yang teruk.

Pembasmian klinik pada zaman kanak-kanak, keputusan ujian yang tidak mencukupi, interpretasi buta huruf terhadap penilaian sampel tidak membenarkan pengesahan tepat pada masanya. Untuk mencegah morbiditi bayi, analisis yang teliti terhadap keputusan diperlukan, dengan kemungkinan membuat diagnosis pada peringkat awal.

Kaedah moden diagnosis makmal tuberkulosis pada kanak-kanak - pengesanan TAB-TM

Reaksi terhadap penentuan penanda sel T pada kanak-kanak yang dipanggil "TAB-TM" dicirikan oleh sensitiviti yang tinggi. Inti dari kaedah ini adalah dalam pengenalpastian kumpulan tertentu pembezaan (CD-27) setempat pada permukaan limfosit T. Selepas mengasingkan faktor ini, sitokin berwarna dengan sitometri.

Kaedah ini telah diterangkan dalam kesusasteraan sejak tahun 2014. Hasil pemerhatian menunjukkan kepekaan tinggi terhadap kaedah tersebut. Penentuan TAB-TM adalah cara yang jelas untuk mendiagnosis tuberkulosis dengan pemeriksaan dahak.

Ujian darah untuk tuberkulosis - yang menunjukkan

Pada peringkat awal, jangkitan tuberkulosis berlaku tanpa gejala klinikal tertentu. Diagnosis makmal di kalangan kanak-kanak menjadi mungkin apabila tongkat Koch bertambah banyak.

Sel apa yang dinilai dalam proses tabung dalam ujian darah makmal:

  1. Sel darah merah adalah sel darah merah yang bertanggungjawab untuk mengangkut oksigen ke tisu. Dengan cara ringan tuberkulosis pulmonari dari sisi kemerahan darah merah, tiada perubahan patologi. Kehadiran fokus merosakkan menyumbang kepada pendarahan dengan anemia darah. Keadaan ini berkembang dengan keradangan tisu dinding usus. Bilangan reticulocytes pada latar belakang patologi meningkat lebih daripada 1%;
  2. Leukosit meningkat dengan apa-apa jangkitan. Leukositosis disertai oleh pergeseran leukogram ke kiri. Peningkatan bilangan neutrofil tersegmen dapat dikesan pada peringkat awal. Dalam tuberkulosis yang teruk dengan gabungan purulen, keadaan imunodefisiensi, leukopenia diperhatikan (penurunan bilangan leukosit darah). Pada masa yang sama meningkatkan kandungan limfosit (lebih 20%);
  3. Eosinophilia dapat dikesan pada tahap awal. Keadaan ini berlaku apabila infiltrat berlebihan terhadap pelbagai organ. Tuberkulosis yang teruk dengan kerosakan pada orang dewasa membawa kepada ketiadaan lengkap eosinofil;
  4. Peningkatan Basophil.

Ujian makmal untuk tuberkulosis tidak khusus untuk sama ada kanak-kanak atau orang dewasa. Perubahan sedemikian adalah ciri-ciri banyak jangkitan bakteria atau virus.

Petunjuk Hemogram memberi perhatian kepada pakar TB untuk menentukan tahap jangkitan tuberkulosis.

Dengan penyusupan yang aktif, leukositosis dapat dikesan kerana peningkatan jumlah neutrofil. Grit patologi muncul di dalam sel, yang menunjukkan intoksikasi darah.

Pusat-pusat perpecahan membawa kepada penurunan bilangan eosinofil, neutrofil, bentuk muda, limfosit. Apabila penyebaran berlaku, monocytosis mutlak berlaku. Pada latar belakang penyerapan, bilangan limfosit dan eosinofil meningkat.

Pada penyatuan pusat, hemogram tidak dicirikan oleh perubahan.

Ujian kanak-kanak untuk batuk kering: diagnosis tuberculin

Untuk masa yang lama, ahli phthisiatric bertindak reaksi Mantoux. Ujian seperti ini untuk tuberkulosis memungkinkan untuk mengesan bukan sahaja jangkitan aktif, tetapi juga jangkitan. Intipati sampel adalah suntikan subkutaneus tuberculin - suatu bahan yang menyebabkan alergi terhadap badan. Bahan doh yang digunakan diperoleh daripada Micobacterium Bovis. Selepas suntikan subkutaneus, papules diperoleh, yang mencerminkan tindak balas badan terhadap penembusan mikobakteria:

  1. Papula biasa - saiz 5 hingga 16 mm;
  2. Dengan ketiadaan reaksi - kelemahan sistem imun, ketiadaan mikobakteria;
  3. Papules besar - kehadiran antigen bakteria, dengan pembawa bakteria basil.

Kaedah ini tidak dianggap boleh dipercayai kerana sejumlah besar tindak balas positif palsu. Apabila keputusan yang dipersoalkan diperlukan pengesahan PCR. Dengan kemunculan diaskintest (dst), keadaan telah berubah. Penggunaan gabungan kaedah membolehkan memperoleh lebih banyak hasil yang boleh dipercayai.

Kaedah klasik "phthisiological" untuk mendiagnosis tuberkulosis

Phthisiatrik untuk diagnosis tuberkulosis pada kanak-kanak dan orang dewasa menggunakan ujian berikut:

  • Kajian sejarah pesakit (hubungi pesakit atau pembawa bacillus tubercle). Mengenal pasti faktor risiko sosial membantu mencadangkan jangkitan yang mungkin;
  • Penilaian sensitiviti tuberculin (ujian Mantoux) dengan PPD tuberculin pada dos 5-10 TE. Penilaian keputusan dijalankan dalam masa 48-72 jam;
  • Pemeriksaan sinar-X dilakukan pada kanak-kanak dan orang dewasa dengan suspensi tuberkulosis, ujian tuberkulin;
  • Kebudayaan bakteriologi adalah bukti yang tidak dapat disangkal daripada jangkitan yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis. Dengan pengumpulan kuping yang tepat, pengesanan patogen dalam pencucian perut, ujian untuk batuk kering boleh dianggap positif. Tongkat Koch didapati dalam abses berair, kelenjar getah bening, aliran darah ascitic, exudate pleura, air kencing, cecair serebrospinal;
  • Kadar sedimentasi eritrosit meningkat dengan jangkitan apa pun, termasuk batuk kering;
  • PCR membolehkan anda mengenal pasti patogen tertentu, tetapi kajiannya mahal;
  • Diaskintest menentukan tuberkulosis pulmonari, tetapi seringkali memberikan hasil negatif dalam penyetempatan extrapulmonary daripada jangkitan.

Diagnostik moden tuberkulosis dengan menggunakan kaedah yang kompleks membolehkan menentukan mycobacterium dalam badan dengan tahap kebolehpercayaan yang tinggi. Menggunakan kaedah sedia ada, proses atau jangkitan aktif dikesan. Kami hanya memerlukan masa untuk menghubungi pakar!

Apakah analisis PCR untuk tuberkulosis

Kaedah inovatif untuk mengesan mikroorganisma, yang dicipta oleh saintis Cary Mullis pada akhir abad lalu - analisis PCR. Dia menerima untuk tulisannya Hadiah Nobel. Sepenuhnya proses ini dipanggil reaksi rantai polimerase. Ia terdiri daripada pemulihan jenis mikroorganisma dalam biomaterial yang disediakan menggunakan serpihan DNA pendek. Ini membolehkan anda mengesan jangkitan pada peringkat awal dan memulakan rawatan serta-merta, tanpa membawa kepada gejala dan komplikasi yang serius.

Apakah analisisnya

Diagnosa oleh PCR adalah untuk mendapatkan segmen DNA patogen dari bahan biologi dan menyelaraskannya dalam rantai yang betul. Ini membolehkan pengenalpastian mikroorganisma yang dimiliki oleh sel-sel.

Prosedur ini dijalankan dalam tiga peringkat:

  1. Pengumpulan bahan biologi.
  2. Pengenalpastian dan penyelarasan DNA.
  3. Pengiktirafan jangkitan.

Kajian ini memerlukan peralatan perubatan khas - amplificatory. Ia dilengkapi dengan kamera, di mana bahan yang dikaji berinteraksi dengan suhu tinggi dan enzim kimia. Di pintu keluar, juruteknik makmal mempunyai rantai DNA panjang agen penyebabnya, jika ada satu di dalam tubuh manusia.

Bagaimana untuk mempersiapkan diagnosis

Analisis PCR adalah proses kejuruteraan genetik kompleks yang memerlukan ketepatan dan kesungguhan dari kedua-dua juruteknik dan pesakit makmal. Peranan yang besar dalam ketepatan keputusan analisis dimainkan oleh penyediaan prosedur, iaitu pengumpulan bahan yang benar.

Sumber utama maklumat tentang penyakit adalah:

Pilihan lain boleh digunakan, cecair, jika perlu, diambil untuk analisis dari organ yang berlainan.

Bagi pesakit, ada peraturan tertentu yang mesti diikuti sebelum prosedur. Jika terdapat ujian darah, dilarang selama 8 jam sebelum koleksi:

  • makan makanan;
  • untuk merokok;
  • minum minuman beralkohol;
  • mengambil ubat di dalamnya.

Pada waktu petang, sebelum mengumpul dahak, dadah mabuk untuk mengecilkannya dan memudahkan eksploitasi. Pada waktu pagi, kumpulkan bahan selepas kebersihan menyeluruh rongga mulut.

Urin dikumpulkan dalam balang steril pagi pada perut kosong, selepas mencuci, sebelum mengambil sebarang ubat.

Sekiranya seseorang mengambil antibiotik, maka analisis tindak balas rantai polimer perlu ditangguhkan, jika tidak, hasil PCR tidak boleh dipercayai. Sputum atau darah perlu disumbangkan dua minggu selepas berakhirnya rawatan.

Bagaimana proses mengenal pasti bakteria

Secara ringkasnya, proses itu adalah untuk mengasingkan sebahagian daripada DNA. Penggunaan kaedah moden kejuruteraan genetik membolehkan kita menentukan jenis mikroorganisma. Selain itu, bahan untuk analisis memerlukan sejumlah kecil.

Secara teknikal, ini adalah prosedur yang sangat rumit, tetapi ia memerlukan sedikit masa daripada kajian bakteriologi klasik. Patogen tidak perlu diasingkan dari biomaterial, tidak ada keperluan untuk membesar selama beberapa minggu. Pada hari penghantaran, pesakit sudah dapat mengetahui hasil analisisnya.

Seluruh proses PCR berjalan secara berperingkat:

  1. Kerja sedang dijalankan dengan bentuk utama DNA, yang pada suhu tinggi, hampir 100 darjah, dibahagikan kepada dua rantai.
  2. Suhu berkurangan, benang disambungkan kepada serpihan asid nukleik - primer.
  3. Elongation terjadi - sintesis struktur molekul.

Seluruh sesi terdiri daripada kira-kira tiga puluh prosedur sedemikian, mengulangi kitaran sebagai reaksi berantai. Ini adalah perlu untuk mewujudkan bilangan sel di mana bakteria yang dihasilkan menjadi dikenali.

Kesimpulan kajian ini

Deskripsi hasil PCR (tindak balas rantai polimer) memberikan doktor TB, ia mudah atau digunakan. Dalam kes pertama, perihalan hanya akan mengandungi maklumat mengenai kehadiran atau ketiadaan tongkat Koch. Sekiranya penyahkodan terperinci, daripadanya anda dapat mengetahui tahap penyakit, fokusnya. Mengikut kriteria ini, adalah mungkin untuk menentukan rawatan yang paling sesuai untuk batuk kering dalam setiap kes.

Analisis polimerase tindak balas rantai tidak membezakan antara patogen hidup dan mati, dan hanya bercakap tentang kehadiran mereka. Oleh itu, masuk akal untuk lulus ujian kedua untuk tuberkulosis hanya 3-4 minggu selepas terapi terapi yang ditetapkan oleh doktor.

Jika hasilnya positif, tulisan "Mycobacterium tuberculosis" diletakkan pada kesimpulan. Sekiranya terdapat keputusan negatif, bersebelahan dengan nama baku bakteria terdapat tanda "tidak dikesan." Analisis mungkin positif palsu. Ini jarang berlaku - sekiranya berlaku pelanggaran teknik melakukan kajian PCR atau kehadiran mikroorganisma yang tidak berdaya maju. Kesimpulan terakhir mengenai penyakit ini hanya boleh dibuat oleh doktor TB.

Kelebihan kaedah

Diagnosis PCR tuberkulosis telah mendapat populariti kerana banyak sebab. Ia mempunyai banyak kelebihan, termasuk:

  1. Ketepatan penyelidikan. Apabila menganalisis teknologi, adalah mungkin untuk mengenal pasti bakteria, walaupun terdapat dalam jumlah kecil.
  2. Hasil Pantas. Seluruh proses dari mengumpul bahan ke kesimpulan selesai mengambil masa kira-kira 5 jam. Apabila dibandingkan dengan penaburan, ia perlu menunggu sehingga beberapa minggu.
  3. Keselamatan penuh untuk orang itu, tidak seperti fluorografi dengan sinarannya.
  4. Sebarang biomaterial cair digunakan. Untuk pelaksanaan PCR dalam tuberkulosis pulmonari, sputum memberikan maklumat yang paling tepat, dalam meningitis yang berbahaya, sampel diambil dari kord rahim. Ujian darah membantu mengenal pasti penyakit jangkitan tempatan.
  5. Kepekaan bakteria terhadap antibiotik diuji. Ini membolehkan anda menetapkan rawatan yang betul.
  6. Diagnosis awal. Anda boleh mengetahui tentang kehadiran penyakit sebelum permulaan simptomnya.

Di samping aspek positif, terdapat juga kekurangan. Yang utama adalah harga. Analisis PCR tidak murah, yang dikaitkan dengan penggunaan peralatan mahal. Satu lagi kelemahan adalah keperluan untuk menunggu masa untuk ujian semula selepas rawatan untuk tuberkulosis. Kadang-kadang hasil ujian adalah positif palsu. Ini berlaku kerana mutasi bakteria.

Apabila PCR diperlukan

PCR untuk batuk kering paru tidak mempunyai kontraindikasi dan sememangnya selamat. Oleh itu, terdapat situasi dan penyakit tertentu apabila ini adalah satu-satunya kemungkinan penyelidikan.

Ini termasuk:

  • kehamilan;
  • bersentuhan dengan pesakit tabung;
  • kesukaran dalam menentukan diagnosis penyakit paru-paru;
  • pemeriksaan sebelum pembedahan;
  • reaksi alahan;
  • Jangkitan HIV;
  • umur muda.

Anda boleh menggunakan kaedah PCR ke arah yang dikeluarkan dalam phthisiology, serta pakar pediatrik, doktor atau ahli pulmonologi.

Apa yang boleh menggantikan diagnosis PCR tuberkulosis

Jenis tinjauan lain tidak menjadi usang tetapi terus digunakan. Ia digunakan dalam kes di mana ia tidak mungkin untuk melakukan PCR untuk tuberkulosis. Di samping itu, kaedah moden tidak ideal, kadang kala penunjuknya dipersoalkan dan memerlukan pemeriksaan semula.

Kaedah berikut membantu menentukan kehadiran tuberkulosis dalam seseorang:

  • diagnosis tuberculin (Mantoux);
  • fluorografi;
  • pengujian bahan biologi untuk flora;
  • x-ray paru-paru.

Kajian ini adalah percuma dan tersedia untuk semua orang. Tetapi mereka mempunyai kelemahan mereka:

  • Ujian tuberkulosis menyebabkan alahan. Kontraindikasi dalam penyakit kulit.
  • Kajian sinar-X diiringi oleh radiasi, yang tidak berkenaan dengan kanak-kanak, orang yang mengalami kekurangan dan wanita hamil.
  • Analisis bakteriologi mengambil lebih banyak masa, hasilnya boleh menunggu sehingga sebulan.

Alternatif bukan jaminan seratus peratus kesimpulan yang betul. Mereka sering digunakan untuk tujuan pencegahan. Diagnosis tuberkulosis oleh PCR memberikan maklumat yang paling boleh dipercayai. Jika boleh, lebih baik menggunakannya.

Kepastian tuberkulosis pada kanak-kanak dan keperluan untuk PCR

Kanak-kanak perlu dilindungi terutamanya dari penyakit ini - jangkitan tuberkulosis boleh menyebabkan kemudaratan serius kepada badan dengan imuniti belum terbentuk sepenuhnya.

Selepas memasukkan tongkat Koch ke dalam organisma kanak-kanak, perkembangan penyakit itu akan melalui peringkat berikut:

  • Laten. Ia berlangsung sehingga setahun, tanpa memberikan apa-apa gejala.
  • Ketoksikan. Mempengaruhi kesihatan keseluruhan. Kelihatan lemah, tidak peduli, kurang selera makan, mengantuk dan menurun prestasi. Selalunya suhu yang agak tinggi.
  • Bentuk utama penyakit ini. Tuberkulosis adalah setempat, membentuk tumpuan penyakit. Kanak-kanak mempunyai batuk, sesak nafas, sakit kepala, nodus limfa yang bengkak.
  • Bronchoadenitis Tubercular. Gejala adalah kesakitan pada bilah bahu, batuk dengan pelbagai bunyi, mengi.

Biasanya, tuberkulin disuntik untuk mengenal pasti jangkitan di bawah kulit kanak-kanak. Sekiranya pemeriksaan jenis ini dikontraindikasikan, maka PCR untuk tuberkulosis adalah pilihan yang tidak diperlukan untuk diagnosis. Kanak-kanak biasanya mengambil ujian darah, tetapi jika ia diperlukan, sputum dikumpulkan. Sekiranya terdapat kecurigaan kehadiran tuberkulosis, kajian tambahan dijalankan untuk memastikan keputusan positif dan segera memulakan rawatan pada peringkat awal, mencegah perkembangan penyakit ini.

Kaedah penyelidikan moden sentiasa lebih cepat dan lebih dipercayai. Sayang sekali kerana alatan mahal untuk membuat ujian sedemikian ada kemungkinan tidak di semua institusi perubatan dan tempatan. Bagaimana cara untuk menjalankan peperiksaan biasanya dipilih oleh doktor, tetapi pesakit mempunyai hak untuk memilih. Jika anda perlu mengambil ujian PCR, beritahu kami tentangnya dalam ulasan. Jika artikel itu berguna untuk anda, kongsi di rangkaian sosial - mungkin ia akan membantu rakan anda.